导读:本文包含了边缘群论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:《大世界》,动画电影,生存追问,城市群像
边缘群论文文献综述
王春晓[1]（2018）在《荒诞现实下的生存追问——《大世界》与城市边缘群像书写》一文中研究指出在2017年公映的影片中,《大世界》是最特别的一个。不仅脱离国内动画市场的低幼趣味,直面社会问题,还获得了诸多奖项,让影迷看到久违的中国独立动画。电影用荒诞写实的风格,环环相扣的黑色幽默故事,呈现出城市边缘人真实的生存状态。电影中闹剧的结束引发新的思考:在消费主义侵吞自主意识的时代,城市边缘个体该怎样生存?而这追问是当代社会个体无法逃避的现实,也是导演对于中国社会快速转变与混乱失序现实的观察与追问。(本文来源于《电影新作》期刊2018年02期）
樊珈榕,李万福,梁挺[2]（2016）在《小肠黏膜边缘群细胞治疗大鼠短肠综合征的实验研究》一文中研究指出目的探讨小肠黏膜边缘群细胞移植方法治疗大鼠短肠综合征的效果。方法选取胎龄为4周的Wistar小鼠作为小肠黏膜边缘群细胞的供体,并选取20只雌性大鼠作为肠黏膜边缘群细胞的受体大鼠,建立大鼠短肠综合征的模型,观察实验组的大鼠短肠综合征采取小肠黏膜边缘群细胞治疗的结果,并与对照组比较大鼠小肠的基本特征以及对营养物质的吸收情况。结果治疗后2组大鼠的体重呈现逐渐增加的趋势,且小肠黏膜边缘群细胞治疗后大鼠体重的增加程度明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);其次,进行小肠黏膜边缘群细胞治疗的大鼠的小肠的湿度、长度以及面积均显着高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);进行小肠黏膜边缘群细胞治疗的大鼠对木糖、脂肪的吸收率以及氮的利用率均显着高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);行小肠黏膜边缘群细胞治疗的大鼠绒毛高度、隐窝高度分别为(0.41±0.09)mm、(0.21±0.03)mm,与对照组比较有显着的降低,而绒毛密度却明显要比对照组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论使用小肠黏膜边缘群细胞移植的方法治疗大鼠短肠综合征能显着地提高小肠对营养的吸收能力,其在临床中应用具有一定的指导意义。(本文来源于《中华全科医学》期刊2016年02期）
周衍亮,党军强,任涛,胡昭华,朱政峰[3]（2015）在《上调miR-200a表达对人肝癌细胞MHCC97中边缘群细胞干细胞特性的影响》一文中研究指出目的:探讨转染miR-200a mimics对人肝癌细胞系MHCC97中边缘群细胞(SP)干细胞特性的影响。方法:利用流式细胞技术从MHCC97细胞中分离出SP细胞。转染组为应用脂质体介导转染miR-200a mimics的SP细胞,对照组为未接受转染的SP细胞。采用实时荧光定量RT-PCR检测两组SP细胞miR-200a的表达情况。四甲基偶氮唑盐(MTT)和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖情况。Transwell小室检测细胞迁移能力。裸鼠成瘤实验检测细胞体外成瘤能力。结果:转染miR-200a mimics可明显上调SP细胞miR-200a的表达。MTT结果显示转染组SP细胞的增殖能力明显低于对照组(P<0.05),转染组软琼脂中克隆形成率(24.70±5.54)%明显低于对照组(51.63±7.11)%(P<0.05)。Transwell实验显示转染组细胞穿膜数为(18.52±4.27)个,明显少于对照组(63.34±7.41)个(P<0.05)。裸鼠成瘤实验中转染组成瘤数(1/8)也低于对照组(8/8)(P<0.05)。结论:上调人肝癌细胞系MHCC97中SP细胞miR-200a的表达,能够抑制SP细胞的增殖和迁移,降低体外成瘤能力,即抑制SP细胞的干细胞特性。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2015年17期）
