SIRT1在肥胖、胰岛素抵抗发生机制中的作用

论文摘要

第一部分：SIRT1单核苷酸变异与中国人群超重的相关性研究目的：肥胖是遗传与环境因素相互作用所导致的疾病。随着分子遗传学的快速发展,使得在基因水平上筛选肥胖的易感基因成为可能。SNP是重要的遗传标记,其相关研究有助于理解遗传因素对肥胖症发病的影响。SIRT1是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）依赖性去乙酰化酶,已有基于白种人的研究证明SIRT1某些的SNP位点变异与能量消耗减少及肥胖相关。因此,我们拟研究SIRT1中国人群常见基因型变异型与超重是否有关。方法：依据连锁不平衡原理,从HapMap数据库SIRT1及其邻近区域常见SNP位点（最小基因型频率≥0.05%）中,按照覆盖绝大多数SIRT1基因的变异性的原则,我们选出四种单倍型标签SNP。然后通过PCR扩增和连接酶检测反应,检测了820名中国人的SIRT1基因型并分析其与超重肥胖的关系。结果：基因型rs10509291AA和rs10823116 GG的频率在超重人群中明显增高,而基因型rs7894483TT的频率明显减低。rs10509291AT携带者超重风险较高,其基因型A符合显性基因模型。两种单倍型的携带者ATAA （rs7894483/rs10823116）和ATAG与AAAG （P<0.01）相比,表现出明显的高超重风险（OR:17.11和5.12）。TTATAA或TTATGG [rs10509291 /rs7894483 /rs10823116]的携带者分别比TTATAA或TTATGG [rs10509291 /rs7894483 /rs10823116]携带者超重风险低,该结果与rs10509291TT基因型携带者超重风险降低一致。结论：本研究结果表明基因型rs10509291,rs7894483,和rs10823116 SNP相互作用,并且与中国人群超重明显相关。第二部分：SIRT1在追赶生长大鼠腹性肥胖和胰岛素抵抗形成中的作用目的：低营养水平者之营养提升过快,即可在一过性的生长抑制后出现快速生长的现象,称之为追赶生长。追赶生长会引起大鼠内脏脂肪沉积,腹型肥胖并导致全身胰岛素抵抗。SIRT1是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）依赖性去乙酰化酶,它在胰岛素敏感性调控中有重要作用。我们拟观察追赶生长对SIRT1表达水平及其活性的影响,并用白藜芦醇来干预追赶生长大鼠模型,提高SIRT1的活性,从而减少线粒体功能损伤的负面效应。从而了解SIRT1在追赶生长胰岛素抵抗形成中的作用。方法：采用热卡限制4周后予正常饮食8周构建营养快速提升所致成年期追赶生长大鼠模型。我们将8周龄的大鼠分为三组：正常对照组（NC）,追赶生长组（CUG）和追赶生长白藜芦醇干预组（CUGE）。在喂养4周和8周以后分别检测每组大鼠的脂肪分布,骨骼肌和全身胰岛素抵抗情况。同时评价骨骼肌线粒体数量和功能、氧化应激水平及抗氧化酶活性。结果：追赶生长可引起SIRT1活性的下降,腹部脂肪量增加,并导致系统及骨骼肌胰岛素抵抗形成,表现为60-120分钟的葡萄糖平均输注速率（30%,P<0.05）和骨骼肌葡萄糖摄取率（42%,P<0.05）明显下降；线粒体柠檬酸合酶活性下降；肌膜下和肌纤维间的线粒体复合体Ⅰ-Ⅳ活性下降20-40%（P<0.05）,并且肌膜下的下降得更为明显。在肌膜下和肌纤维间的线粒体中,活性氧和丙二醛的水平在是明显升高的,而抗氧化酶活性是降低的。然而,口服SIRT1激动剂白藜芦醇能增加SIRT1活性、减少腹部脂肪,增加骨骼肌线粒体数量和改善胰岛素敏感性（43%,P<0.05）。白藜芦醇还能降低脂质过氧化反应和活性氧,恢复抗氧化酶的活性。结论：本次实验表明了追赶生长可导致SIRT1表达及活性的降低,SIRT1激动剂白藜芦醇能增加SIRT1的表达及活性,通过增加骨骼肌线粒体复合体活性和加强抗氧化防御体系,来改善追赶生长大鼠的胰岛素敏感性。因此,SIRT1在大鼠腹部脂肪沉积、腹型肥胖胰岛素抵抗的形成中有重要的作用。

论文目录

• 前言
• 参考文献
• 摘要
• Abstract
• 第一部分 SIRT1单核苷酸变异与中国人群超重的相关性研究
• 主要英文缩略词表及中英文对照
• 引言
• 实验对象和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 展望
• 参考文献
• 第二部分 SIRT1在追赶生长大鼠腹型肥胖和胰岛素抵抗形成中的作用
• 主要英文缩略词表及中英文对照
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 展望
• 参考文献
• 综述 SIRT1与肥胖和胰岛素抵抗关系的研究进展
• 参考文献
• 附录: 在读期间已发表或待发表的论文
• 致谢