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枣的幼胚培养

2020-11-23阅读(171)

枣的幼胚培养

论文摘要

本实验以陇东马牙枣幼嫩果实为试材,选取3个不同生长发育期的枣幼果,针对不同时期胚生长发育特点,对其进行离体培养,筛选出适宜枣幼胚培养的培养基、培养条件以及体细胞胚胎的诱导,为克服枣胚败育问题,缩短育种周期提供技术依据。同时对四个品种枣胚的形成与发育过程进行了组织胚胎学研究,为枣的幼胚培养的取材时间,研究杂种胚的败育机理,寻找导致胚败育的原因及克服办法,提供理论参考和实验依据。主要研究结果如下:1、实验结果表明,胚龄是影响胚培养的关键因素。枣胚接种后,主要有三种生长途径:即胚性生长、形成愈伤组织、直接萌发成苗,且胚龄越小越易诱导愈伤组织。盛花后45d和55d的幼胚不易直接成苗,低温（2-4℃）处理30d有利于盛花后65d的枣胚直接萌发成苗。2、枣的幼胚培养,胚龄较小的胚（盛花后45d、55d）采用三步培养法。第一步先将去皮种子接种在胚萌动培养基上;第二步当胚萌发后从胚乳中或愈伤组织中剥离转至MS无激素的培养基上培养30d后转接至诱导愈伤组织培养基上诱导愈伤组织;第三步由愈伤组织诱导胚状体成苗或经诱芽、生根成苗。结果表明,幼胚萌动培养基宜选用MS-H+ZT0.5mg/L+IAA0.6mg/L+蔗糖50g/L+LH0.5g/L+琼脂4.0g/L+PVP0.2 g/L;诱导愈伤组织适宜的培养基为Nitsch的基本培养基上,附加BA 1.0 mg/L +2,4-D1.5 mg/L+蔗糖30g/L +琼脂4.0g/L。诱导胚状体培养基宜选用,MS+BA1.0 mg/L+ IBA0.2 mg/L +LH0.5mg/L+Vc0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L;愈伤组织转接在MS+ BA1.0mg/L+ IAA0.5mg/L+LH0.5mg/L+Vc0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L可再生出丛生芽。3、在2-4℃低温处理30d有利于盛花后65d的枣胚直接萌发成苗,较适宜的培养基为Nitsch+1.5mg/LZT+0.6mg/LIAA+LH0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L。4、生根培养基1/2MS+IBA1.0mg/L+Vc0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂4.0 g/L的生根效果较好。5、在胚培养过程中诱导出胚状体,并通过胚状体得到12株苗。

论文目录

  • 摘要
  • SUMMARY
  • 缩略词表
  • 文献综述
  • 1 枣树组织培养研究现状
  • 1.1 茎段和茎尖培养
  • 1.2 愈伤组织诱导和分化培养
  • 1.3 花药培养
  • 1.4 细胞培养
  • 1.5 原生质体培养
  • 1.6 枣胚乳培养
  • 1.7 枣胚胎培养研究进展
  • 1.7.1 胚培养技术的主要类型
  • 1.7.2 影响枣胚培养的因素
  • 2 本课题的引出及采用的技术路线
  • 2.1 研究课题的提出
  • 2.2 本实验所采用的技术路线如下
  • 第一部分 枣胚胎发育的组织细胞学研究
  • 1 材料和方法
  • 1.1 供试材料
  • 1.2 主要仪器及试剂、药品
  • 1.3 实验方法
  • 2 结果与分析
  • 2.1 小孢子发育
  • 2.2 胚珠的发育
  • 2.3 胚囊的发育
  • 2.4 胚乳的发育
  • 2.5 合子胚的发育
  • 3 结论与讨论
  • 3.1 果形指数与胚败育的相关关系
  • 3.2 枣树花粉育性与胚败育的相关关系
  • 3.3 枣的品种与胚败育的相关关系
  • 第二部分 枣的幼胚培养
  • 1 材料和方法
  • 1.1 供试材料
  • 1.2 材料的采集时间
  • 1.3 无菌外植体的建立
  • 1.4 实验方案
  • 1.4.1 枣幼胚培养的萌动培养基
  • 1.4.2 枣幼胚培养诱导愈伤组织培养基
  • 1.4.3 枣幼胚培养愈伤组织诱导胚状体培养基
  • 1.4.4 枣幼胚培养苗的茎段增殖生根培养基
  • 1.5 试验结果统计分析
  • 2 结果与分析
  • 2.1 影响胚培养的因素
  • 2.1.1 陇东马牙枣果实和种子的生长特征
  • 2.1.2 影响枣幼胚萌发的因素
  • 2.1.2.1 枣胚龄对枣幼胚萌发的影响
  • 2.1.2.2 基本培养基对盛花后55d 幼胚萌发的影响
  • 2.1.2.3 ZT、IAA 的不同浓度对盛花后55d 幼胚萌发的影响
  • 2.1.2.4 蔗糖浓度对盛花后55d 幼胚萌发的影响
  • 2.1.3 影响盛花后65d 的幼胚直接成苗的因素
  • 2.1.3.1 低温处理对盛花后65d 的幼胚培养直接成苗的作用
  • 2.1.3.2 基本培养基对盛花后65d幼胚在低温处理30d的条件下直接成苗的影响
  • 2.1.3.3 ZT、IAA 的不同浓度对盛花后65d 幼胚在低温处理30d 的条件下直接成苗的影响
  • 2.1.3.4 蔗糖浓度对盛花后65d幼胚在低温处理30d的条件下直接成苗的影响
  • 2.1.4 枣幼胚诱导愈伤组织
  • 2.1.5 胚培养中胚状体诱导率
  • 2.1.6 胚培养中愈伤组织不定芽的分化
  • 2.2 枣胚苗茎段增殖生根培养
  • 3 讨论
  • 3.1 影响幼胚培养效果的关键因素
  • 3.2 胚状体的诱导及特征
  • 3.3 下一步工作的建议
  • 4 结论
  • 参考文献
  • 图版 I
  • 图版 II 枣幼胚培养图片
  • 致谢
  • 个人简介
  • 导师简介

    • 相关论文文献

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