张永锋,杨晋,谭永港,杨敏,陈嫚茵[4]（2012）在《新生小鼠肠边缘群细胞蛋白质组双向电泳图谱的差异表达》一文中研究指出目的筛选肠道干细胞特征性的差异蛋白质或蛋白质群。方法采用双向凝胶电泳方法分离新生小鼠肠边缘群细胞与肠上皮细胞总蛋白,表达差异超过1.5倍的为差异蛋白质。结果成功建立小鼠肠边缘群细胞与肠上皮细胞的双向电泳图谱,筛选出差异蛋白点39个。结论小鼠肠干细胞与上皮细胞的蛋白表达谱存在差异,有可能成为潜在的、有应用价值的肠道干细胞鉴别分子标志。(本文来源于《现代中西医结合杂志》期刊2012年28期）
张永锋,杨晋,谭永港,陈嫚茵,杨敏[5]（2012）在《新生小鼠肠边缘群细胞蛋白质组的差异蛋白分析》一文中研究指出[目的]筛选肠道干细胞特征的差异蛋白质或蛋白质群。[方法]采用双向凝胶电泳方法分离新生小鼠肠边缘群细胞与肠上皮细胞总蛋白,选择差异表达超过1.5倍的蛋白质进行质谱分析及数据库搜索、鉴定。[结果]成功建立小鼠肠边缘群细胞与肠上皮细胞的双向电泳图谱,筛选出差异蛋白点39个,质谱分析及数据库搜索共鉴定出32种蛋白质。[结论]小鼠肠干细胞与上皮细胞的蛋白表达谱存在差异,鉴定出的32种蛋白质有可能成为潜在的、有应用价值的肠道干细胞鉴别分子标志。(本文来源于《中国中西医结合消化杂志》期刊2012年08期）
王波,夏羽佳,晏维,夏丽敏,田德安[6]（2010）在《肝癌细胞系SMMC-7721中边缘群细胞在低氧诱导的上皮间质转化调控下的表达》一文中研究指出目的:探讨低氧状态下上皮间质转化对SMMC-7721中边缘群细胞的影响.方法:低氧培养SMMC-7721细胞,动态观察细胞形态学变化,Westernblot和免疫荧光检测上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关指标钙粘连蛋白(E-cadherin)的表达,通过流式细胞仪分析诱导前后边缘群(side population,SP)细胞含量的变化.结果:低氧诱导72h后SMMC-7721细胞逐渐由原来的多角形变成类似于成纤维样的长梭形,排列松散,E-cadherin的表达下调,其相对定量值与正常培养相比,差异具有显着意义(0.41±0.23vs2.03±0.43,P<0.01),SP细胞含量也明显降低(4.3%vs0.0%,P<0.01).结论:低氧能够诱导肿瘤细胞SMMC-7721发生EMT,同时SP细胞的含量下降.EMT可能抑制了肿瘤干细胞的增殖,促进肿瘤细胞向侵袭和转移的方向发展.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2010年26期）
王波,夏羽佳,晏维,夏丽敏,刘梅[7]（2010）在《TGF-β1诱导的上皮间质转化对肝癌细胞系中边缘群细胞的调控》一文中研究指出目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的上皮间质转化(EMT)对SMMC-7721中SP细胞的影响.方法:常规培养人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2,利用流式细胞术分析肝癌细胞系中SP细胞的含量并分选出SP细胞,Western blot检测ABCG2蛋白的表达.TGF-β1诱导肝癌细胞SMMC-7721,动态观察细胞形态学变化,Western blot和免疫荧光检测EMT相关指标钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,通过流式细胞仪分析TGF-β1诱导前后SP细胞含量的变化.结果:利用流式细胞术成功建立了肝癌SP细胞分选体系.