导读:本文包含了蛋白质多肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:交联剂
蛋白质多肽论文文献综述
[1]（2019）在《年产770吨多肽试剂及蛋白质交联剂项目》一文中研究指出该项目位于安徽省安庆市高新技术产业开发区,由安徽昊帆生物有限公司投资建设,占地88亩,年产770吨多肽试剂及蛋白质交联剂,并配套相应的公用工程设施(包括:动力站、污水处理站等)。项目总投资25469.62万元。(本文来源于《乙醛醋酸化工》期刊2019年11期）
吴惠惠,黄浩,易敏,杨爱芬,杜君卿[2]（2019）在《一种新的分子内可自剪切多肽介导的可视化原核蛋白质表达系统》一文中研究指出通过在目标蛋白和荧光蛋白等标签蛋白之间引入可引起分子内剪切的多肽是监测蛋白质表达的重要方法.通过将小鼠MYRF的介导其分子内自剪切的ICA结构域插入到目标蛋白和指示蛋白mCherry之间,既实现了对融合蛋白表达的直接观察,同时实现了融合蛋白的高效自剪切,并释放出游离的目标蛋白.实验证明,该可视化蛋白质表达系统可在原核细胞中有效的表达不携带标签序列的目标蛋白.(本文来源于《杭州师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
[3]（2019）在《年产770吨多肽试剂及蛋白质交联剂项目》一文中研究指出该项目位于安徽省安庆市高新技术产业开发区,由安徽昊帆生物有限公司投资建设,占地88亩,年产770吨多肽试剂及蛋白质交联剂,并配套相应的公用工程设施(包括:动力站、污水处理站等)。项目总投资25469.62万元。(本文来源于《乙醛醋酸化工》期刊2019年09期）
周思彤,车逸豪,倪连丽,李龙星,袁仕梦[4]（2019）在《大胡蜂蜂毒中多肽和蛋白质结构和功能的多样性》一文中研究指出为证明大胡蜂Vespa magnifica(Smith)蜂毒具有较大的药用开发价值,本研究采用超高效液相色谱-质谱和电泳技术对其多肽和蛋白质的分布进行分析,发现其蛋白质的相对分子质量主要分布在17～45 kDa范围内。蜂毒多肽类物质的相对分子质量呈"单峰"式分布,61%在500～3 000 Da范围内,为大胡蜂蜂毒中多肽含量最为丰富的部分。通过牛津杯法对蜂毒的抑菌活性进行研究,且以HepG2人肝癌细胞及B16黑色素瘤细胞为研究对象,用MTT法检测蜂毒的细胞毒性活性,证明其具有良好的抑菌作用和细胞毒活性,其结果与已报道的其他蜂类既有相似性又存在具体差异,展示了大胡蜂蜂毒的分子多样性,为后续该毒素的物质基础研究及药用价值开发提供参考。(本文来源于《天然产物研究与开发》期刊2019年09期）
王梦如,张秀清,王颖,周思彤,杨自忠[5]（2019）在《颜氏大疣蛛蛛毒中多肽和蛋白质的多样性分析》一文中研究指出对颜氏大疣蛛Macrothele yani蛛毒所富含的多肽与蛋白质多样性进行探索,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和超高效液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间质谱技术分离和鉴定颜氏大疣蛛蛛毒中的蛋白质和多肽,并对其相对分子质量分布多样性进行分析。结果显示:粗毒中所含蛋白质的相对分子质量主要分布在35 kDa以上。在17～135 kDa分离度较佳的共有11条电泳条带,主要集中于40～120 kDa附近;在75 kDa附近弥散着高丰度的蛋白条带,75 kDa以上的蛋白质最丰富。粗毒经色谱分离后得到超过50个色谱峰,经质谱鉴定得到121个物质成分,其中,多肽类物质的相对分子质量呈双峰式分布,21%分布在500～2 000 Da,76%分布在3 000～5 000 Da,为粗毒中多肽含量最丰富的部分,且集中于35～60 min的保留时间内被洗脱。研究结果表明,颜氏大疣蛛蛛毒中含有较为丰富的多肽和蛋白类物质,这些物质的相对分子质量分布特征与已报道的其他蜘蛛既有相似性又存在具体差异。本文展示了颜氏大疣蛛蛛毒的分子多样性,为后续该毒素的物质基础研究及药用价值开发提供参考。(本文来源于《四川动物》期刊2019年04期）
