论文摘要
目的：1.利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）分析宫颈上皮内瘤变（CN）Ⅲ期、早期宫颈癌患者及健康人的血清蛋白质谱,筛选潜在的特异性肿瘤标志物,探讨其临床意义。2.利用双向凝胶电泳（2-DE）及基质辅助激光解析离子化/飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术筛选、鉴定宫颈癌Hela细胞放射前后差异表达的蛋白质,从蛋白质组水平分析宫颈癌放射治疗的分子机制。方法：1.检测宫颈上皮内瘤变及宫颈癌早期患者血清蛋白质谱的表达（1）样品收集：CINⅢ期患者23例,早期宫颈鳞癌患者34例,正常对照35例。采集测试对象静脉血,4℃离心后取上清,-80℃冰箱保存。（2）用SELDI-TOF-MS结合弱阳离子交换（WCX）芯片,检测血清蛋白质峰,在Ciphergen Software 3.1.1软件中设定读片程序,读取芯片数据并绘制出蛋白质质谱图。利用Biomark Wizard软件分析差异蛋白峰,在Swiss蛋白数据库中搜索鉴定差异蛋白。（3）受试者工作（ROC）曲线评价差异蛋白峰的应用价值。2.宫颈癌Hela细胞放射前后的蛋白质组学分析对Hela细胞进行剂量为6Gy的6MV-X线照射后,应用2-DE技术对Hela细胞放射前、后两组细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱；采用PDQuest （8.0.1）软件进行匹配和差异分析,寻找两组的表达差异蛋白质点。从凝胶中切取差异蛋白点进行胶内原位酶解,应用MALDI-TOF-MS对酶解产物进行分析,获取肽质量指纹图谱,在数据库中搜索鉴定差异蛋白质。结果：1.在所有检测标本中共测得76个蛋白质质谱峰值,在质荷比（m/z） 2000-20000Da范围内,宫颈癌患者的血清中筛选出与正常人血清有统计学意义的差异蛋白10个,其中5个高表达：m/z分别为2951.5、3882.4、5310.3、7757.1、15910.4Da；5个低表达：m/z分别为3824.6、4211.8、4512.4、4786.4、5565.3Da。应用ROC曲线分析,评估10个差异蛋白对宫颈癌具有中等诊断价值：灵敏度为64.7%～97.1%,特异度为79.4%～94.3%。在CINⅢ中升高,但在宫颈癌下降的差异蛋白有3个：m/z分别为4584.9、5897.5、9176.6Da。2.建立了分辨率高、重复性好的放射前后的Hela细胞双向凝胶电泳图谱。放射组蛋白斑点数为1248±67个,未放射组蛋白点数为1207±78个,组间平均匹配率为86.8%。质谱分析成功鉴定10个差异表达蛋白,其中6个蛋白质在放射组高表达,分别是：角蛋白10、角蛋白18、膜联蛋、核糖体蛋白、La核糖核蛋白、精氨酸脱氢酶；4个蛋白质在放射组低表达,分别是：2种钙网蛋白、磷酸甘油酸变位酶、琥珀酸脱氢酶。结论：1.正常人、CINⅢ期及宫颈癌早期组血清中存在差异蛋白质,SELDI-TOF-MS联合WCX芯片能在宫颈癌患者和健康人群血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白,其有助于宫颈癌的筛查、早期诊断。2.放射治疗可能通过改变多种蛋白的表达,参与细胞凋亡、细胞周期调控、信号转导等过程,影响细胞的增殖、分化。进一步弄清信号转导过程和相互关系,不仅对从蛋白质组水平了解宫颈癌放射治疗的分子机制有重要意义,而且为从分子水平治疗宫颈癌提供新思路。
论文目录
相关论文文献
- [1].萝卜硫素对宫颈癌HeLa细胞凋亡及放射敏感性的影响[J]. 中国药业 2020(15)
- [2].盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞外泌体的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版) 2020(04)
- [3].卷曲乳酸杆菌对Hela细胞的粘附研究[J]. 中国微生态学杂志 2017(01)
- [4].索拉非尼对Hela细胞增殖、迁移和侵袭的影响[J]. 现代肿瘤医学 2017(12)
- [5].红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡及侵袭作用机制研究[J]. 长治医学院学报 2017(03)
- [6].新藤黄酸对HeLa细胞的化疗增敏作用及其可能机制探讨[J]. 中药材 2015(12)
- [7].姜黄素对HeLa细胞增殖、迁移及miRNA表达谱的影响[J]. 中国妇幼保健 2015(26)
- [8].黔产商陆醇提物对HeLa细胞增殖的影响[J]. 科学技术创新 2020(35)
- [9].卡莫氟对人子宫颈癌细胞系HeLa增殖及侵袭的影响及机制[J]. 解剖学报 2019(06)
- [10].脑心肌炎病毒感染Hela细胞的内吞途径[J]. 西北农业学报 2020(02)
- [11].维药洋甘菊体外抑制宫颈癌Hela细胞增殖作用研究[J]. 云南中医中药杂志 2016(05)
- [12].核仁素表达下调对宫颈癌细胞Hela生物学行为的影响[J]. 山东大学学报(医学版) 2013(11)
- [13].黄芩素对子宫颈癌Hela细胞表皮生长因子受体表达的影响[J]. 中药新药与临床药理 2014(02)
- [14].siRNA干扰人核糖核酸酶抑制因子在HeLa细胞中的表达鉴定[J]. 中国医药导报 2014(25)
- [15].迷迭香精油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究[J]. 中山大学学报(医学科学版) 2008(S1)
- [16].喷他脒对人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖和诱导凋亡的作用[J]. 军医进修学院学报 2008(02)
- [17].松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究[J]. 热带医学杂志 2008(07)
- [18].珊瑚姜油对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响[J]. 医药导报 2017(01)
- [19].灰树花多糖协同顺铂对HeLa细胞凋亡的影响[J]. 中国老年学杂志 2017(03)
- [20].槲皮素单独及联合放射线对Hela细胞生物学行为的影响[J]. 时珍国医国药 2016(11)
- [21].葛根素抑制人子宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖研究[J]. 贵州医药 2017(03)
- [22].牛蒡子和毛头牛蒡子体外抑制Hela细胞增殖的比较研究[J]. 新疆中医药 2017(03)
- [23].红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和VEGF表达的影响[J]. 中国实验方剂学杂志 2016(08)
- [24].氧化苦参碱对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用[J]. 西安交通大学学报(医学版) 2016(03)
- [25].培美曲塞联合β-榄香烯对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响[J]. 医学研究生学报 2015(01)
- [26].黄芪注射液联合顺铂对HeLa细胞生长的影响[J]. 新乡医学院学报 2013(03)
- [27].葛根素对HeLa细胞生长的抑制作用机制[J]. 中国老年学杂志 2012(09)
- [28].虫草素和虫草素/双层氢氧化物纳米复合物对HeLa细胞生长抑制[J]. 福建师范大学学报(自然科学版) 2012(05)
- [29].那可丁对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及机制探讨[J]. 华中科技大学学报(医学版) 2011(03)
- [30].艾迪注射液对氯化钴诱导的Hela细胞缺氧诱导因子-1蛋白稳定及转录活性的影响研究[J]. 北京中医药大学学报 2008(01)