检测发现,SMMC-7721中SP细胞含量为4.3%,Western blot显示该SP细胞ABCG2蛋白表达明显上调.而HepG2中未能检测出SP细胞.TGF-β1诱导72h后SMMC-7721细胞发生上皮间质转化,Western blot和免疫荧光检测发现E-cadherin蛋白的表达下调,同时SP细胞含量也明显降低.结论:不同肝癌细胞系中SP细胞含量的差别可能与细胞系的遗传背景和性质不同有关.EMT可能抑制了肿瘤干细胞的增殖,促进肿瘤细胞向侵袭和转移的方向发展.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2010年23期）
胡菲菲[8]（2010）在《小鼠子宫内膜边缘群干/祖细胞的研究》一文中研究指出子宫内膜是具有高度增殖活性的组织。在人正常月经周期中,子宫内膜受卵巢性激素影响而发生周期性的再生、分化和剥脱;子宫内膜的再生可发生于分娩后及内膜刮除术后;用雌激素替代治疗的绝经后妇女子宫内膜亦具有极强的再生能力。在没有月经周期的物种,其子宫内膜随激素水平变化发生周期性的增殖与凋亡。早年即有学者提出子宫内膜干细胞假说,认为位于子宫内膜基底层的干细胞参与子宫内膜功能层的增生修复。多年的临床观察和基础研究证实这一假说。近年众多学者提出,子宫内膜干细胞可能含有上皮和基质两种类型的干细胞;子宫内膜干细胞数量、功能、调控和定位机制的改变可能参与了内膜增生异常相关疾病的发生与发展,这些研究才刚起步。最近,有学者应用边缘群(Side population, SP)细胞的分选原理从人的子宫内膜中分离出了干/祖细胞群。但是,受人子宫内膜材料来源和伦理学的限制,许多人子宫内膜功能性研究、相关人子宫内膜干/祖细胞生物学研究和应用研究仍难以进展。小鼠广泛应用于各种人体生理及病理模型研究,建立小鼠子宫内膜SP细胞分选方法、阐明小鼠子宫内膜干/祖细胞的功能及生物学特性,将有助于进一步明确干/祖细胞在子宫内膜再生过程中的作用及其机制,为人类相关生理与病理机制的研究提供参考,也为新药研究提供了实验材料。本研究应用SP细胞的分选原理,从成年小鼠的子宫内膜中分选SP细胞,鉴定其干/祖细胞特性、体外培养,探讨性激素对子宫内膜SP细胞的作用,为今后进一步研究子宫内膜干细胞的功能特性,参与子宫内膜再生修复的机制及研究人类子宫内膜相关疾病提供研究模型。研究方法包括:(1)应用酶消化和机械分离结合的方法与机械研磨分离的方法制备小鼠原代子宫内膜细胞悬液,通过Hoechst33342-SP法,使用流式细胞仪分选小鼠子宫内膜SP细胞。(2)测定SP细胞CD34,CD45,CD105,SCA-1及c-Kit等干细胞表面标记物的表达情况;采用免疫荧光技术测定其细胞组分。(3)通过细胞周期分析及细胞克隆形成实验鉴定其干细胞功能特性。(4)测定SP细胞表型相关基因BCRP1/ABCG2的表达,并采用免疫荧光技术对SP细胞进行定位。(5)探讨雌激素对体外培养的SP细胞生长分化的作用。结果:(1)采用酶消化和机械分离结合的方法与机械研磨分离的方法制备小鼠原代子宫内膜细胞悬液,两种方法均可获得足够数量的单细胞悬液用于SP细胞检测。机械研磨法获得的细胞悬液染色后无法测得SP细胞,并且细胞碎片多,不适用于分选SP细胞;酶消化和机械分离结合的方法制备的细胞悬液可稳定测得SP细胞,碎片少,适用于分选SP细胞。(2)采用Hoechst33342-SP法无法从正常动情周期小鼠子宫内膜中分离SP细胞,而在产后小鼠子宫内膜可以稳定获得SP细胞。将纯系ICR小鼠与GFP荧光小鼠合笼后测定其产后子宫内膜SP细胞的GFP荧光表达情况发现,SP细胞不表达GFP荧光,SP细胞是来自母体子宫的原位组织细胞,不是来自胎儿组织的残留细胞。(3)SP细胞的含量呈现一定的时间变化趋势。在产后第一天即可测得0.88±0.54%SP细胞,之后含量逐渐升高,在产后第17.5天的含量达到高峰,为13.95±3.42%。随后,SP含量逐渐下降,在产后第60天基本无法测得独立的SP细胞群。