导读:本文包含了木聚糖酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:链霉菌,木聚糖酶,基因克隆,生物信息学分析
木聚糖酶基因论文文献综述
熊科,熊苏玥,柳佳芸,高思宇,邓蕾[1](2019)在《链霉菌L10608来源木聚糖酶xyn-GH10/11基因的克隆与生物信息分析》一文中研究指出基于菌株L10608所产天然酶水解木聚糖底物时具有良好的水解木聚糖底物特性,通过设计简并引物,经巢式PCR克隆得到L10608菌株木聚糖酶基因全长(xyn-GH10与xyn-GH11),并对其进行生物信息学分析。由分析可知酶xyn-GH10全长1 469 bp,分子质量:50.677 ku;理论等电点pI:7.98;预测该木聚糖酶的信号肽为MGIQALPRAAVRQKLRTPLPALAAGVLGLTAALVPPTNADA;该木聚糖酶蛋白序列具有明显的第10族糖苷水解酶的八迭桶型保守区域,且能编码一段由108个氨基酸组成的RicinB-lectin非催化结构域。木聚糖酶xynGH11全长729 bp;分子质量:24.003 ku;理论等电点p I:8.98;预测该木聚糖酶的信号肽为MHQDGSQQDRT QNPAPFGGLSRRGFLVGGTGAAALAAGSGLLLPGTAHAA。该木聚糖酶蛋白序列具有明显的第11族糖苷水解酶的"右手半握状"保守区域。xyn-GH10与xyn-GH11基因经原核表达后其中木聚糖酶xyn-GH10酶活为160 U/mL,木聚糖酶xyn-GH11酶活为55 U/mL。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年10期)
熊科,崔晓亭,王小艺,赵峙尧,柳佳芸[2](2019)在《基于宏基因策略的新颖木聚糖酶基因cbxynA克隆及其重组酶酶学性质》一文中研究指出研究构建了库容量约为1.3×104个克隆子且外源片段的总长为30 Mb的土壤宏基因组文库。基于功能策略,从文库中筛选到分解木聚糖底物的阳性克隆子。该克隆经序列分析发现一个822 bp的潜在的编码木聚糖酶基因(cbxynA)的开放阅读框,其编码的氨基酸序列与来自古细菌属编码的木聚糖酶的相似度最高仅为45%,说明该序列为一条未知的新序列。cbxynA在大肠杆菌中的重组表达产物的分子质量为29 ku,与预测结果一致。对其原核表达条件进行优化,结果表明:质粒在培养5 h后加入0.7 mmol/L IPTG,23℃下诱导25 h后表达,木聚糖酶活力为52 U/mL,较初始值提高4.3倍。而重组酶(CBXYNA)最适pH和最适温度分别为5.2和55℃。金属离子Na+、K+、Li+、Ca2+能提高该酶的酶活,而另外一些金属离子如Mg2+、Mn2+、Zn2+、Fe3+、Al3+、Cu2+能抑制其活性。该酶以水溶性玉米芯木聚糖、燕麦木聚糖、水不溶性木聚糖为底物时,其相对酶活力分别为162%,139%,74%。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年09期)
任雅馨,罗蒙,林娟,王国增[3](2019)在《基于高通量扩增子测序的环境中木聚糖酶基因多样性分析》一文中研究指出传统的功能基因多样性研究主要采用PCR扩增片段构建文库及Sanger测序进行的,具有工作量大,耗时长,费用高和覆盖率低的不足。本研究采用基于Illumina HiSeq2500高通量测序平台对大布苏盐碱湖底泥宏基因组中的第10家族木聚糖酶基因多样性进行了研究。对扩增子测序后共获得227,420个读长,总长度约为49.5 Mbp。基于95%的一致性分析共获得467个可操作聚类单元(OTUs),其中有392个注释为木聚糖酶,比采用构建文库的方法获得的OTU数目要多300多个。这些OTU与GenBank数据库中的一致木聚糖酶蛋白序列的一致性范围为35-99%,其中75%与已知木聚糖酶序列的一致性在80%一下。这些OTU分布于12个不同的门,其中占优势的有Bacteroidetes,Proteobacteria, Actinobacteria,Firmicutes, Verrucomicrobia和Basidiomycota。此外,我们发现条形码序列对于木聚糖酶基因的丰度有很大的影响,但是对于基因多样性的影响较小。与前期采用构建片段文库及Sanger测序的方法研究木聚糖酶基因多样性相比,基于高通量扩增子测序对木聚糖酶基因多样性研究具有覆盖度高、成本低、快速的优点,可为后续的环境中微生物木聚糖酶基因分布、变化规律及生态功能的深入研究奠定基础。(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08)
