论文摘要
前言前列腺癌（prostatic carcinoma，PC）是男性常见的恶性肿瘤之一，死亡率高。在美国发病率位居恶性肿瘤之首，死亡率位居第二。近年来，我国前列腺癌的发病率也呈逐年上升的趋势，并且发病年龄日趋年轻化，对此疾病的早期诊断和治疗备受瞩目。Polo-like激酶（PLKs）属于丝氨酸／苏氨酸家族的成员，因含有Polo盒子结构而得名，PLK1是PLKs家族成员中基础研究最多，同时也是对细胞周期调节起重要作用的蛋白激酶之一，因此日益瞩目。国外研究报道PLK1在人类细胞周期有丝分裂过程中各个环节发挥重要作用，在许多恶性肿瘤之中有高表达，并与肿瘤的发生、生物学行为及预后密切相关；阻断PLK1表达可导致体外肿瘤细胞分裂停滞及调亡，有希望成为肿瘤治疗的新靶向。PLK1在泌尿系肿瘤方面的研究较少，国内关于PLK1与前列腺癌的研究目前还无相关报道。本试验采用免疫组化方法检测51例前列腺癌组织中PLK1的表达，探讨PLK1在前列腺癌发生发展中的作用和临床意义。材料和方法一、试验标本收集1996～2006年中国医科大学盛京医院病理科手术切除或前列腺穿刺活检前列腺癌组织石蜡标本51例和前列腺增生组织石蜡标本35例。全部病例术前或穿刺前均未行放、化疗及激素治疗。二、主要试剂兔抗人PLK1多克隆抗体购自德国Merck公司，抗体稀释度为1：100。PV—9000试剂盒、EDTA抗原修复液、DAB显色剂、抗体稀释液均购自北京中山生物有限公司产品。三、试验方法采用免疫组化PV—9000二步法检测PLK1在前列腺癌及良性前列腺增生组织中的表达。四、结果判定方法细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性，不着色为阴性。根据癌细胞染色程度、范围和分布的不同进行判断。阴性（-）：阳性细胞数＜10％；轻度阳性（+）：阳性细胞数10～25％；中度阳性（++）：阳性细胞数26～50％；强阳性（+++）：阳性细胞数＞50％。五、统计学方法采用SPSS 12.0软件进行数据处理，统计方法选用x2检验进行分析。检验水准（P）取双侧0.05。相关分析采用Spearman秩检验。试验结果PLK1在细胞浆中表达，为棕黄色颗粒呈弥漫性分布，细胞核及基质中不表达；在PLK1前列腺癌组织中阳性表达率为78.43％（40／51），而在良性前列腺增生组织中阳性表达率为8.57％（3／35），二组间在统计学上有显著性差异（P＜0.01）。在前列腺癌标本中低分化组和中分化组PLK1的阳性表达率明显高于高分化组，其差异有显著性意义（P＜0.05），低、中分化组间PLK1阳性表达率的差异亦有统计学意义（P＜0.05）。PLK1的阳性表达与2002年AJCC的TNM临床分期密切相关，51例前列腺癌组织中PLK1表达阳性的标本中，A～B期阳性率56.25％（9／16），C～D期阳性率88.57％（31／35），PLK1阳性表达在前列腺癌A+B与C+D分期之间有显著性差异（P＜0.05）。经相关分析显示，PLK1蛋白激酶的阳性表达与患者的年龄、肿瘤的大小均无相关性，与肿瘤的病理分级、临床分期呈正相关，即PLK1的阳性表达随肿瘤的Gleason评分增高、临床分期增高呈升高趋势。结论PLK1在前列腺癌中的表达明显高于良性前列腺增生的表达，提示PLK1的过表达在前列腺癌的发生发展中可能起重要作用；在与前列腺癌的临床病理关系的研究中发现，本研究结果显示PLK1蛋白激酶的表达量与前列腺癌的分化和分期有关，其表达量随病理分化程度的降低而逐渐增高，随临床分期的增加而增强，说明PLK1的表达强度明显影响着肿瘤的分化程度和发展趋势，在一定程度上提示前列腺癌的预后。PLK1在良性前列腺增生组织中的阳性率为8.57％（3／35），其中轻度阳性2例，中度阳性1例，3例病理均为结节样增生，且术前PSA均在4～10ng／ml之间，可能与腺体增长速度过快有关；而PLK1在前列腺癌组织中的阳性率为78.43％（40／51），二组间在统计学上有显著性差异（P＜0.01），因此可以较好的鉴别两者。