本文主要研究内容
作者王晓雪,赵若晗,孙凯,宋洁（2019）在《GST-pull down技术检测R-Ras活化蛋白抑制MCF7细胞迁移》一文中研究指出：目的运用GST-pull down技术检测真核细胞中R-Ras活化蛋白的表达,用以分析R-Ras活化蛋白影响细胞迁移的体外实验。方法筛选稳定表达pcDNA3.1、pcDNA3.1R-Ras和pcDNA3.1R-Ras38V的MCF7细胞系;同时构建pGEX6p1的融合蛋白表达载体,并使其在大肠杆菌BL21中大量表达用于GST-pull down实验。进一步用Western Blot检测MCF7细胞中活化的R-Ras蛋白的表达;然后用基底膜侵袭实验进一步分析稳转后R-Ras活化蛋白对细胞迁移的影响。结果成功获得融合蛋白的表达,用GST-Pull down和Western Blot技术检测出MCF7细胞中过表达活化的R-Ras蛋白。Transwell实验显示pcDNA3.1R-Ras38V组穿膜细胞数减少,与pcDNA3.1组和pcDNA3.1R-Ras组比较差异有统计学意义(P=0.000 7、0.006 5)。结论过表达活化的R-Ras蛋白抑制细胞的迁移,GST-pull down技术可以检测R-Ras的蛋白活化形式,为进一步深入研究R-Ras在真核细胞中的体外功能实验提供了保障。
Abstract
mu de yun yong GST-pull downji shu jian ce zhen he xi bao zhong R-Rashuo hua dan bai de biao da ,yong yi fen xi R-Rashuo hua dan bai ying xiang xi bao qian yi de ti wai shi yan 。fang fa shai shua wen ding biao da pcDNA3.1、pcDNA3.1R-Rashe pcDNA3.1R-Ras38Vde MCF7xi bao ji ;tong shi gou jian pGEX6p1de rong ge dan bai biao da zai ti ,bing shi ji zai da chang gan jun BL21zhong da liang biao da yong yu GST-pull downshi yan 。jin yi bu yong Western Blotjian ce MCF7xi bao zhong huo hua de R-Rasdan bai de biao da ;ran hou yong ji de mo qin xi shi yan jin yi bu fen xi wen zhuai hou R-Rashuo hua dan bai dui xi bao qian yi de ying xiang 。jie guo cheng gong huo de rong ge dan bai de biao da ,yong GST-Pull downhe Western Blotji shu jian ce chu MCF7xi bao zhong guo biao da huo hua de R-Rasdan bai 。Transwellshi yan xian shi pcDNA3.1R-Ras38Vzu chuan mo xi bao shu jian shao ,yu pcDNA3.1zu he pcDNA3.1R-Raszu bi jiao cha yi you tong ji xue yi yi (P=0.000 7、0.006 5)。jie lun guo biao da huo hua de R-Rasdan bai yi zhi xi bao de qian yi ,GST-pull downji shu ke yi jian ce R-Rasde dan bai huo hua xing shi ,wei jin yi bu shen ru yan jiu R-Raszai zhen he xi bao zhong de ti wai gong neng shi yan di gong le bao zhang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自热带医学杂志的王晓雪,赵若晗,孙凯,宋洁，发表于刊物热带医学杂志2019年06期论文，是一篇关于活化蛋白论文,细胞迁移论文,热带医学杂志2019年06期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自热带医学杂志2019年06期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：活化蛋白论文; 细胞迁移论文; 热带医学杂志2019年06期论文;