论文摘要
目的:细胞因子是一类由单核巨噬细胞、淋巴细胞等分泌的具有调节细胞功能的多肽物质。有些细胞因子能够调节淋巴细胞的免疫应答反应,不仅加重肝细胞炎症、坏死,而且可激活间质细胞,促进胶原与非胶原细胞外基质（LN, HA等）的合成、分泌与沉积,导致肝脏纤维化的形成,进一步形成肝硬化。因此细胞因子在乙型病毒性肝炎的发生发展过程中起着十分重要的作用。本研究以急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎轻、中、重度、肝硬化患者以及正常对照人群为研究对象,观察乙型病毒性肝炎各临床发展阶段IFN-γ、IL-10、TGF-β1在血清中的表达水平,以此来探讨IFN-γ、IL-10、TGF-β1在乙型病毒性肝炎发展过程中与急性肝炎转为慢性以及肝纤维化发生发展的关系,为临床上应用细胞因子治疗慢性HBV感染以及抗肝纤维化提供理论依据和新的治疗方法。方法:选择70例于2005年11月至2006年5月在河北医科大学附属第三医院中西医肝病科和石家庄市第五医院住院的乙型病毒性肝炎患者。其中男性47例,女性23例,年龄22～78岁（45.53±10.67岁）;急性乙型肝炎（AHB）6例,慢性乙型肝炎轻度（CHBⅠ）15例,慢性乙型肝炎中度（CHBⅡ）17例,慢性乙型肝炎重度（CHBⅢ）14例,肝硬化（LC）18例。另外选择18例健康体检者为正常对照组（Normal Control）,男性12例,女性6例,年龄34～63岁（44.17±8.38岁）。两组间性别、年龄无差异。上述所有受检对象清晨空腹抽肘静脉血4ml,分离血清。用放射免疫法检测肝纤四项指标;用全自动生化分析仪检测肝功能,用美国ACL全自动血凝功能检测仪检测凝血酶原活动度（PTA）;用PCR法进行HBV-DNA定量检测;用双抗体夹心ABC-ELISA法检测血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1。数据采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果:（1）各组研究对象血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平比较: IFN-γ血清水平除正常组与肝硬化组以及慢性乙肝轻度组和中度组之间无显著性差异外,其余各组之间两两比较均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）;IL-10血清水平除慢性乙肝轻度组与中度组以及重度组与肝硬化组之间无显著性差异外,其余各组之间两两比较均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）;TGF-β1血清水平除慢性乙肝中度组与重度组之间无显著性差异外,其余各组之间两两比较均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。随着慢性乙型肝炎病情的逐渐加重,IFN-γ血清水平与病情程度呈显著负相关（r=-0.759,P<0.01）,而IL-10和TGF-β1血清水平与病情程度呈显著正相关（r=0.516, r=0.785,P<0.01）。（2）正常组、急性乙肝组与慢性乙肝组患者血清Th1/Th2类细胞因子比较:急性乙肝组Th1/Th2比值要显著高于正常组和慢性乙肝组（P<0.01）;慢性乙肝组Th1/Th2比值要显著低于正常组（P<0.05）。（3）各组研究对象血清肝纤四项水平、肝功能水平比较:肝纤四项水平除正常组与急性乙肝组以及急性乙肝组与轻度组PCⅢ水平、急性乙肝组与重度组CⅣ水平、正常组与轻度组以及急性乙肝组与重度组LN水平之间无显著性差异外,其余各组之间两两比较均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）;肝功能水平除中度组与重度组ALT水平、急性乙肝组与中度组TBIL水平、正常组与急性乙肝组ALB水平、正常组与急性乙肝组及轻度组三者之间PTA水平无显著性差异外,其余各组之间两两比较均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。（4）慢性乙肝组与肝硬化组IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平与肝纤四项、肝功能的关系:IFN-γ血清水平与TBIL、PCⅢ、CⅣ、HA和LN呈显著负相关（r=-0.704,r=-0.648,r=-0.744,r=-0.822,r=-0.592,P<0.01）,而与ALB和PTA呈显著正相关,相关系数分别为（r=0.547,r=0.693,P<0.01）;IL-10血清水平与TBIL、HA呈显著正相关（r=0.366,r=0.374, P<0.01）,而与ALB和PTA呈显著负相关（r=-0.655,r=-0.564, P<0.01）;TGF-β1血清水平与TBIL、PCⅢ、CⅣ、HA和LN呈显著正相关（ r=0.701,r=0.649,r=0.552,r=0.642,r=0.521, P<0.01）,而与ALB和PTA呈显著负相关（r=-0.577,r=-0.607, P<0.01）。（5）慢性乙肝组与肝硬化组HBV-DNA与IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平以及肝纤四项的关系:IL-10、TGF-β1水平HBV-DNA阳性组显著高于阴性组（P<0.01）,且随HBV-DNA含量增高,IL-10、TGF-β1水平也逐渐增高;而IFN-γ则与之相反。肝纤四项血清水平HBV-DNA阳性组显著高于阴性组（P<0.05或P<0.01）。（6）IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平三者之间的关系:IFN-γ与IL-10和TGF-β1均呈显著负相关（r=-0.412,r=-0.628, P<0.01）;IL-10与TGF-β1呈显著正相关（0.370,P<0.01）。结论:乙型病毒性肝炎患者血清中IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平与肝脏损害、肝功能水平有相关性,可反映肝细胞损伤程度,同时与肝纤维化的形成密切相关。三者含量的变化与HBV复制活跃程度、持续感染亦有关。因此,测定乙肝病毒及某些细胞因子水平,在监测乙型病毒性肝炎疾病的发生发展、肝纤维化进展程度以及评价治疗疗效及预后具有重要的实用价值。