论文题目: 第一鳃弓外胚间充质细胞牙向分化差异基因的初步筛选
论文类型: 博士论文
论文专业: 口腔临床医学
作者: 闫征斌
导师: 田卫东
关键词: 第一鳃弓,外胚间充质细胞,干细胞,诱导,分化,抑制消减杂交,牙再生,基因
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 最新的发育生物学研究证实,在颅神经嵴细胞分化形成牙颌骨器官的过程中,先后经历了颅神经嵴→第一鳃弓外胚间充质→牙颌骨外胚间充质两次关键性级联分化。本研究旨在建立Balb/c胎小鼠第一鳃弓外胚间充质细胞体外培养模型,在此基础上,进行多向诱导分化研究,鉴定其干细胞生物学特性。同时,构建第一鳃弓外胚间充质细胞牙向分化双向抑制消减文库,初步筛选、验证、分析差异表达基因,为全面揭示牙发生、发育的分子调控机制提供理论依据。 首先,精确解剖分离孕9.5天(E9.5)Balb/c胎鼠第一鳃弓,采用组织块法和改良酶消化法对其进行原代培养,利用反复贴壁和多次差异消化法对其进行纯化,通过细胞形态观察、细胞生长曲线描记、计算细胞倍增时间和特异性标记物检测对其细胞生物学特性进行研究。其次,利用端粒酶原位杂交荧光探针和Brdu摄取实验,检测第一鳃弓外胚间充质细胞的增殖和自我更新能力;取第3代细胞,更换不同的条件培养液,观察其在成脂、成内皮和矿化诱导液的刺激下,细胞形态学变化,并检测鉴定相应的特异性细胞表型标记,对细胞的可塑性进行研究。然后,在相同的培养条件下,收取第3代第一鳃弓外胚间充质细胞和E16.5下颌第一磨牙牙乳头细胞,采用抑制消减杂交技术,构建双向抑制消减文库,并对细胞的总RNA质量、双链cDNA酶切效果、接头连接率、抑制消减效率、差异基因的富集程度和载体连接效率进行全面质控分析。最后,在双向抑制消减文库中随机挑
论文目录:
缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
实验一 第一鳃弓外胚间充质间充质细胞体外培养模型的构建
实验二 第一鳃弓外胚间充质间充质细胞的干细胞特性研究
实验三 第一鳃弓外胚间充质间充质牙向分化消减文库的建立
实验四 抑制消减文库差异表达基因的初步验证分析
全文总结
参考文献
综述
个人简历
致谢
发布时间: 2005-11-09
参考文献
- [1].颌突外胚间充质干细胞的可塑性研究[D]. 周泽渊.第四军医大学2004
- [2].胞膜窖/窖蛋白在小鼠牙发育过程中作用的初步研究[D]. 杨林.四川大学2007
- [3].小鼠腭裂相关基因的克隆、筛选及功能的研究[D]. 李鑫.中国人民解放军第四军医大学2003
- [4].尼古丁对鼠牙胚发育影响的研究[D]. 王小竞.第四军医大学2002
相关论文
- [1].面突外胚间充质干细胞的多向分化及永生化[D]. 邓蔓菁.中国人民解放军第四军医大学2003
- [2].大鼠颌突外胚间充质干细胞向成牙本质细胞样细胞的定向诱导分化[D]. 张光东.中国人民解放军第四军医大学2003
- [3].牙髓干细胞与外胚间充质干细胞表型和分化能力的比较研究[D]. 王亦菁.第四军医大学2005
- [4].大鼠骨髓间充质干细胞牙向分化潜能的实验研究[D]. 李志勇.四川大学2005
- [5].人牙乳头间充质细胞的分离培养及生长分化的实验研究[D]. 谢家敏.四川大学2005
- [6].牙胚间充质干细胞在不同条件下牙向分化的实验研究[D]. 李晓东.四川大学2004
- [7].颅神经嵴干细胞的体外分离培养及其成牙分化诱导研究[D]. 江宏兵.四川大学2004
- [8].小鼠牙本质涎磷蛋白基因转染诱导成体间充质干细胞牙向分化的实验研究[D]. 朱锋.四川大学2006
- [9].小鼠牙发育关键分子信号转导通路中slimb/β-TrCP调节作用的实验研究[D]. 沈永岱.四川大学2007
- [10].胞膜窖/窖蛋白在小鼠牙发育过程中作用的初步研究[D]. 杨林.四川大学2007
标签：第一鳃弓论文; 外胚间充质细胞论文; 干细胞论文; 诱导论文; 分化论文; 抑制消减杂交论文; 牙再生论文; 基因论文;