论文摘要
恶性肿瘤是严重危害人们健康的疾病,其无限增殖,局部浸润和远处转移的特性是导致患者死亡的主要原因。其中蛋白水解酶活性的增加及其对细胞外基质的降解是肿瘤转移的关键。基质金属蛋白酶家族是ECM的主要水解酶,通过其对ECM的降解,促进肿瘤的恶性演变。MMP-26是MMP家族中最新被发现的成员,特殊的“半胱氨酸开关”区域是MMP-26独有的特征,是与其MMPs家族成员相区别的关键所在。MMP-26能直接,或通过激活MMP-9酶原而间接降解Ⅳ型胶原,在肿瘤转移中起促进作用。在正常人体组织中,MMP-26表达非常有限,但广泛表达于上皮来源的恶性肿瘤,包括乳腺癌,子宫内膜癌,食管癌,和前列腺癌等。迄今,在MM P-26的5′侧翼调控区已鉴定出PA,ERE,Tcf-4,AP-1等顺式作用元件。在MMP家族中,ERE是MMP-26所以独有的,提示MMP-26在E2依赖性肿瘤如乳腺癌、子宫内膜癌等中起有重要功能。Li W等研究证明E2能上调子宫内膜癌ER阳性Ishikawa细胞MMP-26的表达,并呈E2依赖。MMP-26在月经周期子宫内膜中呈动态表达也证明E2对MMP-26的表达具有重要调控作用。但是E2对乳腺癌MMP-26表达调控的研究不详,本文利用乳腺癌细胞MCF-7作为研究对象,系统研究了E2对MMP-26表达的调控的影响,及在E2作用下MMP-26与ERα两者表达之间的关系,并探讨其机制。目的:研究E2对MMP-26表达的影响,及在激素作用下MMP-26与ERα两者表达之间的关系。方法:分别用RT-PCR,免疫细胞化学,Western Blotting检测E2上调MMP-26表达的影响;采用Western Blotting检测在不同浓度及时间E2作用下,细胞MCF-7中MMP-26与ERα两者表达之间的关系结果:RT-PCR显示MMP-26能够上调MMP-26的表达,各浓度和时间组的MMP-26 mRNA表达量均上调, MMP-26 mRNA表达量与17β-E2的具有正向时效及量效关系:在时间调控中, MMP-26 mRNA在17β-E2作用24h的表达量最高,在浓度调控中, MMP-26 mRNA在10- 7mol/l 17β-E2刺激浓度时表达最高。细胞免疫荧光染色显示:同阴性DMSO对照组相比,各浓度和时间组的MMP-26蛋白平均荧光强度随着17β-E2刺激时间和浓度增高而增强, MMP-26蛋白分布于MCF-7细胞胞浆中。Western Blotting结果显示:同DMSO溶剂组相比,各浓度和时间组的MMP-26蛋白表达量均上调, MMP-26蛋白表达量与17β-E2的具有正向时效及量效关系, MMP-26与ERα两者表达呈正相关。结论:雌激素17β-E2能够上调人乳腺癌MCF-7细胞中MMP-26的表达,具有时间及剂量依赖性;雌激素受体ERα参与了雌激素17β-E2对人乳腺癌MCF-7细胞中MMP-26表达的上调。