论文题目: 茶叶蛋白的分离提取及茶渣对灵芝发酵影响的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 发酵工程
作者: 张晓晖
导师: 章克昌,活泼
关键词: 茶叶蛋白质,纯化,灵芝,灵芝多肽
文献来源: 江南大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本文以去茶多酚茶叶残渣为原料,制备茶叶蛋白质。通过试验优化碱提取条件为:固-液比为1:40,提取时间为40min,提取温度为90℃,碱液浓度为0.06mol/L,在此条件下,茶叶蛋白的提取率为56.4%。所得蛋白提取液经过活性炭脱色,pH4.5沉淀,得到茶叶粗蛋白。脱色前后蛋白提取液的清除羟自由基(HFR)的能力分别为IC50=5.89mg/ml和11.5mg/ml通过Shodex PROTEIN KW-802.5确定茶叶蛋白的分子量50001000,000Da;通过Sephedex G-200凝胶柱和DEAE(FF)离子交换柱对茶叶蛋白进行分离纯化,获得了具有清除HFR能力的茶叶蛋白TP-3-2,其IC50为20.3mg/ml。电泳实验结果表明该蛋白的纯度达到了电泳纯,蛋白分子量28800Da左右。对添加茶渣进行灵芝发酵的可行性进行了研究,并确定了茶渣的适宜添加量为1.0%,适宜发酵时间为105~110h,多糖含量达到4.46g/L发酵液,氨基酸分析表明其氨基酸组成基本没有发生变化。以上分析表明添加1.0%的茶渣对灵芝生长没有影响。对添加了茶渣的灵芝发酵液的多肽进行分析,实验表明了其胞内外多肽都有清除HFR的能力,其中添加了茶渣的胞内多肽的清除自由基能力最高,为IC50=0.31mg/ml。通过RP-HPLC分析得出,其胞内多肽的组成发生了一些改变,与未添加茶渣的氨基酸成分相比较看出,其中的谷氨酸和脯氨酸增加的比较多,分别比未添加的含量增加78.0%和40.1%。而精氨酸和赖氨酸则分别降低了27.4%和78.5%。降血脂动物试验表明茶叶蛋白有降血脂效应,其对抗动脉粥样硬化和冠心病有一定的预防作用。抗衰老实验表明茶叶蛋白的抗衰老功效不显著,而添加了茶渣的灵芝发酵液和未添加茶渣的灵芝发酵液都具有一定的抗衰老功效,分别使老龄鼠MAD下降39%和27%,而使SOD上升了16%和14%。可以看出,添加了茶渣的灵芝发酵液的抗衰老功效略优于未添加茶渣的灵芝发酵液。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
第一章 绪论
1.1 茶简介
1.1.1 茶的种类及分布
1.1.2 茶叶的生化组成
1.2 灵芝简介
1.3 茶叶蛋白质研究状况
1.3.1 茶叶蛋白的组成
1.3.2 茶叶蛋白功效研究
1.4 食(药)用真菌与茶叶的有机结合
1.4.1 药用真菌生物转化研究进展
1.4.2 药用真菌与茶叶的生物转化
1.5 立题意义
1.6 课题来源及研究内容
第二章 茶叶蛋白的提取工艺研究
2.1 材料与方法
2.2 结果与讨论
2.2.1 茶渣组成成分分析
2.2.2 蛋白测定方法的比较
2.2.3 茶叶蛋白提取工艺
2.2.4 茶叶蛋白的粗沉淀
2.2.5 茶叶蛋白的氨基酸分析
2.3 本章小结
第三章 茶叶蛋白分离纯化的初步研究
3.1 材料和方法
3.2 结果与讨论
3.2.1 四种蛋白质脱色方法的比较
3.2.2 茶叶蛋白脱色前后清除羟自由基能力(HFR)比较
3.2.3 茶叶蛋白分子量范围确定
3.2.4 凝胶柱的选择
3.2.5 DEAE 柱分离
3.2.6 TP-3-2 的纯度鉴定及分子量测定
3.3 本章小结
第四章 添加茶渣对灵芝发酵的影响
4.1 材料与方法
4.2 结果与讨论
4.2.1 添加茶渣灵芝深层发酵的初步分析
4.2.2 茶渣最适添加量的研究
4.2.3 添加茶渣最适发酵时间的研究
4.2.4 添加茶渣发酵对菌体氨基酸的影响
4.2.5 灵芝发酵液中肽类物质的紫外光谱分析
4.2.6 提取液清除HFR 能力的比较
4.2.7 肽类的RP-HPLC 分析
4.2.8 胞内多肽的氨基酸分析
4.3 本章小结
第五章 茶叶蛋白及添加茶渣发酵的灵芝发酵液的功能性试验
5.1 材料与方法
5.1.1 降血脂动物实验
5.1.2 抗衰老动物实验
5.2 结果与分析
5.2.1 降血脂实验
5.2.2 抗衰老动物实验
5.3 本章小结
主要结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表论文情况
发布时间: 2006-07-20
参考文献
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