(4)SP细胞群具有不均一性,通过测定上皮细胞及间质细胞标记分子CK-18和Vimenin的表达发现,SP细胞以间质细胞(90.82±1.83%)为主,7.83±2.27%的SP细胞表达CK-18,少数(9.23±3.08%)SP细胞表达αSMA,为肌性细胞。(5)SP细胞来自母体子宫,大部分细胞不表达骨髓干细胞、间充质干细胞的表面标记物。SP细胞中,11.75±2.39%表达CD34, 8.95±5.51%表达CD45;4.27±1.30%表达CD44,2.64±0.48%表达CD105。SP细胞不表达内皮祖细胞的分子标记物CD31。SP细胞表达干细胞标记分子,是以间质细胞为主的不均一干/祖细胞群。2.57±1.67%的SP细胞表达c-kit,Sca-1+细胞含量达41.71±15.05%。(6)SP细胞具有一定的干细胞生物学特性。SP细胞主要位于细胞周期静息期,G0/G1期细胞比例达86.34±5.73%, 13.15±5.44%的SP细胞处于G2期,0.5±0.34%的细胞处于S期。细胞克隆形成实验的结果表明,SP细胞可以进行体外培养,低密度接种条件下,克隆形成率显着高于非SP细胞,即MP(mian population)细胞:以300个细胞/cm2密度接种时,SP细胞的克隆形成率为0.37±0.06%,MP细胞的克隆形成率为0.14±0.05%(n=11,p<0.01)。在500个细胞/cm2接种条件下时,SP细胞的克隆形成率为0.52±0.13%,MP细胞的克隆形成率为0.12±0.02%(n=11,p<0.01),差异均具有统计学意义。SP细胞表达其表型相关标记分子BCRP1/ABCG2,主要定位于子宫内膜间质区域的间质细胞、血管内皮细胞及极少数腺上皮细胞。(7)SP细胞接种于小鼠肾包膜下的体内实验显示,SP细胞具有在体生长分化的能力,在肾包膜下可增殖分化形成类似子宫内膜样的组织,具有体内增殖与分化的干细胞特性。(8)SP细胞表达雌激素受体,受体内雌激素的调节。新鲜分离所得的SP细胞中,75.18±5.47%表达雌激素受体α;SP细胞雌激素受体的表达量显着高于MP细胞;Real-timePCR及Western Blot的结果表明产后子宫内膜雌激素及其受体的表达量变化趋势与SP细胞含量的变化类似,但是表达高峰在产后第14天,产后第17.5天表达量亦较高,但低于第14天的表达量;免疫组化结果显示产后小鼠子宫内膜中雌激素受体主要分布趋势与Real-time及Western Blot的结果相符合。产后第1及第3天表达雌激素受体的细胞很少,主要分布于腔上皮下的少量间质细胞,产后第7天起,雌激素受体表达量升高,表达雌激素受体的细胞主要分布于子宫内膜间质区,表达于间质细胞、腺上皮细胞及少量血管内皮细胞。(9)雌二醇通过经典途径,对SP细胞具有促增殖和促分化两方面的作用。高浓度雌二醇作用后促增殖效应更明显,而接近生理浓度的雌二醇作用后促分化的作用更为显着。体外培养的条件下,10-6,10-7,10-8M叁种浓度的雌二醇均可促进SP细胞的增殖,加入抑制剂ICI182780后,雌二醇对SP细胞的促增殖作用可被其阻断,10-6M浓度的雌二醇促增殖作用显着;雌二醇作用于SP细胞克隆形成实验结果显示,10-6,10-7,10-8M叁种浓度的雌二醇作用后,SP细胞的克隆形成率分别为0.24±0.07%、0.19±0.06%和0.21±0.04%,大克隆形成率为0.07±0.05%、0.04±0.03%和0.02±0.01%,较对照组均呈下降趋势,其作用可被ICI抑制;但是,随着雌二醇浓度的增加SP细胞大克隆数又呈现递增趋势。结论:(1)本研究利用Hoechst33342-SP原理,成功建立采用酶消化和机械分离结合法制备小鼠子宫内膜单细胞悬液、从产后小鼠子宫内膜获得SP细胞的方法,为进一步研究SP细胞的特性奠定了方法学基础;此SP细胞群为不均一干/祖细胞群,以间质细胞为主要组成部分,含有少量的上皮细胞和肌性细胞; SP细胞在正常动情周期中无法测得,在产后一定时间段内的内膜中可测得,含量随时间的变化先升高,后降低至无法测得;(2)SP细胞生物学和干细胞性质表明,SP细胞是来自子宫内膜原位组织的干/祖细胞群,表达干细胞标记物,具有体外形成细胞克隆的干细胞特性,是小鼠子宫内膜成体干细胞候选细胞,可用于进一步研究其参与内膜再生的调控机制;(3)SP细胞受雌激素的调节,表明性激素能够调控子宫内膜干/祖细胞增殖与分化,参与内膜组织的重建。