生存素基因在肝癌中的表达及基于其突变体的转基因治疗实验研究

论文题目: 生存素基因在肝癌中的表达及基于其突变体的转基因治疗实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 陆艺

导师: 钱海鑫

关键词: 肝癌,生存素,凋亡,定量检测,生存素突变体,基因治疗

文献来源: 苏州大学

发表年度: 2005

论文摘要: 肝癌是最常见恶性肿瘤之一,其恶性程度高、预后差,严重威胁人类健康。以选择性地诱导肿瘤细胞凋亡为目标的凋亡干预技术成为治疗肿瘤的基本策略。生存素(Survivin)是凋亡抑制蛋白(IAP)家族新发现的成员,因其独特的结构、特殊的组织分布和明显的抗凋亡作用成为目前人类IAP家族中研究最热门的一个基因。目前,Survivin在肝癌的发生过程中的作用机制尚未完全明确,关于Survivin和肝癌关系的研究报道不多。本课题研究旨在了解Survivin在肝癌细胞株和实体瘤中的表达情况,并且通过构建Survivin突变体的转基因真核表达重组体,转染常见人肝癌细胞株,进行体外杀伤实验,以此作为基于Survivin突变体的转基因治疗的初步研究,希望为肝癌的治疗提供一种新的思路。第一部分人肝癌中的生存素表达及其与细胞凋亡关系的实验研究目的:探索实时定量PCR的使用方法,并检测人肝癌细胞株和肝癌组织中Survivin基因的表达情况和细胞凋亡情况,并分析Survivin表达与肝癌细胞凋亡的关系。方法:运用DNA结合SYB GreenⅠ染色法实时定量检测人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721以及36例手术切除标本的人肝癌组织及其对应癌旁组织的Survivin的表达;用流式细胞术检测肝癌细胞株的细胞凋亡,用TUNEL法检测肝癌组织、癌旁组织中的细胞凋亡;统计分析人肝癌组织和癌旁组织中Survivin的表达的差异,分析肝癌细胞株和人肝癌组织中Survivin表达与细胞凋亡的关系。结果:肝癌细胞株HepG2和SMMC7721的自然凋亡率分别为5.46%±0.97%和5.88%±0.77%,两者无显著差异(P>0.05),两细胞株Survivin/β-actin值分别为11.05±2.36和12021±3.11,无显著差异(P>0.05);肿瘤组织Survivin/β-actin值显著高于相应癌旁组织(P<0.001);肿瘤组织的Survivin表达和癌旁组织的Survivin表达在不同性别、不同年龄、不同肿瘤大小、门脉有无

论文目录:

前言

参考文献

第一部分人肝癌中的生存素表达及其与细胞凋亡关系的实验研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分生存素负显性突变体转染人肝癌细胞株及其调节细胞凋亡和有丝分裂的实验研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

全文总结

综述1.实时定量PCR技术

综述2.SURVIVIN研究进展

附录1.研究生期间已发表的论文题录

附录2.主要缩略词表

致谢

发布时间: 2006-03-24

参考文献

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生存素基因在肝癌中的表达及基于其突变体的转基因治疗实验研究

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