血管活性肠肽对脓毒症大鼠肝损伤保护作用的初步研究

论文摘要

背景脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合症,其发生机制极其复杂,主要认为是细菌感染所释放的细菌胞壁成分如脂多糖、脂多肽持续激活宿主细胞引起炎症介质过度生成和释放,发生过度炎症反应导致细胞和组织损伤,甚至器官功能衰竭。脓毒症时各器官功能损伤的发生有其相对规律性,其中肝是损伤发生较早、频率较高的脏器。因此,早期防治肝损伤对于治疗脓毒症,降低脓毒症发病率和死亡率具有重要的意义。血管活性肠肽（VIP）是由28个氨基酸残基组成的生物活性肽,具有多种生物学功能,可由免疫细胞合成、释放,发挥免疫调节作用,能够调节抗炎因子与促炎因子之间的平衡,诱导产生能够抑制自身反应性T细胞活性的调节性T细胞。因此我们认为VIP有可能在脓毒症治疗,防治脓毒症肝损伤中起者重要的作用。目的探讨VIP对脓毒症大鼠肝损伤的作用及其可能机制方法本研究拟采用盲肠结扎穿孔法（cecal ligation and puncture, CLP）制备脓毒症大鼠模型,然后给予VIP治疗,采用酶联免疫吸附方法（enzyme linked immuno-sorbent assay, ELISA）检测不同时间点治疗组与对照组肿瘤坏死因子α（TNF-α）,白介素-10（IL-10）,谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的浓度变化以及观察各组大鼠肝脏的病理组织学改变来探讨VIP对脓毒症大鼠肝损伤的作用。结果1.CLP后大鼠血清中炎症因子TNF-a、IL-10水平以及肝功能指标ALT、AST拘浓度显著升高,肝脏病理损害明显,出现脓毒症症状ACLP组大鼠存活率显著低于假手术组大鼠存活率,说明脓毒症大鼠模型的制备是成功的。2.VIP处理后脓毒症大鼠症状减轻,存活率显著高于NS组,在6h、12h和24h时间点促炎因子TNF-α水平均较NS组明显降低,而抗炎因子IL-10水平较NS组明显升高,同时在12h,24h时间点VIP处理组ALT、AST水平较NS组明显降低,表明VIP可以抑制促炎症因子TNF-a释放,促进抗炎症因子IL-10释放,对肝脏具有保护作用。结论1.VIP能减轻脓毒症大鼠肝损伤,提高脓毒症大鼠的生存率。2.VIP对肝损伤的保护作用与抑制促炎症因子生成和促进抗炎症因子生成有关。本研究为VIP应用于临床治疗脓毒症提供了新的实验依据和研究思路。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文縮略词
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 1. 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要材料与试剂
• 1.3 主要仪器
• 2. 方法
• 2.1 大鼠饲养
• 2.2 CLP大鼠模型制备
• 2.3 大鼠取血方法
• 2.4 实验分组
• 2.5 ELISA方法检测TNF-α,IL-I0,ALT,AST水平
• 2.6 各实验组大鼠肝脏组织形态学观察
• 2.7 统计学分析
• 第三章 实验结果
• 1. 大鼠症状,存活率,血清炎症介质变化
• 1.1 大鼠症状改变
• 1.2 VIP处理对脓毒症大鼠存活率的影响
• 1.3 VIP处理对脓毒症大鼠血清炎症因子释放的影响
• 2. VIP处理对脓毒症大鼠肝脏的影响
• 2.1 VIP处理对脓毒症大鼠血清ALT释放的影响
• 2.2 VIP处理对脓毒症大鼠血清AST释放的影响
• 2.3 VIP处理脓毒症大鼠后肝脏病理变化
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 附录
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间主要成绩