本研究发现小鼠子宫内膜与人的子宫内膜一样,含有SP干/组细胞群,在雌激素的作用下发生增殖分化,参与内膜的再生修复。进一步研究此小鼠子宫内膜干细胞的功能及相关机制,可为人类子宫内膜干细胞参与生理甚至病理性内膜再生相关机制的研究提供参考,为子宫内膜增殖异常相关疾病的治疗提供新的切入点。(本文来源于《南京医科大学》期刊2010-06-01）
徐静[9]（2010）在《子宫内膜边缘群干/祖细胞增殖与分化的研究》一文中研究指出研究背景:干细胞是具有高度自我更新能力和多向分化潜能的细胞群体,根据其发育阶段又分为胚胎干细胞和成体干细胞。成体干细胞是存在于发育成熟机体器官组织中的未分化细胞,是组织器官修复再生的基础。成体干细胞具有单向及多向发展潜能,长期以静止状态位于组织特定区域内,在组织损伤或发生疾病时可被激活开始分裂,参与组织增生修复,具有广阔的研究和应用前景。SP(side population)细胞,又称为边缘群细胞、侧群细胞,具有依赖膜蛋白ABCG2( ATP-binding cassette superfamily G member 2 , ABCG2 )将荧光染料Hoechst33342排出胞外的特性。研究发现SP细胞存在于小肠、结肠、肝、肺、肾等多种组织器官,是一类具有干细胞特性的细胞亚群。子宫内膜是一种具有高度增殖活性的组织,存在子宫内膜干细胞。前期工作中,我们在产后小鼠子宫内膜中发现了SP细胞群,鉴定后发现系一群不均一的干/祖细胞群,随产后时间点不同SP细胞含量呈现先升高后下降的单峰分布。研究目的:本文在成功分选与鉴定子宫内膜SP细胞的基础上,研究SP细胞体内、体外分化与增殖特性,研究分化与增殖的调控。通过分析小鼠产后不同时间点血清E2水平,子宫雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)表达水平的变化情况,结合SP细胞含量的变化趋势探讨叁者内在联系;通过运用不同浓度E2作用于体外培养的SP细胞,研究E2对SP细胞体外增殖与分化的影响;同时将SP细胞接种裸鼠,予以外源性E2作用后观察SP细胞在体分化情况。这些研究为进一步探讨SP细胞在子宫内膜修复的作用和子宫内膜增殖异常相关疾病的病理机制奠定基础。材料与方法:(1)采用本实验室已建立的方法分选出SP细胞群。免疫荧光与RT-PCR方法检测SP细胞CK-18、Vimentin、αSMA与ABCG2的表达及定位,进行鉴定。(2)RT-PCR及免疫荧光检测SP细胞ERα表达。(3)测定产后不同时间点(d_1、d_3、d_7、d_(14)、d_(17.5)、d_(21)、d_(28))SP细胞含量变化,放射免疫法检测小鼠产后不同时间点(d_1、d_7、d_(14)、d_(18)、d_(21)、d_(28))血清E2水平变化,RealtimePCR、Westernblot及免疫组化方法检测产后小鼠子宫ERα表达及定位。(4)运用不同浓度的E_2(10~(-8)M～10~(-6)M)及E_2+ICI182780(ERα抑制剂)作用于分选出的SP细胞24h后MTT实验检测SP细胞增殖变化;作用15天后计算SP细胞克隆形成率及大克隆形成率;作用3周后免疫荧光检测CK-18与Vimentin的表达。(5)将SP细胞注射于裸鼠肾包膜下,予以外源性E2,8周后,取双肾制蜡块切片行HE染色及免疫组化,检测CK-18、Vimentin、Desmin、αSMA的表达。结果: (1)RT-PCR及免疫荧光显示SP细胞表达ABCG2,非SP细胞不表达ABCG2;大部分SP细胞表达Vimentin,少量表达CK-18及αSMA。