孙权[6]（2019）在《LncRNA UCHL1-AS1参与M/Z6455.5Da蛋白质多肽抑制肾母细胞瘤机制研究及表达谱变化特征》一文中研究指出1.研究背景与研究目的肾母细胞瘤(Nephroblastoma)是小儿泌尿系统最常见的恶性实体肿瘤之一,其发病机理复杂,寻找到影响肾母细胞瘤发生发展的关键基因靶点,不但可以更深入理解其发病机制,也可获取潜在的灵敏、准确的诊断方法。近年来,对肿瘤相关的基因研究热点,已逐步从编码类基因,转移到非编码类基因。非编码RNA数量众多,在肿瘤的发生发展各环节,发挥广泛作用。LncRNA(long non-coding RNA)这类RNA分子,它们的转录本长度在200 nt以上。该类基因不编码蛋白,但可通过多层面调控基因表达水平,其作用机制也比较复杂,大体分类,可分为:表观遗传学调控、转录调控和转录后调控。肾母细胞瘤发生过程,有关LncRNA的作用机制,已有多项研究报道,但相比其他肿瘤,研究数量仍不充足、深度有待加深。在关于肾母细胞瘤的蛋白质多肽的新药研发上,本课题组在前期寻找出肾母细胞瘤特异性蛋白质标记物M/Z6455.5Da蛋白质多肽,因此本课题拟通过细胞实验和动物实验,研究其对肾母细胞瘤的作用机制与关键分子靶点;此外,将运用基因芯片方法,寻找M/Z6455.5Da蛋白质多肽作用于肾母细胞瘤引起的关键基因变化机制。本论文分为以下四部分。第一部分:M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理肾母细胞瘤引起LncRNA UCHL1-AS1和mRNA UCHL1的表达变化;第二部分:LncRNA UCHL1-AS1体外对肾母细胞瘤促癌作用研究及M/Z6455.5Da蛋白质多肽的抗癌效果研究;第叁部分:LncRNA UCHL1-AS1过表达促进肾母细胞瘤在体生长及M/Z6455.5Da蛋白质多肽对抗在体肿瘤效果研究;第四部分:M/Z6455.5Da蛋白质多肽体外处理肾母细胞瘤基因芯片表达谱分析。第一部分:M/Z6455.5Da蛋白多肽处理肾母细胞瘤引起LncRNA UCHL1-AS1和mRNA UCHL1的表达变化1.材料与方法1.1实验细胞和动物实验细胞为:人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1:来源于美国ATCC细胞库;人肾癌Wilms细胞G401:来源于中国医学科学院基础医学研究所基础医学细胞中心。实验动物为:裸鼠,雌性,5周龄,购自斯莱克公司。1.2细胞培养SK-NEP-1和G401细胞分别用15%FBS+Mc Coy's 5A(Modified)Medium培养基和10%FBS+DMEM培养基正常培养,生长到90%以上汇集度时传代。细胞活力正常时用于加入蛋白质多肽药物处理。1.3 M/Z6455.5Da多肽药物处理细胞的活力保证在95%以上,SK-NEP-1和G401分别铺6孔板,每孔1*106个细胞。细胞贴壁后弃上清液,分别换成无血清的Mc Coy's 5A(Modified)Medium培养基和DMEM培养基,培养过夜。第二天加入蛋白质多肽药物作用48h后,弃上清收集细胞,抽提RNA和蛋白,用于后续检测。M/Z6455.5Da多肽药物处理分为四个浓度:0μM,10μM,20μM和40μM。1.4 Realtime PCR利用Trizol试剂法进行总RNA抽提,测定RNA浓度,并利用琼脂糖电泳检查RNA的完整性。此后根据各目标引物和程序,进行Realtime PCR实验。鉴定基因如下:GAPDH,LncRNA UCHL-1-AS1,LncRNA DLEU-1,LncRNA BCYRN-1,mRNA beta-catenin,mRNA UCHL-1,mRNA Snail-1,mRNA c-Myc。1.5 Western blot每个细胞样本加入100 ul细胞裂解液,使细胞完全裂解。离心蛋白、凝胶电泳分离、半干电泳转移至PVDF膜。血清封闭转印膜,添加稀释的一抗,4oC温育过夜。用1×TBST洗涤5次,每次10钟。加入适当稀释的二抗,室温温育2小时。用1×TBST洗涤5次,每次10分钟。采用ECL化学发光试剂盒进行化学发光检测,并分析印记化学发光丰度。检测蛋白为:GAPDH、beta-catenin,UCHL-1,Snail-1,c-Myc。1.6数据分析采用Graphpad Prism进行数据分析和作图,组间比较采用one-way ANOVA方差分析,以p<0.05记为具有统计学差异。2.