论文摘要
目的：WISP3通过调节Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的合成维持软骨稳定性。晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病（SEDT-PA）相关型WISP3突变能阻断此功能而引起软骨丢失。本实验探讨了WISP3对人软骨细胞IGF信号通路的影响，并对野生型及突变型WISP3对人软骨细胞IGF信号通路活化的差异进行了研究。方法：以重组人WISP3蛋白与重组IGF-Ⅰ蛋白干预T／C-28a2细胞，以野生型及突变型WISP3（1000T／C和840delT）转染C20／A4细胞。以免疫沉淀法检测IGF-IRβ和IRS-1的磷酸化，以免疫印记法检测ERK1／2和Akt的磷酸化，从而评估WISP3对IGF信号通路活化的影响。结果：重组人WISP3蛋白抑制T／C-28a2细胞IGF-Ⅰ诱导的IGF-IRβ和其下游IRS-1及ERK1／2的活化。与空白转染组相比，野生型WISP3的稳定转染能抑制C20／A4细胞IGF-IR及其下游IRS-1和ERK1／2的活化，突变型WISP3的稳定转染能增强C20／A4细胞IGF-IR及其下游IRS-1和ERE1／2的活化。结论：WISP3抑制人软骨细胞IGF-IR及其下游IRS-1和ERK1／2的活化；WISP3基因突变可能阻断其与IGF-Ⅰ的结合从而增强人软骨细胞IGF信号通路活化。
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