寒湿外邪对上呼吸道感染小鼠免疫功能影响的实验研究

论文摘要

目的：本论文以中医学“六淫致病”为理论依据,通过制备寒湿环境和上呼吸道感染小鼠模型进行实验研究,探讨非生物性致病因子——寒湿邪气与生物性致病因子（病毒）对机体免疫功能的影响。为寒湿外邪致上呼吸道感染致病机理的认识和寒湿致病的防治提供实验依据。方法：1分组：雌性昆明种小鼠96只,体重30±2g,随机分为8组,分别为：正常组、病毒感染组、病毒感染中药组、病毒感染西药组、寒湿组、寒湿+病毒感染组、寒湿+病毒感染中药组、寒湿+病毒感染西药组,每组12只。2造模及给药：（1）制备上呼吸道感染模型：小鼠正常饲养2天后,除正常组与寒湿组外,其余各组给予呼吸道合胞病毒（RSV）106PFU 0.1ml/只进行滴鼻（2）造模后中药组小鼠给予麻黄加术汤,西药组给予病毒唑进行灌胃治疗,连续7天。（3）利用人工气候箱建立寒湿环境模型,将寒湿组、寒湿病毒组、寒湿病毒中药组、寒湿病毒西药组小鼠置于寒湿环境模型中,每天持续刺激8h,连续7天。3检测：（1）观察正常及寒湿环境中小鼠一般情况的变化,记录小鼠精神状态、活动情况、毛色、皮肤关节、鼻部及二便等情况,并定时记录小鼠进食量、饮水量及体重。（2）使用呼吸道合胞病毒致小鼠上呼吸道感染后,置于寒湿环境连续7天后取材。具体有小鼠摘眼球取血、离心,取血清检测小鼠免疫指标（血清中IL-2、IFN-γ含量变化）；无菌取脾,MTT法检测脾淋巴细胞增殖能力结果：1与正常组小鼠相比,各模型组小鼠一般情况均有改变,在整个造模期间各模型组小鼠活动情况明显下降,出现精神萎靡,体重增长速度减慢或减轻,进食、饮水量减少,出现鼻部分泌物增多,大便稀,毛色无光泽,部分小鼠出现关节肿大,甚至破溃等。2各模型组血清中IL-2、IFN-γ的含量、脾淋巴细胞增殖能力明显低于正常组,经统计学处理,均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。其中各寒湿加病毒感染组的下降程度更为显著。血清中工L-2、IFN-γ的含量及脾淋巴细胞增殖能力实验显示,寒湿+病毒感染组与病毒组比较中以寒湿加病毒感染组影响明显。3中药组与西药组小鼠较病毒组、寒湿组、寒湿+病毒感染组精神状态有所改善,体重增长,关节正常,鼻部分泌物有所减少,大便成形；而血清中IL-2、IFN-γ的含量、脾淋巴细胞增殖能力高于病毒组、寒湿组及寒湿加病毒感染组,说明药物的干预能够影响疾病的发展。结论：通过探讨上呼吸道感染的发病机理,建立寒湿环境,研究正常及上呼吸道感染小鼠健康状况、免疫状态,通过药物干预的影响,得出以下结论：1与正常状态小鼠不同,寒湿环境和病毒感染小鼠的一般情况有不同程度的改变,一般状态差,显示寒湿外邪与病毒均会影响小鼠的活动情况、进食、饮水、体重等。2寒湿环境能够降低正常及上呼吸道感染小鼠血清中IL-2、IFN-γ的。含量,导致机体免疫力低下；并且上呼吸道感染小鼠血清中IL-2、IFN-γ下降程度更大,说明寒湿环境能够影响上呼吸道感染小鼠的免疫状态,正常环境与寒湿环境对相同小鼠的免疫状态有不同的影响。3寒湿环境能够使正常及上呼吸道感染小鼠脾淋巴细胞的增殖能力下降,从而降低了小鼠的免疫能力；寒湿环境下的上呼吸道感染小鼠脾淋巴细胞的增殖能力下降程度显著,即寒湿环境对上呼吸道感染小鼠的发生和发展具有直接影响作用,说明寒湿+病毒在上呼吸道感染发病中的致病毒性明显加强。4上呼吸道感染小鼠及寒湿环境下上呼吸道感染小鼠,在中药和西药的干预下,中药组与西药组精神状态等一般情况有所改善；小鼠血清中IL-2、IFN-γ的含量、脾淋巴细胞的增殖能力高于病毒组、寒湿组及寒湿病毒组,说明中西药物能够干预疾病的发展。由于观察指标的限制,在本实验中,中西药物在干预本病方面没有差异。

论文目录

• 缩略语表
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献研究
• 1 《内经》对外因致病的认识
• 1.1 六淫与发病
• 1.2 六淫中寒、湿邪气的致病特点
• 1.3 寒湿邪气相兼为病的致病机理
• 2 寒湿邪气现代研究进展
• 3 感冒与上呼吸道感染的相关性
• 4 寒湿邪气对上呼吸道感染发生及发展的影响
• 5 祖国医学对上呼吸道感染的认识及研究进展
• 5.1 古代医家对上呼吸道感染的论述
• 5.2 现代中医学者对上呼吸道感染的认识及研究进展
• 6 现代医学对上呼吸道感染的认识及研究进展
• 实验研究
• 一 技术路线
• 二 实验内容
• 实验一 寒湿环境对上呼吸道感染小鼠一般情况的影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验病毒
• 1.3 药物及试剂
• 1.4 主要实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 分组、造模
• 2.2 一般情况的观察
• 2.3 统计分析方法
• 3 实验结果
• 3.1 饮食变化
• 3.2 体重变化
• 3.3 关节、皮肤变化
• 3.4 鼻部分泌物情况
• 3.5 大便情况
• 3.6 精神状态、毛色及其它情况
• 4 讨论
• 实验二 寒湿环境对上呼吸道感染小鼠血清IL-2、IFN-γ含量影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物及试剂
• 1.3 主要实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 分组、造模
• 2.2 标本的采集
• 2.3 标本的检测
• 2.4 结果处理
• 2.5 统计分析方法
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 实验三 寒湿环境对上呼吸道感染小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物及试剂
• 1.3 主要实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 分组、造模
• 2.2 标本的采集
• 2.3 标本的检测
• 2.4 结果处理
• 2.5 统计分析方法
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 讨论
• 1 寒湿环境模型的建立
• 2 上呼吸道感染小鼠模型的建立
• 3 药物的干预作用
• 4 寒湿环境对小鼠一般情况和免疫状态的影响
• 4.1 寒湿环境对小鼠一般情况的影响
• 4.2 寒湿环境对小鼠血清IL-2、IFN-γ含量的影响
• 4.3 寒湿环境对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 个人简历