廖续中,熊亚茹,王九祥,赵帅,冯家勋[4](2019)在《草酸青霉纤维素酶基因和木聚糖酶基因的调控基因POX05145的鉴定》一文中研究指出草酸青霉能产生完整的纤维素酶和木聚糖酶酶系,其纤维素酶基因的表达主要受转录因子的调控。前期工作中,通过对草酸青霉菌株HP7-1在不同碳源培养基培养条件下转录组的比较分析,获得了调控纤维素酶和木聚糖酶产量的候选调控基因集。本研究以草酸青霉ΔPoxKu70为出发菌株,通过同源重组法,构建并获得了其中一个候选调控基因POX05145的缺失突变株ΔPOX05145。在微结晶纤维素Avicel诱导培养条件下,与出发菌株ΔPoxKu70相比,ΔPOX05145的纤维素酶产量和木聚糖酶产量发生了显着改变。其中,在诱导第2天时,ΔPOX05145对硝基苯-β-D-纤维二糖苷酶产量和木聚糖酶产量分别上升43.4%和164.7%,对硝基苯-β-D-半乳糖吡喃葡萄糖苷酶产量下降92.8%,但是,滤纸酶产量和羧甲基纤维素酶产量没有显着变化。然而,在诱导第4天时,所有纤维素酶产量和木聚糖酶产量上升100.4%~294.0%。实时荧光定量PCR检测表明POX05145在不同的时间不同程度的调控主要的纤维素酶基因和木聚糖酶基因的表达。序列分析表明POX05145含有一个GAL4类锌指结构的DNA结合功能域和一个保守的真菌特有的转录因子结构域(Fungal_TF_MHR)。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年05期)
孟璐璐,于春蕾,练森,李保华,梁文星[5](2019)在《苹果树腐烂病菌木聚糖酶VmXyl1基因的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出木聚糖酶(xylanase)基因VmXyl1在苹果树腐烂病菌—黑腐皮壳菌(Valsa mali)致病过程中发挥重要作用。为了揭示VmXyl1在腐烂病菌与寄主互作过程中的作用机制,本研究构建了原核表达载体pET-32a-VmXyl1,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)进行诱导,在大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌株Rosetta (DE3)中成功表达了VmXyl1融合蛋白;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测融合蛋白的可溶性和纯化效果,免疫新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体,并对其效价和特异性进行分析。结果显示,该蛋白主要以包涵体形式存在,且0.5 mmol/L IPTG、30℃诱导8 h融合蛋白高效表达;经NiNTA柱亲和层析纯化后,获得了预期大小的融合蛋白。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和Western blot分析表明,所制备抗体效价达1∶102 400,且抗体能特异性识别VmXyl1融合蛋白及发病苹果(Malus pumila)树皮组织中的木聚糖酶蛋白,说明所制备的抗体具有高效性和特异性。研究结果为深入探究腐烂病菌木聚糖酶的致病机理及其与寄主的互作机制提供了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年02期)
[6](2019)在《澳新拟批准来自里氏木霉转基因菌株的木聚糖酶作为加工助剂》一文中研究指出据澳新食品标准局(FSANZ)消息,2019年1月3日,澳新食品标准局发布70-19号通告,拟批准使用来自里氏木霉转基因菌株的木聚糖酶作为烘焙产品生产中的加工助剂。来自里氏木霉转基因菌株的木聚糖酶主要用于面包、蛋糕、甜点、玉米饼和其他烘焙产品的烘焙过程中,(本文来源于《食品与机械》期刊2019年01期)
[7](2019)在《欧盟评估来自一种转基因枯草芽孢杆菌的1,4-β-内切木聚糖酶的安全性》一文中研究指出2019年1月21日,欧盟食品安全局发布关于来自转基因枯草芽孢杆菌(XAS菌株)的食品酶1,4-β-内切木聚糖酶(endo-1,4-β-xylanase)安全性的评估结果。这种食物酶拟用于烘焙过程。根据烘焙过程中推荐的最大使用量和欧盟食品安全局综合欧洲食品消费数据库中的个人消费数据,估计欧洲人口每天膳食暴露于食物酶—总有机固体(TOS)的量为0.014 mgTOS/k·体(本文来源于《食品与机械》期刊2019年01期)