结果2.1 M/Z6455.5Da蛋白质多肽下调lncRNA UCHL1-AS1和mRNA UCHL1表达Realtime PCR结果显示,在SK-NEP-1细胞中,经M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理48小时,lncRNA UCHL1-AS1和UCHL1 mRNA表达水平随M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理剂量依赖性下调(20μM和40μM组vs Control组p<0.01)。此外,M/Z6455.5Da处理后,DLEU1和BCYRN1两个lncRNA表达水平也显着下调(p<0.01 or 0.05)。在mRNA水平,UCHL1和c-Myc基因mRNA表达水平亦剂量依赖性下调(p<0.01 or 0.05)。在G401细胞中,结果与SK-NEP-1细胞一致,lncRNA UCHL1-AS1和mRNA UCHL1表达水平随M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理剂量依赖性下调(lncRNA UCHL1-AS1:20μM和40μM组vs Control组p<0.05)。lncRNA DLEU1水平显着下调(20μM和40μM组vs Control组p<0.05),而lncRNA BCYRN1水平在20μM显着上调,与SK-NEP-1细胞实验相反。在mRNA表达水平,c-Myc亦剂量依赖性9下调(20μM vs Control组p<0.05;40μM组vs Control组p<0.01)。2.2 M/Z6455.5Da蛋白质多肽下调UCHL1蛋白表达水平通过Western blot显示,M/Z6455.5Da蛋白质多肽体外处理肾母细胞瘤48小时后,SK-NEP-1和G401一致变化的蛋白为:UCHL1、CDK-1和c-Myc剂量依赖性下调,与Realtime PCR结果一致。第二部分:lncRNA UCHL1-AS1体外对肾母细胞瘤促癌作用研究及M/Z6455.5Da多肽的抗癌效果研究1.材料与方法1.1过表达UCHL1-AS1载体及慢病毒包装利用p SGLV质粒载体构建过表达UCHL1-AS1质粒,插入lncRNA UCHL1-AS1序列,将载体质粒、包装质粒和VSVG质粒转入293T细胞,通过GFP荧光鉴定质粒的转入。上清病毒液纯化和浓缩,荧光方法鉴定病毒滴度。1.2慢病毒转染SK-NEP-1细胞SK-NEP-1稳转细胞用培养基组成为:84%Mc Coy's 5A(Modified)Medium+15%FBS+1%Penicillin/Streptomycin。用该培养基培养细胞,每10-CM皿细胞加入病毒液1 ml,48小时后,加入Puromycin杀死未转入病毒的细胞,共处理2次,每次间隔24小时,此后通过荧光显微镜观察GFP表达情况,阳性细胞达90%以上时,扩增细胞,传代3次后,再次观察GFP表达情况。后续通过q PCR法测定UCHL1-AS1基因在稳转株中相比野生型细胞中的过表达情况,鉴定后的稳转株用于细胞功能实验。1.3细胞增殖活力测定采用CCK8法测定细胞增殖活力,测定0,24,48和72小时不同组细胞增殖活力水平。在各96孔板中添加CCK-8试剂,反应3小时后,测定吸光度,计算相对细胞活力。1.4体外克隆形成能力评估采用软琼脂法进行体外克隆形成能力评估,比较不同组细胞培养7天后克隆形成数量。1.5细胞凋亡检测采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,利用Annexin-V/PI双染色剂染色,流式细胞仪分析早期和晚期总体凋亡细胞百分比。1.6细胞周期检测利用荧光染料碘化丙啶PI与胞内DNA结合的特性,采用流式细胞仪检测各组细胞荧光强度,反应细胞周期的各期状况。计数2-3万个细胞,通过细胞周期拟合软件分析各周期细胞比例,尤其G0-G1期细胞百分比。1.7细胞侵袭能力检测采用Transwell小室评估各组细胞侵袭能力。小室上下层以聚碳酸酯膜相隔,将不同分组的SK-NEP-1细胞分别种在上室内,观察侵袭到下层的细胞数目,反应细胞侵袭能力。培养48 h,利用0.1%结晶紫染色20 min,用PBS洗3遍,观察下层细胞数量。