论文摘要
目的：研究Wnt5a对荷脂细胞中胆固醇蓄积的影响，以及初步的机制探讨方法：用不同浓度的ox-LDL孵育Raw264.7以及VMSC不同时间，形成荷脂细胞模型，Western bloting检测荷脂细胞中Wnt5a表达的时效和量效改变。随后，加入rWnt5a瞬时高表达Wnt5a，以及用siRNA干扰Wnt5a的表达，油红O观察细胞荷脂情况，HPLC检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯的含量。进一步采用Western bloting检测Wnt5a、Caveolin-1、ABCAI等胆固醇转运相关蛋白的表达变化。同时采用逆转录病毒感染系统建立Wnt5a稳定高表达和敲低的Raw264.7细胞株。结果：随着ox-LDL浓度的增加，Wnt5a的表达呈浓度依赖性增加；同时随着ox-LDL处理的时间延长，Wnt5a的表达也呈时间依赖性增加。当Wnt5a siRNA和ox-LDL处理细胞后，细胞中脂滴增加，细胞内TC，FC含量较单用ox-LDL处理组有明显增加（P<0.05）；但是采用rWnt5a和ox-LDL处理细胞后，细胞中脂滴减少，细胞内TC，FC含量较单用ox-LDL处理组有明显减少（P<0.05）。Wnt5a siRNA和ox-LDL处理组中Caveolin-1和ABCAI的蛋白表达明显减少；而rWnt5a和ox-LDL处理组中Caveolin-1和ABCAI的蛋白表达增加。结论：1、Raw264.7以及VMSC细胞中，Wnt5a的蛋白表达随ox-LDL的处理浓度和时间呈依赖性增加2、瞬时高表达Wnt5a可显著降低细胞内脂滴的蓄积以及胆固醇的含量，而瞬时敲低Wnt5a的效应相反；3、Wnt5a可通过调控胆固醇转运相关蛋白Caveolin-1、ABCAI减少荷脂细胞中胆固醇的蓄积。
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