论文摘要
背景:近年来,儿童肥胖症的患病率逐渐上升。它不但影响儿童的身心发育,而且是日后成年期2型糖尿病和心脑血管疾病的重要危险因素。瘦素（leptin）具有抑制食欲,增加能量消耗,减少体脂的作用。其作用是通过受体及以Janus激酶2（JAK2）-信号转导与转录激活子3（STAT3）通路为主的信号转导来介导的。然而绝大多数肥胖者存在瘦素抵抗（leptin resistance）现象,使机体对瘦素反应减弱或无反应。研究表明,在瘦素JAK2-STAT3信号转导通路中,细胞因子信号转导抑制剂3（SOCS3）发挥着反馈性抑制作用。SOCS3表达上调可能参与了瘦素抵抗和肥胖症的形成。近几年,RNA干扰（RNAi）技术被广泛应用于许多疾病治疗的前期研究阶段,通过RNAi下调SOCS3基因表达有可能使JAK2-STAT3信号转导通路活化,瘦素敏感性增加,从而有可能成为治疗瘦素抵抗及肥胖症的一种有效手段。目的:模拟儿童,以生后5周（相当于幼年期）的SD大鼠为实验动物。通过RNA干扰技术建立SOCS3表达下调模型,然后予以普通饲料或高脂饲料喂养,通过观察大鼠体重变化,血清瘦素水平,下丘脑STAT3磷酸化水平及STAT3结合DNA活性,探讨RNA干扰引起的下丘脑SOCS3表达下调是否使JAK2-STAT3信号转导通路活化,从而对瘦素抵抗和肥胖症有治疗作用。方法:5周龄、健康、雄性SD大鼠48只随机分为3组:control lenti+普通饮食组（control lenti+standard chow,CS）（n=15）,即下丘脑注射control lenti,普通饲料喂养;control lenti+高脂饮食组（control lenti+high-fat diet,CHF）（n=15）,即下丘脑注射control lenti,高脂饲料喂养;SOCS3 lenti+高脂饮食组（SOCS3 lenti+high-fat diet,SHF）（n=18）,即下丘脑注射SOCS3 lenti,高脂饲料喂养。每周测体重1次。饲养8周末,采血并分离血清,采用放射免疫法测定血清瘦素含量;提取下丘脑总蛋白与核蛋白,采用western blot方法检测下丘脑总蛋白中STAT3磷酸化水平;采用EMSA方法检测下丘脑核蛋白中STAT3结合DNA活性水平。结果:1.大鼠体重比较:SHF组体重低于CHF组（P<0.01）,高于CS组（P<0.05）。2.大鼠血清瘦素浓度比较: SHF组血清瘦素浓度低于CHF组（P<0.01）,与CS组比较无显著性差异（P>0.05）。3.大鼠下丘脑STAT3磷酸化水平比较:SHF组高于CHF组（P<0.01）,低于CS组（P<0.01）。4.大鼠下丘脑STAT3结合DNA活性水平比较:SHF组高于CHF组（P<0.01）,低于CS组（P<0.01）。5.SHF组大鼠血清瘦素水平、下丘脑STAT3磷酸化水平以及STAT3结合DNA活性水平的关联性分析:瘦素水平与STAT3磷酸化水平及STAT3结合DNA活性水平均呈显著负相关,其相关系数R分别为-0.682, -0.660（P<0.05）;STAT3磷酸化水平与STAT3结合DNA活性水平呈显著正相关,其相关系数R为0.785（P<0.01）。结论:1.高脂饮食诱导下丘脑SOCS3基因表达上调,使下丘脑STAT3磷酸化水平及STAT3结合DNA活性水平降低,瘦素JAK2-STAT3信号转导通路受抑制,出现瘦素抵抗和肥胖症。2.下调SOCS3基因表达可以提高下丘脑STAT3磷酸化水平及STAT3结合DNA活性水平,瘦素JAK2-STAT3信号转导通路活化,瘦素敏感性增加。3.下调SOCS3基因表达可以降低体重及血清瘦素水平,对瘦素抵抗和肥胖症可能有治疗作用。