1.8实验分组分组如下:SK-NEP-1:野生SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1+M/Z6455.5Da:野生SK-NEP-1细胞添加M/Z6455.5Da蛋白质多肽(40μM)处理;SK-NEP-1-NC:空载体稳转株SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1-NC+M/Z6455.5Da:空载体稳转株添加M/Z6455.5Da蛋白质多肽(40μM)处理;SK-NEP-1-UCHL1-AS1:过表达UCHL1-AS1稳转株SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5D:过表达UCHL1-AS1稳转株SK-NEP-1细胞添加M/Z6455.5Da蛋白质多肽(40μM)处理。2.结果2.1 LncRNA UCHL1-AS1促进肾母细胞瘤体外增殖通过CCK8法测定SK-NEP-1肾母细胞瘤72小时细胞增殖活力,结果显示,相比空载体对照(SK-NEP-1-NC),过表达UCHL1-AS1显着提升细胞增殖活力(48和72小时,SK-NEP-1-UCHL1-AS1 vs SK-NEP-1-NC,p<0.01);而对于各稳转株细胞,M/Z6455.5Da蛋白质多肽均可显着抑制时间点细胞活力(48和72小时,SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP1-UCHL1-AS1,p<0.01;SK-NEP-1-NC+M/Z6455.5Da vs SK-NEP1-NC,p<0.01;SK-NEP-1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP1,p<0.01)。然而,同在M/Z6455.5Da蛋白质多肽暴露下,相比SK-NEP-1-NC组,过表达UCHL1-AS1组仍具有高度显着提升的细胞活力(72小时:SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP-1-NC+M/Z6455.5Da,p<0.01)。以上结果提示,UCHL1-AS1的过表达可促进肾母细胞瘤体外增殖。2.2 LncRNA UCHL1-AS1促进肾母细胞瘤体外克隆形成软琼脂实验显示,相比空载体对照(SK-NEP-1-NC),过表达UCHL1-AS1显着提升细胞体外克隆形成数,而对于各组稳转株,M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理后,相比溶剂对照,均轻度降低克隆形成数量。本结果提示,LncRNA UCHL1-AS1的高表达对肾母细胞瘤的克隆形成具有促进作用。2.3 LncRNA UCHL1-AS1抑制肾母细胞瘤体外凋亡水平通过流式细胞术检测各组SK-NEP-1细胞体外凋亡水平,结果显示,相比空载体对照(SK-NEP-1-NC),过表达UCHL1-AS1显着降低体外凋亡水平(SK-NEP-1-UCHL1-AS1 vs SK-NEP-1-NC,p<0.05)。对于稳转株和野生细胞株,添加M/Z6455.5Da处理均可显着提高凋亡水平(各细胞:M/Z6455.5Da vs Vehicle,p<0.05)。以上结果提示,LncRNA UCHL1-AS1的高表达可降低肾母细胞瘤体外凋亡水平,而M/Z6455.5Da蛋白质多肽可通过促进凋亡发挥治疗作用。2.4 LncRNA UCHL1-AS1降低G0-1细胞周期比例与以上结果类似,相比SK-NEP-1-NC,过表达UCHL1-AS1高度显着下调G0-1细胞周期比例(SK-NEP-1-UCHL1-AS1 vs SK-NEP-1-NC,p<0.01),在SK-NEP-1细胞和SK-NEP-1-NC细胞中,M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理可显着提高G0-1细胞周期比例(p<0.05)。均在M/Z6455.5Da暴露下,过表达UCHL1-AS1组G0-1细胞周期比例仍高度显着低于对照组(SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP-1-NC+M/Z6455.5Da,p<0.01)。以上结果提示,LncRNA UCHL1-AS1的高表达可降低肾母细胞瘤体外细胞周期阻滞水平,而M/Z6455.5Da蛋白质多肽可通过促进周期停滞发挥治疗作用。2.5 LncRNA UCHL1-AS1促进肾母细胞瘤体外侵袭通过Transwell小室48小时测试,评估SK-NEP-1细胞体外侵袭能力,结果显示,在M/Z6455.5Da蛋白质多肽暴露下,各组细胞侵袭能力均低于对照组;而UCHL1-AS1过表达组侵袭细胞数显着高于空载体对照,且该趋势在M/Z6455.5Da蛋白质多肽暴露下与无M/Z6455.5Da处理相一致。