邓巧平[8](2018)在《嗜热木聚糖酶基因Umxyn10A在大肠杆菌中的重组表达及其热稳定性的改造》一文中研究指出木聚糖是一种非均相聚合物,是半纤维素的主要成分之一。在过去的几十年里,作为生物质降解酶系中主要成员的木聚糖酶成为研究的热点,其在纺织品、食品、饲料、造纸以及医药等多个工业领域中都得到了广泛的应用。木聚糖酶主要作用于木聚糖的β-1,4-糖苷键,水解产生不同分子量的低聚木糖和木糖。目前,国内外已报道的克隆表达的木聚糖酶基因中大多数在高温下的热稳定性都比较差,不能满足工业生产需求,这也使木聚糖酶的应用受到了极大的限制。因此,对木聚糖酶的热稳定性的研究具有十分重要的意义。木聚糖酶Umxyn10A(Gen Bank序列号ABL73-883.1)是由本实验室前期从堆肥未培养微生物中筛选得到,属于GH 10家族。将木聚糖酶基因Umxyn10A去掉跨膜结构域的编码序列并进行密码子优化后,将其在大肠杆菌中进行表达,结果发现,木聚糖酶Umxyn10A最适反应温度为80℃,但热稳定性较差,当温度超过60℃时酶活力大幅度下降,其在65℃下的半衰期为15 min,在75℃下保温4 min就几乎失活。木聚糖酶 Umxyn 10A的最适pH为6.0,在pH 4.5~10.0范围能保持80%以上的酶活。该酶除了对木聚糖有较强的水解能力外,对其它底物羧甲基纤维素钠(CMC)、微晶纤维素(Avicel)、淀粉(Starch)、几丁质(Chitin)、地衣多糖(Lichenan)、2-羟乙基纤维素(2-Hydroxyethyl cellulose)和甲基纤维素(Methylcellulose)均没有酶活力。CuCl2、AL2(SO4)3、AgNO3和十二烷基硫酸钠(SDS)对木聚糖酶Umxyn1OA的酶活力都有很强的抑制作用,其它金属离子对其酶活力影响不大。木聚糖酶Umxyn1OA对木寡糖的水解产物主要以木二糖为主,其具有潜在的商业应用价值。以不同浓度的木聚糖为底物,测得其Km和Vmax值分别为3.14 mg/mL和为370.37μmol/(min·mg)。结果表明,重组酶Umxyn1OA具有优良的酶学特性,但热稳定性较差,因此利用定点突变技术对该酶进行突变,以期提高其热稳定性。将木聚糖酶Umxyn1OA与已报道的GH10家族的4种耐热木聚糖酶的氨基酸序列进行多重序列对比以及叁维结构的同源建模分析,选定10个氨基酸位点进行定点突变。分别构建该酶的10个突变基因的重组表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达以及蛋白纯化。测定突变后的10个重组酶的酶学性质,最终得到两个热稳定性显着提高的突变酶Umxyn10AA31F和Umxyn1OAL307V。突变酶Umxyn10AA31F最适反应温度为85℃,比野生酶提高了5℃,其在65℃和70℃下的半衰期分别为105min和15min,与野生酶相比分别提高了 6倍和2倍。突变酶Umxyn10AL307V的最适反应温度为80℃,与野生酶保持一致,在65℃的半衰期为40min,与野生酶相比提高了 1.5倍。而且,突变酶Umxyn10AA31F和Umxyn10AL307V在热稳定性提高的同时,其pH耐受性、金属离子对酶活力的影响以及水解产物等都保留了野生酶优良性质。为了使木聚糖酶Umxyn1OA的热稳定性得到进一步的提高,将该酶的31位点氨基酸和307位点氨基酸进行双点突变,并在大肠杆菌中进行表达和蛋白纯化。结果发现,突变酶Umxyn1OAA31F/L307V的最适温度为85℃,较野生酶提高了5℃,在65℃下半衰期为35 min,较野生酶提高了 1.3倍,但对热稳定性的影响并没有表现出迭加效应。(本文来源于《广西大学》期刊2018-11-01)
宋立立,顿宝庆,张亚楠,张兆英[9](2018)在《果胶裂解酶基因与木聚糖酶基因的共表达》一文中研究指出利用重迭引物PCR方法将从海栖热袍杆菌中克隆得到的果胶裂解酶基因和从桔青霉CR-2菌株中克隆得到的木聚糖酶基因做重迭引物PCR扩增,扩增后得到融合基因plyxyl,将其构建载体后转化到大肠杆菌菌株BL21,克隆子经IPTG诱导在原核系统中实现了表达,p H值为中性,诱导6 h后最高酶活性分别达30.11 U/m L、2.03 IU/m L。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年17期)
