黄芪复方剂提取物总黄酮保肝及抗睾丸氧化损伤研究

论文摘要

黄酮类化合物广泛存在于自然界,资源丰富,且具有多种生理活性,是一类广泛受到重视的天然化合物,众多研究表明黄酮类有抗突变、抗肿瘤、抗炎、治疗心血管疾病等广泛生物学活性,其中最为重要的是它减少自由基形成和清除自由基的抗氧化活性。目的:探讨黄芪复方剂提取物总黄酮对CCl4致大鼠肝脏与睾丸氧化损伤的保护作用及机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分组。腹腔注射四氯化碳玉米油（2ml/kg）造成大鼠急性肝损伤与睾丸氧化损伤模型,腹腔注射3小时后,黄酮药物组灌喂黄芪复方剂提取物总黄酮溶液（200mg/kg）,阳性药物对照组灌喂等容积联苯双酯（100mg/kg）溶液,空白对照组、模型组灌喂等容积灭菌生理盐水,以上各组间隔12h灌喂1次。然后取12h、24h二个时间点的大鼠血清与组织检测:血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氮基转移酶（AST）及白蛋白（ALB）含量,肝脏和睾丸组织中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）以及谷胱甘肽（GSH-Px）等指标,并采用HE染色后光镜观察肝脏和睾丸病理学变化。同时,用半定量RT-PCR法检测肝脏中细胞色素P450-2E1和iNOS mRNA的表达量。结果:与模型组比较,经黄酮药物组预防性治疗后,AST、ALT转氨酶明显降低（P＜0.05）,而ALB含量增加不明显。同时,肝脏与睾丸中的MDA含量明显降低（P＜0.05）,SOD、GSH-Px活性在肝脏中明显增加（P＜0.05,P＜0.01）,但睾丸中SOD、GSH-Px活性变化不明显。且能增加肝脏中的P450-2E1 mRNA表达量,在12h数据差异明显（P＜0.05）,抑制iNOS mRNA表达量,在24h数据差异明显（P＜0.05）,总体效果高于阳性对照组。通过病理学切片观察,中草药提取物总黄酮也能明显改善肝与睾丸组织的病理变化。结论:黄芪复方剂提取物总黄酮对四氯化碳造成的大鼠肝损伤与睾丸氧化损伤具有保护作用,其机制可能是通过降低四氯化碳引起的ALT、AST升高,减少MDA过脂质氧化产物,提高抗氧化酶SOD、GSH-Px活性,提高清除氧自由基的能力;另外,在肝脏组织中通过增加P450-2E1 mRNA表达量,减少iNOS mRNA表达量来达到降低CCl4毒性作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.自由基
• 1.1 自由基的种类
• 1.1.1 氧中心自由基
• 1.1.2 半醌类自由基
• 1.1.3 其它碳、氮、硫的中心自由基
• 1.2 动物体内自由基的产生
• 1.3 自由基对机体的危害
• 1.3.1 氧自由基对脂类和生物膜的破坏
• 1.3.2 氧自由基对蛋白质的损伤
• 1.3.3 氧自由基对核酸的损伤
• 1.4 自由基的清除
• 1.4.1 自由基的酶类清除剂
• 1.4.2 清除氧自由基的抗氧化剂
• 2.黄酮类化合物
• 2.1 黄酮类化合物的活性部位与治疗肝病的作用机理
• 2.1.1 黄酮类化合物的活性结构
• 2.1.2 黄酮类化合物治疗肝病的机理
• 2.2 黄酮类化合物对肝病的防治作用
• 2.2.1 黄酮类化合物对实验性肝损伤的保护
• 2.2.2 黄酮类化合物防治病毒性肝炎的研究
• 2.2.3 黄酮类化合物可治疗肝纤维化
• 2.2.4 黄酮类化合物对肝癌的防治研究
• 2.3 黄酮类化合物对雄性生殖系统的影响
• 2.3.1 外源性激素与雄性生殖
• 2.3.2 黄酮类化合物对雄性生殖产生的雌激素作用
• 2.3.3 黄酮类化合物对雄性生殖疾病的抗氧化作用
• 3.本研究目的与意义
• 3.1 研究目的
• 3.2 研究意义
• 第二章 提取物总黄酮对大鼠肝及睾丸保护作用的研究
• 1.材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 药品与试剂
• 1.1.3 实验仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 试验动物分组与处理
• 1.2.2 血清指标的测定
• 1.2.3 肝脏及睾丸组织匀浆生化指标的测定
• 1.2.4 组织学样本的处理
• 1.2.5 数据处理
• 2.结果与分析
• 4的毒性作用及黄酮干预对大鼠血清中ALB、AST、ALT水平的影响'>2.1 CCL₄的毒性作用及黄酮干预对大鼠血清中ALB、AST、ALT水平的影响
• 2.2 黄酮对CCL4致大鼠肝损伤组织中的MDA含量和SOD、GSH-PX活性的影响
• 4的大鼠睾丸组织MDA含量和SOD、GSH-PX活性的影响'>2.3 黄酮对注射CCL₄的大鼠睾丸组织MDA含量和SOD、GSH-PX活性的影响
• 2.4 提取物总黄酮对肝及睾丸保护作用的组织学观察
• 3.讨论
• 3.1 黄芪复方剂提取物总黄酮对大鼠肝损伤的保护作用
• 3.2 黄芪复方剂提取物总黄酮对大鼠睾丸抗氧化酶活性影响分析
• 第三章 提取物总黄酮对大鼠肝脏P450-2E1和iNOS的mRNA表达水平影响
• 1.材料与方法
• 1.1 实验原料
• 1.2 药品与试剂
• 1.3 实验仪器
• 1.4 RT-PCR主要方法步骤
• 2.结果与分析
• 2.1 总RNA样品的检测
• 2.2 大鼠肝脏中目的基因PCR扩增产物的琼脂糖电泳
• 2.3 PCR扩增产物半定量分析
• 3.讨论
• 结论
• 参考文献
• 缩略词
• 致谢
• 作者简历