以上结果提示,LncRNA UCHL1-AS1的高表达可促进肾母细胞瘤体外侵袭,而M/Z6455.5Da蛋白质多肽可抑制肾母细胞瘤体外侵袭,从而发挥体外对抗肾母细胞瘤的效果。第叁部分:LncRNA UCHL1-AS1过表达促进肾母细胞瘤在体生长及M/Z6455.5Da多肽对抗在体肿瘤效果研究1.材料与方法1.1肾母细胞瘤荷瘤裸鼠模型利用5周龄裸鼠(雌性)饲养于SPF级动物实验室内饲养。饲养环境为,12小时/12小时昼夜更替,23℃。所有接种操作在无菌环境下进行。以上各组SK-NEP-1细胞,重悬浮于Mc Coy's 5A培养基和BD Matrigel基质胶(体积比1:1),最终接种浓度为5×107个/ml,接种体积0.2 ml细胞悬液于左侧前肢腋窝皮下,形成皮下小丘。接种后,当肿瘤直径达5 mm时,可认为荷瘤裸鼠模型构建成功。待体积增长至约200 mm3时,3种细胞(SK-NEP-1,SK-NEP-1-NC,SK-NEP-1-UCHL1-AS1)构建的动物模型,每种细胞分为两组,一组腹腔注射M/Z6455.5Da蛋白质多肽(4 mg/kg),另一组注射等体积生理盐水。针头在裸鼠脐上入针。持续注射一周,每两天测量一次体积,第8天进行荧光素酶在体活性检测和取材。体积计算方法为0.5*L*S*S1.2裸鼠活体荧光素酶成像评估在体荷瘤量鉴于慢病毒质粒载体具有荧光素酶报告基因,可通过注射底物进行活体成像,直观评价活体动物荷瘤水平。各稳转株组(4组)动物在药物注射前(第0天)和取材4小时前(第8天),麻醉后腹腔注射Luciferin(100 mg/kg),10 min后置入活体成像系统,记录信号强度。1.3肿瘤和肾脏取材所有动物于注射M/Z6455.5Da蛋白质多肽或生理盐水第8天取材,牺牲动物后,在一分钟内取出瘤体,置入4%多聚甲醛固定;同时摘除肾脏,使用甲醛固定。1.4肿瘤HE染色固定的肿瘤组织经梯度乙醇脱水后、二甲苯脱色后,石蜡包埋,在石蜡切片机为5μm切片,贴片后进行常规HE染色。具体步骤包括:脱蜡、脱水、苏木精染色、水洗、0.25%盐酸酒精分色、洗涤、伊红染色、脱水、二甲苯处理、中性树胶封片等。在显微镜下观察肿瘤组织。1.5裸鼠肾脏Masson染色为检验LncRNA UCHL1-AS1的表达调控和M/Z6455.5Da蛋白质多肽腹腔给药是否影响裸鼠肾脏纤维化,在肿瘤取材后,同时摘除肾脏,同法固定,脱水,切片(见前文),进行Masson染色。具体步骤包括:脱蜡、脱水、Regaud氏苏木精、水洗、1%盐酸酒精分色、酸性品红染色、洗涤、1%磷钨酸处理、苯胺蓝处理、1%醋酸冲洗、脱水、二甲苯处理、中性树胶封片等。在显微镜下观察肾脏组织。1.6实验分组分组如下:SK-NEP-1:野生SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1+M/Z6455.5Da:野生SK-NEP-1细胞添加M/Z6455.5Da多肽药物(40μM)处理;SK-NEP-1-NC:空载体稳转株SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1-NC+M/Z6455.5Da:空载体稳转株添加M/Z6455.5Da多肽药物(40μM)处理;SK-NEP-1-UCHL1-AS1:过表达UCHL1-AS1稳转株SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5D:过表达UCHL1-AS1稳转株SK-NEP-1细胞添加M/Z6455.5Da多肽药物(40μM)处理。1.7数据分析采用Graphpad Prism软件进行数据分析和作图,多时间点组间比较采用two-way ANOVA方差分析,单时间点组间比较采用one-way ANOVA方差分析,以p<0.05记为具体统计学差异。2结果2.1 LncRNA UCHL1-AS1促进肾母细胞瘤在体生长经皮下接种及腹腔注射M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理,测量肿瘤体积,结果显示,过表达UCHL1-AS1显着提高肿瘤在体生长速率,自day 4开始,UCHL1-AS1过表达组体积均高度显着高于NC组(day 4-8:SK-NEP-1-UCHL1-AS1 vs SK-NEP-1-NC,p<0.01),为美观起见,图上仅标注最后一日SK-NEP-1-UCHL1-AS1vs SK-NEP-1-NC和SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP-1-UCHL1-AS1组间比较。