(2)RT-PCR与免疫荧光显示,SP细胞高表达ERα。(3)产后小鼠血清E2及子宫组织ERα表达均呈现先升高后逐步下降的趋势(P<0.05)。SP细胞含量随产后时间点变化呈现先升高后下降的单峰分布,产后17.5天左右达到峰值(13.95%)。产后d_1 ERα少量表达于子宫内膜腔上皮细胞,d_7间质及腺上皮细胞开始表达增加,d_(14)～d_(18)ERα在间质区及腺上皮表达显著增多,其中d_(14)以间质细胞表达为主,d_(18)以腺上皮细胞表达为主,d21ERα表达明显减少,d_(28)仅间质极少量表达。SP细胞特异的ABCG2主要表达于产后子宫内膜间质区,少量位于血管内皮细胞及腺上皮,腔上皮没有表达。(4)与对照组相比,10~(-6)M E_2作用SP细胞24h后能明显促进SP细胞增殖(P<0.05),这种作用能被ERα特异性的抑制剂ICI182780所阻断(P<0.05)。各E_2浓度组之间SP细胞克隆形成率没有差异,10~(-7)M、10~(-8)M E_2组SP细胞大克隆形成率明显下降(P<0.05),且作用能被ICI182780阻断(P<0.05)。与对照组相比,各实验组之间CK-18的表达没有明显差异,10~(-8)M E_2组Vimentin的表达有增加的趋势。(5)8周后处死裸鼠取肾脏行HE染色于肾髓质区发现一团排列紧密的异常细胞团,已向周围肾小管间隙浸润,免疫组化显示该细胞群较明显的表达CK-18、Vimentin,少量表达Desmin,不表达αSMA。结论:(1)小鼠子宫内膜SP细胞系一群不均一干/祖细胞群,高表达ERα。(2)产后小鼠子宫内膜的SP细胞比率随产后时间点变化呈现先升高后下降的趋势。小鼠血清E2水平、子宫组织ERα的基因及蛋白表达水平也呈现与SP细胞率相似的变化曲线。与ABCG2主要表达部位相似,产后子宫组织ERα大部分也表达在间质及腺上皮。说明E_2通过ERα介导作用于SP细胞参与了子宫内膜的修复。(3)E_2经由ERα对SP细胞具有促增殖和促分化两方面的作用,在高浓度时促SP细胞增殖效应比较明显,而在接近生理浓度时则更突显促SP细胞分化的作用,尤其是向间质分化的趋势。(4)在E2作用下,小鼠产后子宫内膜SP细胞在体内可能具有分化出间质及上皮样组织结构的潜能,尤其是间质样结构。(5)这些研究为进一步探讨SP细胞在子宫内膜修复的作用和子宫内膜增殖异常相关疾病的病理机制奠定基础,也为子宫内膜SP细胞可能的实验和临床应用积累了研究资料。(本文来源于《南京医科大学》期刊2010-05-01）
张宁[10]（2010）在《边缘群细胞在肝癌发生和转移中的作用研究》一文中研究指出肿瘤的发生与发展机制一直是学者广泛关注的热点领域。通过对血液系统肿瘤、神经系统肿瘤以及乳腺癌等多种肿瘤的研究,有学者提出了干细胞样肿瘤细胞假说。该理论认为,肿瘤可能是正常干细胞在长期自我更新过程中,由于多基因突变积累导致自我更新失调而形成的无限增殖的异常组织。肿瘤组织中极少数的具有自我更新及多向分化潜能的干细胞样细胞,在肿瘤的发生、发展、耐药、复发及转移中均可能发挥至关重要的作用。肝癌是我国发病率最高的恶性肿瘤之一,因其对放、化疗不敏感,且复发和转移现象已成为肝癌治疗中的首要难题,致使肝癌预后较差,严重威胁着患者的生命。目前肝癌的发生及其进展机制尚不明确,随着对干细胞样肿瘤细胞假说的逐步论证,也有学者推测,干细胞样肿瘤细胞在肝癌的发生发展中起重要作用。MHCC97细胞系为高转移肝癌细胞株,是研究肝癌发生及转移的有利模型。目前对MHCC97细胞系中干细胞样细胞的生物学特性及其与肿瘤转移的关系等研究尚属空白。本实验利用紫外光源激发的流式细胞荧光激活分选法,分离获得MHCC97细胞系中的边缘群细胞,并进一步分析这群细胞在细胞分化能力、自我更新能力、细胞周期状态、耐药能力以及致瘤能力等方面的特性,揭示了MHCC97中边缘群细胞在肝癌发生中的重要作用。此外,本研究还首次利用上述方法对肝癌边缘群细胞和肝癌转移的关系加以研究,为阐明肝癌的转移机制奠定基础。