李琦,成莉凤,段盛文,冯湘沅,郑科[10](2018)在《一种新型木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达》一文中研究指出为了获得新型木聚糖酶的高效分泌表达,在工程酶项目组前期原核表达了木聚糖酶基因xyn A的基础上,将xyn A基因(Gen Bank登录号:U57819)编码耐热性木聚糖酶成熟蛋白的部分序列克隆到p PICZαA表达载体上,转化毕赤酵母X33,成功构建真核表达体系,再分批加入0. 5%(V/V)甲醇诱导毕赤酵母工程菌株产胞外木聚糖酶。结合木聚糖酶活力检测、SDS-PAGE电泳和Western Blot分析胞外木聚糖酶表达情况。结果表明,该XynA含有典型的糖苷水解酶11类催化结构域(GH11),成熟蛋白的预测分子量为38. 6 ku,等电点为6. 86; 7个毕赤酵母基因工程菌株X33/p PICZαA-xyn A分泌的木聚糖酶活力均≥300 U/m L,最高达487. 2 U/m L;胞外木聚糖酶在SDS-PAGE和Western Blot检测的特征谱带分子量约为45 ku,均比预期分子量(38. 6 ku)略大。一种新型木聚糖酶获得了高效分泌表达,为进一步分离纯化,研究其性质、结构和功能奠定了基础。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年04期)
木聚糖酶基因论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
研究构建了库容量约为1.3×104个克隆子且外源片段的总长为30 Mb的土壤宏基因组文库。基于功能策略,从文库中筛选到分解木聚糖底物的阳性克隆子。该克隆经序列分析发现一个822 bp的潜在的编码木聚糖酶基因(cbxynA)的开放阅读框,其编码的氨基酸序列与来自古细菌属编码的木聚糖酶的相似度最高仅为45%,说明该序列为一条未知的新序列。cbxynA在大肠杆菌中的重组表达产物的分子质量为29 ku,与预测结果一致。对其原核表达条件进行优化,结果表明:质粒在培养5 h后加入0.7 mmol/L IPTG,23℃下诱导25 h后表达,木聚糖酶活力为52 U/mL,较初始值提高4.3倍。而重组酶(CBXYNA)最适pH和最适温度分别为5.2和55℃。金属离子Na+、K+、Li+、Ca2+能提高该酶的酶活,而另外一些金属离子如Mg2+、Mn2+、Zn2+、Fe3+、Al3+、Cu2+能抑制其活性。该酶以水溶性玉米芯木聚糖、燕麦木聚糖、水不溶性木聚糖为底物时,其相对酶活力分别为162%,139%,74%。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
木聚糖酶基因论文参考文献
[1].熊科,熊苏玥,柳佳芸,高思宇,邓蕾.链霉菌L10608来源木聚糖酶xyn-GH10/11基因的克隆与生物信息分析[J].中国食品学报.2019
[2].熊科,崔晓亭,王小艺,赵峙尧,柳佳芸.基于宏基因策略的新颖木聚糖酶基因cbxynA克隆及其重组酶酶学性质[J].中国食品学报.2019
[3].任雅馨,罗蒙,林娟,王国增.基于高通量扩增子测序的环境中木聚糖酶基因多样性分析[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[4].廖续中,熊亚茹,王九祥,赵帅,冯家勋.草酸青霉纤维素酶基因和木聚糖酶基因的调控基因POX05145的鉴定[J].基因组学与应用生物学.2019
[5].孟璐璐,于春蕾,练森,李保华,梁文星.苹果树腐烂病菌木聚糖酶VmXyl1基因的原核表达及多克隆抗体制备[J].农业生物技术学报.2019
[6]..澳新拟批准来自里氏木霉转基因菌株的木聚糖酶作为加工助剂[J].食品与机械.2019
[7]..欧盟评估来自一种转基因枯草芽孢杆菌的1,4-β-内切木聚糖酶的安全性[J].食品与机械.2019
[8].邓巧平.嗜热木聚糖酶基因Umxyn10A在大肠杆菌中的重组表达及其热稳定性的改造[D].广西大学.2018
[9].宋立立,顿宝庆,张亚楠,张兆英.果胶裂解酶基因与木聚糖酶基因的共表达[J].江苏农业科学.2018
[10].李琦,成莉凤,段盛文,冯湘沅,郑科.一种新型木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达[J].华北农学报.2018