在叁种细胞中,M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理均显着降低肿瘤体积(day4-8:SK-NEP-1-UCHL1-AS1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP-1-UCHL1-AS1 p<0.01,SK-NEP-1-NC+M/Z6455.5Da vs SK-NEP-1-NC p<0.01,SK-NEP-1+M/Z6455.5Da vs SK-NEP-1 p<0.01)。此外,SK-NEP-1-UCHL1-AS1和SK-NEP-1-NC组,在第0天和8天进行Luciferin注射,通过活体成像记录荧光强度信号,观察皮下荷瘤量,结果与以上肿瘤体积曲线一致,SK-NEP-1-UCHL1-AS1有较高荷瘤水平,且一定程度对抗M/Z6455.5Da蛋白质多肽的抗肿瘤作用。以上结果提示,LncRNA UCHL1-AS1可在体内环境促进肾母细胞瘤的生长;M/Z6455.5Da蛋白质多肽可发挥体内对抗肾母细胞瘤的效果。2.2肿瘤HE染色观察结果通过肿瘤HE染色可见,M/Z6455.5Da可引起多处肿瘤的坏死和空洞,而UCHL1-AS1过表达细胞则坏死较少,即使对于系统给药M/Z6455.5Da蛋白质多肽,坏死和空洞水平也较低。2.3肾脏Masson染色观察结果通过Masson染色观察肾脏纤维化水平,未发现各组裸鼠存在显着差异。第四部分:M/Z6455.5Da多肽体外处理肾母细胞瘤基因芯片表达谱分析1.材料与方法1.1表达谱分析表达谱芯片的实验开展由上海伯豪生物技术有限公司完成,其中lncRNA探针采用SBC human lncRNA V6芯片检测。1.2分组基因表达谱芯片分组为:SK-NEP-1:野生SK-NEP-1细胞;SK-NEP-1+M/Z6455.5Da:野生SK-NEP-1细胞添加M/Z6455.5Da多肽(40μM)。1.3数据分析表达谱芯片数据分析包括:归一化处理、箱线图分析、差异基因筛选、标准化数据散点图绘制、差异mRNA的GO富集分析、差异mRNA的KEGG pathway富集分析、LncRNA靶基因预测等。2.结果2.1基因芯片分析差异基因经差异表达基因(DEG)准筛选,获得以下差异基因:mRNA差异基因212个,其中,69个上调基因,80个下调基因;lncRNA共计666个差异基因,其中317个上调基因,349个下调基因。同时,UCHL1-AS1也被验证,经多肽给药处理后,表达水平显着下调,仅为对照的0.0285倍,且是具有基因符号的前几位成员。2.2 GO和析KEGG富集分析通过将差异基因进行GO富集分析,以生物过程的富集为主,尤其neutral amino acid transport、organic acid transmembrane transport、L-amino acid transmembrane transporter activity等富集最为显着。KEGG pathway富集分析显示,以Taste transduction、Melanoma等富集最高。2.3 LncRNA靶点预测以上差异lncRNA,cis靶点共1323个基因(包含重复),trans靶点共18098个(包含重复)。继而,预测cis靶点与mRNA同向变化差异基因共同出现靶点,预测trans靶点与mRNA反向变化差异基因共同出现的靶点。获得的cis共同出现靶点32个(剔除重复值),获得的Trans共同出现靶点32个(剔除重复值)。其中,上述两类(Trans靶点与差异mRNA共性基因和cis靶点与差异mRNA共性基因)中均出现的靶点有叁个:CPPED1、LCTL和EREG。可以认为,上调的CPPED1和下调的LCTL与EREG,是M/Z6455.5Da蛋白质多肽体外处理对肾母细胞瘤发挥影响的叁个最关键靶点。结论1、肾母细胞瘤细胞系中UCHL1(蛋白和mRNA)和lncRNA UCHL1-AS1表达水平剂量依赖地受M/Z6455.5Da蛋白质多肽处理下调,同时显着下调lncRNA DLEU1和mRNA CDK-1、mRNA c-Myc表达水平。