马拉硫磷降解菌的筛选及对马拉硫磷的降解

论文摘要

农药在环境中的残留及污染全世界普遍关注的问题，而我国是马拉硫磷生产和使用大国，使用范围广、使用数量多，加上本身水溶性相比较大的特点，现已对不同地区土壤与水造成了污染。基于对人类健康和环境的威胁，马拉硫磷在环境中的残留分析和降解研究，具有实际应用价值。围绕马拉硫磷降解问题，本实验主要研究以下内容。1.从模拟长期使用马拉硫磷农药的土壤中用摇瓶培养富集法和土壤直接富集法筛选并分离出能够降解马拉硫磷的菌株，共分离出菌株312株。2.由于分离出的312株菌株在选择培养基固体平板上（含有500mg·L-1马拉硫磷的无机盐培养基）没有明显的生理特征变化来显示马拉硫磷的降解，所以利用气相色谱逐个测定分离出的菌株活性。测定结果显示，有4株菌株对马拉硫磷有降解活性，菌株编号分别为B20、I2、I4、L19，采用20mg·L-1马拉硫磷作为唯一碳源时，在48h内的马拉硫磷降解率分别为8.9%、15.4%、27%和87.32%。3.经形态、生理生化分析，将B20、I2、I4和L19这4株高效降解菌株分别鉴定为气单胞菌属（Aeromonas）；埃希氏菌属（Escherichia）；微球菌属（Micrococcus）和短波单胞菌属（Brevundimonas sp.）。经16S rDNA序列分析，L19与基因登录号为AB021415（Brevundimonas diminuta）的同源性达98％,初步鉴定L19菌株是缺陷短波单胞菌（Brevundimonas diminuta）4.对L19菌株的降解特性进行了研究:在20mg·L-1、30℃、pH6.5条件下，L19菌株48h对马拉硫磷降解率达87.32%，马拉硫磷农药降解率与降解时间呈正相关。5.研究了L19菌株的最适生长条件，通过温度单因素试验，从15℃、20℃、25℃、30℃和35℃5个温度中确定L19菌的最适生长温度为25℃；通过pH单因素试验，从pH6.0、pH6.5、pH7.0、pH7.5和pH8.0等5个pH中确定L19菌的最适生长pH为7.0；

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 文献综述
• 1 引言
• 1.1 研究的目的及意义
• 1.2 主要研究内容
• 1.2.1 分离纯化以马拉硫磷为唯一碳源的菌株
• 1.2.2 检测所筛选菌株的降解效果
• 1.2.3 分析降解菌的生理生化特性
• 1.2.4 选择高效菌株 L19 进行进一步研究
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 培养基:
• 2.1.2 主要药品试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.1.4 引物
• 2.1.5 序列分析工具和软件
• 2.2 方法
• 2.2.1 降解菌的富集
• 2.2.2 降解菌的筛选分离及纯化
• 2.2.3 菌株对马拉硫磷的降解及测定
• 2.2.4 菌株的鉴定与系统发育分析
• 2.2.5 L19 菌株最适生长条件的确定
• 3 结果与分析
• 3.1 马拉硫磷降解菌株的分离与检测
• 3.2 不同菌株对 20 mg·L-1 马拉硫磷在 24h 中的降解效果
• 3.3 四株降解菌的生理生化特征
• 3.3.1 降解菌的培养特征
• 3.3.2 生理生化特征鉴定结果
• 3.3.3 降解菌的分类地位鉴定结果
• 3.4 L19 对 20 mg·L-1 马拉硫磷的生物降解效果
• 3.5 菌株 L19 的 16SrDNA 鉴定
• 3.6 菌株 L19 最适生长条件
• 3.6.1 L19 菌株最适生长温度
• 3.6.2 L19 菌株最适生长 pH 值
• 3.6.3 L19菌株生长曲线
• 4 讨论
• 5 结论
• 5.1 马拉硫磷降解菌株的分离与检测
• 5.2 不同菌株对 20 mg·L-1 马拉硫磷在 24h 中的降解效果
• 5.3 不同菌株对 20 mg·L-1 马拉硫磷在 24h 中的降解效果
• 5.4 四株降解菌的生理生化鉴定
• 5.5 菌株 L19 的 16SrDNA 鉴定
• 5.6 菌株 L19 最适生长条件
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介