竹叶黄酮的提取、纯化、鉴定及其抗氧化和抑菌活性研究

论文摘要

竹叶黄酮是我国新开发的一种植物类黄酮制剂,由于其具有优良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、及保护心血管等方面的生物学功效,目前已受到国内外市场的广泛关注。本论文采用天然楠竹叶为原料,对竹叶黄酮的提取、含量检测、分离纯化、抗氧化及抑菌活性等方面作了较系统的研究,主要研究内容和实验结果如下:采用超临界流体萃取技术和正交实验法优选出萃取竹叶中黄酮化合物的最佳工艺条件,即选择萃取压力为20MPa,萃取温度为60℃,萃取时间为60min,夹带剂浓度为10%,其得率为7.27%,竹叶黄酮纯度为6.82%（以总黄酮计）,该方法高效、快速、后处理简单。本研究选用ADS-17大孔树脂为吸附材料作柱层析纯化,对比不同浓度梯度乙醇作洗脱剂的洗脱效果,采用30%乙醇水溶液作流动相,通过大孔树脂纯化得到的产物中竹叶黄酮的纯度达到16.57%,得率为4.21%（以总黄酮计）。以竹叶黄酮为研究对象,通过HPLC、IR对样品进行了定性分析,分别采用硫代巴比妥酸法、化学发光法和FRAP法测定了其在脂质体系中抗氧化活性、清除超氧阴离子的能力和总抗氧化能力,并通过滤纸片法对其抑菌活性进行了研究。结果表明竹叶黄酮样品中可能存在17种黄酮类化合物。其在脂质体系具有明显的抗氧化能力,存在较好的浓度效应关系y=0.0002x+0.2413,R2=0.97,其IC50=1293.5mg/L,竹叶黄酮对O2-·有清除作用,且在实验条件下黄酮浓度与清除率成线性关系:y=0.0007x+0.1713,R2=0.9907,其IC50为469.5714mg/L。其总抗氧化能力,在一定范围内与浓度呈线性关系。滤纸片法结果证实竹叶黄酮对大肠杆菌具有一定的抑制作用。说明竹叶黄酮样品具有抗氧化能力和抑菌活性。通过以上一系列的实验证明,竹叶黄酮确实是一种优良的黄酮类制剂。本课题的研究为竹叶资源的开发和利用提供了重要的理论依据和实践指导。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 前言
• 2 竹叶的有效成分
• 2.1 竹叶黄酮及其苷类
• 2.2 竹叶活性多糖
• 2.3 竹叶中含有的特种氨基酸
• 2.4 竹叶中的芳香成分
• 2.5 竹叶中的矿质元素
• 2.6 竹叶中的叶绿素
• 3 竹叶的生理功能作用
• 3.1 抗活性氧自由基与类SOD活性
• 3.2 抗衰老和抗疲劳作用
• 3.3 抗脂质过氧化能力
• 3.4 竹叶提取物对亚硝化反应有阻断作用
• 3.5 竹叶提取物有明显的降血脂和降血清胆固醇的作用
• 3.6 竹叶提取物有明显的抗癌活性
• 4 竹叶开发应用概况
• 4.1 作为多功能食品添加剂
• 4.2 作为医药中间体和化妆品添加剂
• 4.3 作为保健品原料或膳食补充剂
• 4.4 作为饲料添加剂
• 4.5 开发保健饮料
• 5 竹叶资源开发利用中存在的问题
• 6 课题的意义和课题内容
• 6.1 研究的目的和意义
• 6.2 研究的主要内容
• 第二章 竹叶黄酮的超临界流体萃取
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 研究方法
• 2 结果与分析
• 2.1 芦丁标准溶液最大吸收波长的测定
• 2.2 芦丁标准曲线及线形回归方程
• 2.3 样品中黄酮含量的测定
• 2.4 正交实验结果
• 3 结论
• 第三章 竹叶黄酮的纯化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 研究方法
• 2 结果与分析
• 2.1 竹叶黄酮的纯化
• 2.2 纯化目标产物-竹叶黄酮含量测定
• 3 结论
• 第四章 竹叶黄酮的分离、鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 研究方法
• 2 结果与分析
• 2.1 竹叶黄酮的液相色谱分析
• 2.2 竹叶黄酮的红外光谱分析
• 3 结论
• 第五章 竹叶黄酮的抗氧化活性和抑菌研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 研究方法
• 2 结果与分析
• 2.1 脂质体系中竹叶黄酮抗氧化能力
• 2^-·的能力'>2.2 清除O₂^-·的能力
• 2.3 总抗氧化能力（FRAP法）
• 2.4 抑菌实验
• 3 结论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 致谢