2、lncRNA UCHL1-AS1可促进肾母细胞瘤细胞系的离体增殖、克隆形成及体外侵袭能力,抑制其凋亡和细胞周期停滞。3、lncRNA UCHL1-AS1过表达可促进肾母细胞瘤的在体生长,但对肾脏组织结构无明显影响。4、通过表达谱芯片检测M/Z6455.5Da蛋白质多肽体外处理肾母细胞瘤引起的表达谱变化可发现大量差异基因,包括395个差异mRNA和666个差异lncRNA。其中,lncRNA UCHL1-AS1亦为受M/Z6455.5Da多肽处理显着下调的基因之一。M/Z6455.5Da蛋白质多肽体外处理肾母细胞瘤可引起以neutral amino acid transport、organic acid transmembrane transport、L-amino acid transmembrane transporter activity等为代表的GO富集,同时引起以Taste transduction、Melanoma、VEGF signaling pathway为代表的KEGG pathway富集。M/Z6455.5Da蛋白质多肽体外处理肾母细胞瘤引起的差异mRNA中,CPPED1、LCTL和EREG等与lncRNA的靶基因预测高度相符,在参与M/Z6455.5Da蛋白质多肽调控肾母细胞瘤过程中发挥重要作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-05-01）
[7]（2019）在《2019第十二届国际蛋白质和多肽大会》一文中研究指出项目简况主办单位:百奥泰国际会议(大连)有限公司会议时间:2019年6月14-16日会议地点:北京会议主题:从科学突破到新应用组委会说会峰会负责人:2019第十二届国际蛋白质和多肽大会组委会联系人:高女士国际蛋白质和多肽大会,作为世界生命科学领域中比较有影响力的盛会之一,已经在全世界多个国家成功举办了11届,每年都吸引30多个国家和地区的代表参加。第十二届国际蛋白质和多肽大会将于2019年6月14-16日在北京举行,本届会议以"从科学突破到新应用"为主题,遵循专业性、前沿性、国际性原则,会议邀请国际顶级专家、着名企业家、(本文来源于《中国会展(中国会议)》期刊2019年08期）
夏蓉,卞晶晶,陶汇源,程永强,曾汇娟[8]（2019）在《花生醋浸过程中蛋白质、多肽含量变化及其抗氧化性的研究》一文中研究指出实验以醋泡花生为研究对象,考察了不同类别的醋和不同浸泡时间对其抗氧化性的影响,并通过测定浸泡过程中粗蛋白含量和多肽含量的变化,探究抗氧化性与醋花生多肽含量变化的相关性。采用DPPH自由基清除法分别测定了陈醋浸泡的花生及香醋浸泡的花生的抗氧化能力,实验结果显示:花生经过醋液浸渍,抗氧化性在浸泡前期增长显着,后期趋于平缓。2种食醋浸泡的花生抗氧化能力无显着性差异。采用凯氏定氮法及分光光度法测定2种食醋浸泡的花生粗蛋白含量及多肽含量,结果显示:花生醋浸过程中粗蛋白含量下降,多肽含量上升。醋浸第13天时,香醋浸泡的花生粗蛋白含量下降了18.03%,陈醋浸泡的花生粗蛋白含量下降了22.63%。花生醋浸过程中多肽含量变化与抗氧化能力变化趋势基本一致,且陈醋浸泡和香醋浸泡的花生多肽含量分别在第7天和第10天达到峰值,含量分别为(5.38±0.07)g/kg和(3.83±0.11)g/kg。采用玻璃电极法测定花生醋浸过程中醋液pH值的变化,结果显示:醋液pH值上升,且在浸泡前3天上升显着。陈醋浸泡的花生醋液pH值低于香醋浸泡的花生醋液pH值。研究结果显示:花生醋浸过程中抗氧化能力与多肽含量变化趋势基本一致,食醋种类对抗氧化能力变化无显着影响。不同食醋因其pH值不同,浸泡的花生粗蛋白含量及多肽含量变化有所差异。(本文来源于《中国调味品》期刊2019年04期）
杨彬,高文远,张艳军[9]（2019）在《基于转录组学-蛋白质组学-多肽组学整合关联分析策略的动物药蛋白多肽类成分研究思路及方法》一文中研究指出动物药是传统中药的重要组成部分,其特有功效在中药临床应用中具有不可替代性。鉴于目前动物药研究主要存在化学成分、药效物质基础、毒性物质基础不明确,动物药质量控制体系不健全等关键问题,通过构建基于转录组学-蛋白质组学-多肽组学整合关联分析策略的动物药蛋白多肽类成分研究思路及方法,主要包括基于转录组学的动物药蛋白数据库的构建、动物药蛋白多肽类成分的高分辨质谱分析、蛋白多肽类成分的匹配分析与鉴定以及关联功效的蛋白多肽类成分活性评价等研究内容,试图为动物药蛋白多肽类成分的分析鉴定提供一种切实可行的研究思路及方法,为进一步解决动物药研究存在的关键问题提供技术支持。(本文来源于《中草药》期刊2019年05期）
