野生二粒小麦活性1Ay基因向普通小麦转移的动态变化研究

论文摘要

本研究通过SDS-PAGE对来自以色列的野生二粒小麦（Triticum dicoccoides,2n=4x=28,AABB）高分子谷蛋白亚基（HMW-GS）检测发现,在133份材料中有55份（41.35%）表达1Ay亚基。鉴于1Ay亚基在普通小麦（Triticum aestivum L., 2n=6x=42,AABBDD）中不表达,而在野生二粒小麦中表达的普遍性,以普通小麦川农16为母本与野生二粒小麦杂交,应用分子生物学与细胞遗传学相结合的方法进行研究,所得结果如下: 1.对杂交F3代单株收获的种子进行 SDS-PAGE分析,发现其HMW-GS带型丰富,出现了双亲都没有的带型,有的条带数甚至多于正常的6条;并检测到HMW-GS带型一致不分离的株系。 2.对双亲川农16和野生二粒小麦D1及其杂交F3代HMW-GS不分离的有1Ay表达和无1Ay表达的基因组DNA进行PCR扩增,电泳结果显示,野生二粒小麦HMW-GS中1Ay亚基相对应的条带大约为1800-1900bp,此带纹存亲本川农16及其与D1杂交F3代（2n=42）植株所产生的籽粒中也存在。 3.将野生二粒小麦D1的核苷酸序列1964（TaKaRa测序号）测定结果与已知1Ay型亚基氨基酸序列,进行信号肽、N端、C端的同源性比较,结果1964与1Ay型亚基氨基酸序列具有高度一致性,其N端具有典型的y型高分子量麦谷蛋白亚基所具有的5个半胱氨酸残基,因此确定1964为1Ay型亚基。 4.对于有1Ay表达的和没有1Ay的HMW-GS不分离的株系进行根尖细胞有

论文目录

• 1. 文献综述
• 1.1 野生二粒小麦的地理分布及其生物学性状
• 1.2 野生二粒小麦优良农艺性状的研究与利用
• 1.3 小麦高分子谷蛋白亚基的遗传基础
• 1.4 高分子谷蛋白1Ay基因的表达及其优异的品质特性
• 1.5 本研究的目的
• 2. 材料与方法
• 2.1 供试材料
• 2.2 研究方法
• 3代的SDS-PAGE分析'>2.2.1 川农16与野生二粒小麦杂交F₃代的SDS-PAGE分析
• 2.2.2 基因组DNA提取及PCR扩增
• 2.2.3 PCR产物T-载体克隆
• 2.2.4 阳性克隆PCR扩菌筛选
• 2.2.5 根尖细胞有丝分裂染色体观察
• 3. 结果与分析
• 3.1 SDS-PAGE分析揭示的1Ay在T.dicoccoides中的亚基分布情况
• 3代1Ay亚基的分布'>3.2 普通小麦品种川农16与野生二粒小麦杂交F₃代1Ay亚基的分布
• 3.3 倍性水平与1Ay亚基的关系
• 3.4 野生二粒小麦1Ay亚基在DNA水平上的证据
• 3.4.1 PCR扩增
• 3.4.2 序列测定
• 4. 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间发表论文情况