实验一:肝癌细胞中边缘群细胞与主群细胞的分离目的:应用紫外光源激发的流式细胞荧光激活分选法分选肝癌细胞系MHCC97中边缘群和主群细胞。方法:制备Hoechst33342染色的肝癌单细胞悬液,流式细胞仪进行双荧光分析。基于干细胞样细胞具有主动外排染料的特性,将低Hoechst Red及低Hoechst Blue荧光信号且对照组缺失的鸟嘴形区域设定为边缘群细胞区域,多数细胞集中处为主群细胞区域,分选出SP细胞和MP细胞。结果:MHCC97、Huh-7和HepG2细胞系中均有边缘群细胞,占总体细胞比例分别为2.78%、0.39%和0.12%,主群细胞比例均大于50%。考虑实验的可操作性,选用MHCC97细胞进行分选,结果显示两亚群细胞分选纯度均高于97%,满足后续实验要求。原位培养的MHCC97细胞染色后显微镜下观察发现,大多数贴壁细胞的胞核与DNA染料结合呈蓝紫色。极少数细胞镜下未见核蓝染,这部分细胞即为具有主动外排Hoechst33342染料功能的边缘细胞。结论:MHCC97、Huh-7和HepG2细胞系中均含有边缘群细胞,应用紫外光源激发的流式细胞荧光激活分选法可稳定分选MHCC97中边缘群和主群细胞。实验二:肝癌细胞中边缘群细胞与主群细胞的生物学特性分析目的:研究MHCC97细胞系中边缘群和主群细胞的生物学特性,明确边缘群细胞在肝癌发生中的重要作用。方法:应用体外培养方法观察边缘群和主群细胞自我更新能力;应用Hoechst33342和Pyronin Y双染色方法测定两亚群细胞的细胞周期状态;应用实时PCR技术研究两亚群细胞中甲胎蛋白(AFP)、CK19和ABCG2/BCRP1的表达情况;通过与化疗药物共培养观察两亚群细胞的耐药性;应用免疫缺陷动物致瘤模型了解边缘群和主群细胞的致瘤能力。结果:边缘群细胞可产生边缘群和主群细胞,且边缘群细胞比例增高至(4.82±0.32)%,而主群细胞不能产生边缘群细胞。边缘群和主群细胞中处于细胞周期G0、G1和S/G2/M期的比例分别为(13.03±2.51)%, (63.90±1.95)%, (23.07±2.60)%和(0.73±0.31)%, (27.63±5.59)%, (71.63±5.62)%。边缘群细胞中AFP、CK19和ABCG2/BCRP1的表达水平为主群细胞的(1.81±0.15)倍、(1.61±0.13)倍和(1.85±0.13)倍。经多柔比星或甲氨蝶呤处理,边缘群细胞存活率为(76.6±5.6)%和(59.8±6.2)%,高于主群细胞存活率(36.8±3.6)%和(39.1±48)%。多柔比星作用3天后边缘群细胞比例上升至(5.2±0.36)%。接种1×103和1×104个边缘群细胞,5只裸鼠中分别有3只和4只成瘤。接种1×103个主群细胞无肿瘤形成,接种1×104个主群细胞,仅有1只裸鼠成瘤。病理结果提示所形成肿瘤均符合肝癌表现。结论:边缘群细胞较主群细胞,具有更强的自我更新能力及向肝细胞和胆管细胞双向分化的潜能,它们处于细胞周期中静止的G0/G1期,符合干细胞的慢周期特性,具有更强的耐药性和致瘤能力,在肝癌的发生中起到“种子细胞”的作用。实验叁:肝癌细胞中边缘群细胞与主群细胞的转移相关特性分析目的:研究MHCC97细胞系中边缘群和主群细胞的转移能力。方法:选择CXCL12/CXCR4轴为切入点,应用流式细胞技术检测CXCL12作用后丝状机动蛋白F-actin的聚合水平;应用Transwell体系观察趋化因子CXCL12作用后边缘群和主群细胞趋化能力。结果:边缘群细胞在与CXCL12作用后第3、5和10分钟时,F-actin的聚合水平相对值为1.27±0.17、1.43±0.16和1.29±0.13,明显高于主群细胞相对值1.12±0.15、1.14±0.18和1.10±0.17。下室中加入CXCL12的组别中边缘群细胞其相对迁移指数为(1.56±0.10),而下室中加入CXCL12的主群细胞和下室中未加入CXCL12的边缘群细胞其相对迁移指数仅为(1.16±0.08)和(1.05±0.07)。