Toll-like receptor9在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及其意义

论文摘要

背景:恶性肿瘤是当今世界上严重危害人类健康的重大疾病之一,宫颈癌（cervical carcinoma）是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤,在全球女性恶性肿瘤中占第二位,仅次于乳腺癌,在发展干中国家则居首位。每年全球约有新增病例近50万例,我国每年新发病例有13.8万,严重威胁女性生命健康。近年来,随着宫颈癌筛查技术的发展,有效提高了宫颈癌的检出率,很多早期宫颈癌患者获得手术治愈的机会,但是宫颈癌发病的年轻化趋势却困扰着大家,据估计大约40%的宫颈癌患者确诊时正值生育年龄[1]。虽然宫颈癌的治疗方法不断提高,但以手术为主的治疗方法对患者损伤大,使其生活质量大大降低。而对于进展期宫颈癌（FIGO,Ⅲ或Ⅳ期）患者手术切除率低,放化疗毒副作用大,疗效难以令人满意。因此,寻找新的治疗方法已成为目前宫颈癌治疗中的一个重要课题。肿瘤的发生发展与机体免疫系统密切相关,应用免疫学原理对肿瘤进行诊断、治疗和预防的研究已成为热点。Toll-like receptors（TLRs）是一组细胞膜上的模式识别受体（pattern recognition receptors,PRRs）,属于I型跨膜蛋白[2],是重要的免疫分子。过去曾一度认为TLRs仅在免疫细胞中表达,但目前大量的证据表明TLRs同样在非免疫细胞中表达。研究表明其可能参与多种恶性肿瘤的发生、发展过程。TLR9是该家族重要成员,是否与宫颈癌的发生、发展相关,目前尚不清楚。目的:通过免疫组化及western blot方法检测TLR9在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达情况并探讨其意义,力求为宫颈肿瘤的免疫治疗开拓新的思路。方法:1免疫组化SP法检测宫颈癌组织31例,宫颈上皮内瘤变（CIN）其中包括轻度不典型增生（CINⅠ）12例,中重度不典型增生（CINⅡ-Ⅲ）15例以及正常宫颈组织11例TLR9的表达情况。2蛋白印迹（western blot）技术检测新鲜宫颈癌组织15例,正常宫颈组织10例TLR9的蛋白表达情况。3所得数据应用SPSS13.0统计分析软件进行分析。结果:1免疫组化结果:镜下TLR9的阳性表达主要定位于肿瘤细胞胞质中,呈棕黄色颗粒状。使用Image-Pro Pls4.5图像分析软件处理显微镜图像,结果采用SPSS13.0统计软件进行统计处理,分析TLR9的表达在宫颈肿瘤不同临床特征各组间的差异性。其结果显示TLR9在正常宫颈组织中表达率为27%,且仅微弱表达;在几乎所有浸润性鳞癌中均有其阳性表达（29/31）,其中强阳性率为38%。TLR9的表达量随着宫颈病变加重而逐渐增加,即CINⅠ<CINⅡ-Ⅲ<浸润性鳞癌（ISCC）（P<0.05）,具有统计学意义;而在临床分期、细胞分化程度及是否有淋巴结转移各组间无显著差异。2蛋白印迹结果:在120KD位置可见TLR9蛋白条带,应用UVP凝胶成像系统照相,记录条带相对灰度值,结果显示宫颈癌组织中TLR9蛋白含量较正常宫颈组织显著升高（P<0.001）,具有统计学意义。结论:1 TLR9在正常宫颈组织中不表达或仅微弱表达。2 TLR9的表达量与宫颈病变程度呈正相关,即按轻度不典型增生（CINⅠ）→中重度不典型增生（CINⅡ-Ⅲ）→浸润性鳞癌（ISCC）逐渐增加,与临床分期、细胞分化程度及是否淋巴结转移无相关性。3 TLR9介导的免疫反应参与宫颈上皮内瘤变到宫颈癌演进的过程,可能成为宫颈癌免疫治疗的新靶点。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