葡萄籽提取物对肝损伤保护作用的实验研究

论文摘要

目的:1)研究喷雾干燥方法对葡萄籽提取物（grape seed extracts,GSE）抗氧化活性的影响;2)研究GSE对CCl4所致小鼠急性化学性肝损伤和卡介苗（BCG）联合脂多糖（LPS）诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:1)筛选新疆某葡萄酒厂酒渣中的葡萄籽,用石油醚完全脱脂,乙醇回流提取,提取液减压浓缩后,浓缩液分别采用喷雾干燥和自然干燥两种方法干燥得浸膏粉。通过比较两种干燥方法所得浸膏粉的抗氧化活性—包括还原能力,清除DPPH自由基和羟自由基能力,研究不同干燥方法对葡萄籽提取物抗氧化活性的影响;2)CCl4所致急性化学性肝损伤动物模型的复制及剂量分组:取雄性昆明种小鼠60只,随机分成6组,每组10只,即正常对照组、模型组、GSE低剂量组、GSE中剂量组、GSE高剂量组、联苯双酯组。每日上午,除正常对照组灌胃给予植物油0.2mL/10g以外,其余各组灌胃给予2%CCl4油溶液0.2mL/10g。下午各实验组组按（50、250、500mg/kg）的剂量灌胃给予喷雾干燥法所干燥的葡萄籽提取物,空白对照组和模型组均灌胃给予等量生理盐水,连续10d;BCG联合LPS诱导免疫性肝损伤动物模型的复制及剂量分组:取雄性昆明种小鼠72只,随机分成6组,每组12只,即正常对照组、模型组、GSE低剂量组、GSE中剂量组、GSE高剂量组、联苯双酯组。实验正式开始第一天,除正常对照组尾静脉注射生理盐水0.2ml外,其余小鼠均经尾静脉注射BCG 0.2ml（含5×107个活菌）的生理盐水悬液。次日起各实验组按（50、250、500mg/kg）的剂量灌胃给予喷雾干燥法所干燥的葡萄籽提取物。连续12d,术次灌胃1h后,各干预组小鼠均经尾静脉注射LPS生理盐水溶液7.5μg/只,正常对照组尾静脉注射等容量的生理盐水。3)指标测定:CCl4所致急性化学性肝损伤动物和BCG联合LPS诱导免疫性肝损伤动物分别在末次给药后10h、12h摘眼球取血,测定血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量,摘取肝脏、脾脏,称重,分别计算肝脏、脾脏系数;测定肝组织超氧化物歧化酶（SOD）含量、丙二醛（MDA）的含量,并观察肝脏病理组织学变化。结果:1)喷雾干燥所得葡萄籽提取物的抗氧化活性影响较自然干燥所得产物强;2)GSE各剂量组均能使CCl4所致小鼠急性化学性肝损伤小鼠肝组织MDA含量降低（P＜0.01）;使肝组织SOD活性升高（P＜0.01）;能明显降低小鼠血清ALT、AST的活性（P＜0.01）;并能不同程度地改善肝脏组织病理性损伤。GSE各剂量组均可降低BCG联合LPS诱导免疫性肝损伤动物的肝脏系数和脾脏系数（P＜0.01）;并降低肝组织MDA含量（P＜0.01）;升高肝组织SOD活性（P＜0.01）;GSE中、高剂量组可明显降低小鼠血清ALT、AST的活性（P＜0.05）:并能不同程度地改善肝脏组织病理性损伤。结论:1)喷雾干燥法对GSE抗氧化活性影响很小,适用于工业生产;2)GSE对CCl4所致急性化学性肝损伤和BCG联合LPS诱导的免疫性肝损伤均有一定的保护作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 实验材料和方法
• 1.实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验药品与试剂
• 1.3 仪器
• 2.实验方法
• 2.1 两种干燥方法对葡萄籽提取物抗氧化活性的影响
• 4所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用'>2.2 GSE对CCl₄所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用
• 2.3 GSE对小鼠BCG联合LPS诱导的免疫性肝损伤的保护作用
• 2.4 指标观察
• 2.5 数据处理
• 结果
• 1. 喷雾干燥法对葡萄籽提取物抗氧化活性的影响
• 2 GSE对CCl4所致急性化学性肝损伤小鼠的保护作用
• 3.GSE对免疫性肝损伤小鼠的保护作用
• 讨论
• 1.喷雾干燥法对葡萄籽提取物抗氧化活性的影响
• 2.GSE对CCl4所致急性化学性肝损伤的保护作用
• 3.GSE对BCG联合LPS诱导的免疫性肝损伤的保护作用
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表