论文摘要
犬草酸钙结石在临床上发病率日益升高,已经成为发病率最高的结石之一。同时,草酸钙结石与其它类型的结石不同,如若形成,很难移除,因此,如何预防草酸钙结石的形成具有重要意义。导致草酸钙结石发病主要有两个原因,原因之一是动物从饮食中摄入过量的草酸,引起了高草酸尿症,进而导致了草酸钙结石的发生；而另一重要原因是肾上皮细胞的氧化损伤,其会促进晶体聚集粘附于上皮细胞。因而,通过降低动物从食物中摄入的草酸量,达到防止高草酸尿症的形成；通过提高机体的抗氧化能力,可减少肾上皮细胞的损伤,两者结合,进而达到预防草酸钙结石形成的目的。近年来研究发现,部分乳酸菌具有降解草酸的能力,且从乳酸菌中分离到草酸降解酶基因。本实验室已经从犬粪便中分离出具有草酸分解能力的乳酸菌,并已申请专利。硒是人和动物所必需的微量元素,具有抗自由基、抗癌、提高机体免疫力、拮抗有毒元素、延缓衰老、防治某些地方性流行病等多种功能。利用硒可提高机体的抗氧化能力,防止肾上皮细胞的损伤。本试验在乳酸菌发酵的过程中添加硒,制备了具有草酸分解能力的乳酸菌,该菌这一能力与其它富硒乳酸菌不同。随后,将制得的富硒乳酸菌饲喂食源性草酸过多的犬,研究富硒乳酸菌对犬草酸钙结石形成的预防作用。目前,运用富硒乳酸菌来预防草酸钙结石形成的相关报道较少。1.富硒乳酸菌培养条件的优化利用本实验室分离的具有草酸分解能力的乳酸菌作为菌种,在培养基中添加一定量的Se4+,发酵生产富硒乳酸菌,并对富硒乳酸菌培养条件进行优化。经过筛选,得出富硒乳酸菌的培养条件为：5μg·ml-1的Se4+浓度,5%的接种量,40℃,pH为6.4,培养时间36h。在优化的培养条件下,扩大培养,培养结束后,得到富硒乳酸菌,乳酸菌中的硒含量为3.91μg·ml-1,硒转化率约为76.23%,乳酸菌数约为10.58 1gCFU-mL-12.富硒乳酸菌对食源性草酸过多犬草酸钙结石的预防作用研究富硒乳酸菌对食源性草酸过多犬尿石症的预防作用。本地犬20只,分为5组,分别为空白组、0.5%草酸阳性组、0.5%草酸+有机硒组、0.5%草酸+乳酸菌组和0.5%草酸+富硒乳酸菌组。试验第15d和30d时,采集动物血样和尿样测定相关生化指标和血硒含量。在试验第15d和第30d三个试验组均能显著防止尿液pH的降低（P<0.05）,其中富硒乳酸菌的效果最好,与空白组差异不显著（P>0.05）。在试验第15d和第30d,富硒乳酸菌能显著防止尿液草酸的升高（P<0.05）。三个试验组均有防止尿液肌酐和尿素氮降低以及血液肌酐和尿素氮升高的作用,但差异不显著（P>0.05）。在试验第30d,富硒乳酸菌能显著防止血钙降低（P<0.05）。在试验第15d和30d,富硒乳酸菌可显著防止尿钙升高（P<0.05）。在试验第15d和第30d,富硒乳酸菌组和有机硒组全血硒含量升高显著（P<0.05）。试验第30d,测定血和肾组织抗氧化指标。有机硒组和富硒乳酸菌组血清和肾组织SOD、GSH-PX和CAT值显著高于草酸组（P<0.05）,有机硒组和富硒乳酸菌组的血清MDA和肾组织MDA显著低于草酸组（P<0.05）。所得结论为,富硒乳酸菌可显著增强草酸的分解,同时提高机体的抗氧化能力,达到预防草酸钙结石形成的效果。