结论:边缘群细胞对趋化因子CXCL12的反应程度高于主群细胞,具有更强的趋化性,提示边缘群细胞在肝癌的转移中可能起关键作用。综上,我们的研究从多个角度证实了MHCC97细胞中的边缘群细胞具有干细胞样特性和较强的致瘤性,在肿瘤的发生中至关重要。此外,我们也证实,MHCC97细胞系的边缘群细胞较主群细胞具有更强的化疗药物耐药性和对在肝、脑、肺、骨等肝癌转移高发部位高表达的趋化因子CXCL12的趋化性,提示这群细胞在肝癌的化疗耐药和肝内或远处转移中发挥重要作用。这一研究为揭示肝癌发生及进展机制奠定了理论基础,并将为肝癌的早期诊断、预后判断以及临床治疗提供新的思路,将为应对肝癌的耐药、转移和复发提供新的策略。(本文来源于《第四军医大学》期刊2010-04-01）
边缘群论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨小肠黏膜边缘群细胞移植方法治疗大鼠短肠综合征的效果。方法选取胎龄为4周的Wistar小鼠作为小肠黏膜边缘群细胞的供体,并选取20只雌性大鼠作为肠黏膜边缘群细胞的受体大鼠,建立大鼠短肠综合征的模型,观察实验组的大鼠短肠综合征采取小肠黏膜边缘群细胞治疗的结果,并与对照组比较大鼠小肠的基本特征以及对营养物质的吸收情况。结果治疗后2组大鼠的体重呈现逐渐增加的趋势,且小肠黏膜边缘群细胞治疗后大鼠体重的增加程度明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);其次,进行小肠黏膜边缘群细胞治疗的大鼠的小肠的湿度、长度以及面积均显着高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);进行小肠黏膜边缘群细胞治疗的大鼠对木糖、脂肪的吸收率以及氮的利用率均显着高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);行小肠黏膜边缘群细胞治疗的大鼠绒毛高度、隐窝高度分别为(0.41±0.09)mm、(0.21±0.03)mm,与对照组比较有显着的降低,而绒毛密度却明显要比对照组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论使用小肠黏膜边缘群细胞移植的方法治疗大鼠短肠综合征能显着地提高小肠对营养的吸收能力,其在临床中应用具有一定的指导意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
边缘群论文参考文献
[1].王春晓.荒诞现实下的生存追问——《大世界》与城市边缘群像书写[J].电影新作.2018
[2].樊珈榕,李万福,梁挺.小肠黏膜边缘群细胞治疗大鼠短肠综合征的实验研究[J].中华全科医学.2016
[3].周衍亮,党军强,任涛,胡昭华,朱政峰.上调miR-200a表达对人肝癌细胞MHCC97中边缘群细胞干细胞特性的影响[J].现代肿瘤医学.2015
[4].张永锋,杨晋,谭永港,杨敏,陈嫚茵.新生小鼠肠边缘群细胞蛋白质组双向电泳图谱的差异表达[J].现代中西医结合杂志.2012
[5].张永锋,杨晋,谭永港,陈嫚茵,杨敏.新生小鼠肠边缘群细胞蛋白质组的差异蛋白分析[J].中国中西医结合消化杂志.2012
[6].王波,夏羽佳,晏维,夏丽敏,田德安.肝癌细胞系SMMC-7721中边缘群细胞在低氧诱导的上皮间质转化调控下的表达[J].世界华人消化杂志.2010
[7].王波,夏羽佳,晏维,夏丽敏,刘梅.TGF-β1诱导的上皮间质转化对肝癌细胞系中边缘群细胞的调控[J].世界华人消化杂志.2010
[8].胡菲菲.小鼠子宫内膜边缘群干/祖细胞的研究[D].南京医科大学.2010
[9].徐静.子宫内膜边缘群干/祖细胞增殖与分化的研究[D].南京医科大学.2010
[10].张宁.边缘群细胞在肝癌发生和转移中的作用研究[D].第四军医大学.2010