刘宝阳,张磊,范志娟,田亚琼,刘树业[10]（2018）在《蛋白质多肽酶解及分离新技术的改进》一文中研究指出目的探讨新型蛋白质多肽酶解和分离技术,以此提高蛋白质的质谱鉴定水平,使其适用于更复杂生物样品,从而弥补传统蛋白质组学利用的二维电泳-质谱技术所产生的不足。方法利用美国promega和自主修饰Self-owned胰蛋白酶,酶解浓度不同的牛血清清蛋白测定总离子流图(TIC)并通过Proteome Discoverer软件进行数据分析,测定牛血清清蛋白覆盖率。利用Self-owned胰蛋白酶酶解牛血清清蛋白,其中酶切液用自制的二维一体毛细管色谱柱进行分离,通过高效液相色谱与质谱技术平台,通过对TIC、信号强度和保留时间(RT),观察毛细管色谱柱分离性能和重复性。结果美国promega和Self-owned胰蛋白酶酶解浓度不同的牛血清清蛋白结果显示,Self-owned胰蛋白酶在高效液相色谱与质谱技术鉴定高、中、低浓度牛血清清蛋白覆盖率分别为38.22%、28.34%、13.18%;而美国promega胰蛋白酶酶解牛血清清蛋白覆盖率分别为34.93%、26.36%、10.21%。Self-owned胰蛋白酶和自制的二维一体毛细管色谱柱联用,用于牛血清清蛋白分析,通过质谱分析,结果显示,在极低浓度条件下,牛血清清蛋白的覆盖率是24.22%。在相同的实验条件下重复进行两次实验,观察自制的二维一体毛细管色谱柱的重复性,结果显示选用牛血清清蛋白酶切的肽段混合物中质荷比(m/z)740.4为强度较高的特征肽段,两次的RT是51.90、51.95 min,信号强度是6.77×10~5、7.42×10~5。结论 Self-owned胰蛋白酶拥有高催化活性,自制的二维一体毛细管色谱柱具有较高的分离性能和重复性,将两者联合应用于蛋白质组学技术中,可以显着增高蛋白质数量的检出率。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2018年23期）
蛋白质多肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过在目标蛋白和荧光蛋白等标签蛋白之间引入可引起分子内剪切的多肽是监测蛋白质表达的重要方法.通过将小鼠MYRF的介导其分子内自剪切的ICA结构域插入到目标蛋白和指示蛋白mCherry之间,既实现了对融合蛋白表达的直接观察,同时实现了融合蛋白的高效自剪切,并释放出游离的目标蛋白.实验证明,该可视化蛋白质表达系统可在原核细胞中有效的表达不携带标签序列的目标蛋白.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白质多肽论文参考文献
[1]..年产770吨多肽试剂及蛋白质交联剂项目[J].乙醛醋酸化工.2019
[2].吴惠惠,黄浩,易敏,杨爱芬,杜君卿.一种新的分子内可自剪切多肽介导的可视化原核蛋白质表达系统[J].杭州师范大学学报(自然科学版).2019
[3]..年产770吨多肽试剂及蛋白质交联剂项目[J].乙醛醋酸化工.2019
[4].周思彤,车逸豪,倪连丽,李龙星,袁仕梦.大胡蜂蜂毒中多肽和蛋白质结构和功能的多样性[J].天然产物研究与开发.2019
[5].王梦如,张秀清,王颖,周思彤,杨自忠.颜氏大疣蛛蛛毒中多肽和蛋白质的多样性分析[J].四川动物.2019
[6].孙权.LncRNAUCHL1-AS1参与M/Z6455.5Da蛋白质多肽抑制肾母细胞瘤机制研究及表达谱变化特征[D].郑州大学.2019
[7]..2019第十二届国际蛋白质和多肽大会[J].中国会展(中国会议).2019
[8].夏蓉,卞晶晶,陶汇源,程永强,曾汇娟.花生醋浸过程中蛋白质、多肽含量变化及其抗氧化性的研究[J].中国调味品.2019
[9].杨彬,高文远,张艳军.基于转录组学-蛋白质组学-多肽组学整合关联分析策略的动物药蛋白多肽类成分研究思路及方法[J].中草药.2019
[10].刘宝阳,张磊,范志娟,田亚琼,刘树业.蛋白质多肽酶解及分离新技术的改进[J].检验医学与临床.2018
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