BMSCs复合PLGA治疗Kienbock病的试验研究

论文摘要

目的：探讨BMSCs体外培养,与PLGA复合后对Kienbock病引起的腕关节紊乱和腕关节塌陷的治疗效果。以明确自体BMSCs组织工程构建的结构对于腕骨重建是否有效。方法：采用骨髓穿刺,全骨髓培养法获取新西兰大白兔的BMSCs。取第三代骨髓间充质干细胞以1×106/ml密度复合到PLGA（聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物）支架上于成软骨培养液中进行体外培养21天,并取材进行组织学和免疫组织化学分析。将18只健康成年新西兰大白兔（36个腕关节）,雌雄不分,体重2.5-3.0kg左右,随机分为二组,均行月骨全切术。第一组大白兔行月骨全切术后植入PLGA。第二组动物月骨全切后移植有BMSCs的PLGA支架,这种复合了细胞的支架是在成软骨培养液中预培养过21天后的结构。二组动物分别于术后6周和12周分为两个阶段取材,并行放射学和组织学分析。结果：BMSCs复合PLGA体外培养21天后,可见大量的甲苯胺蓝基质异染现象,Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色阳性。6周、12周时取材行组织学分析发现：第一组动物中,修复空间只是充填着纤维组织。第二组动物在第6周时,月骨切除区修复组织细胞形态符合新生的软骨细胞,并且细胞周围基质可见明显的甲苯胺蓝异染现象,并可见部分区域软骨内成骨生成散在的小的骨组织；12周时,通过软骨内成骨,可见大量的编织骨形成及血管形成。放射学检查示：在第一组动物中两时间段均无明显的放射学骨化表现,第二组家兔第12周时可见明显的放射学骨化表现。第6周时,第一组动物观察到明显的腕骨塌陷（腕掌指数减小4.9%±1.9%,P<0.05）。第二组动物腕骨高度基本保持不变。12周时,第一组动物腕关节进一步塌陷,第二组动物腕骨高度未见明显变化。结论：BMSCs复合PLGA支架上,并于成软骨培养液中进行体外培养21天后,可表达软骨表型。移植于月骨缺损处,通过软骨内成骨过程,可生成有月骨替代功能的组织,能够防止腕关节的塌陷,较单纯支架移植效果为好。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 实验研究
• 1. 实验材料、仪器设备及试剂
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂
• 1.3 主要实验仪器及设备
• 2. 实验方法
• 2.1 细胞复合支架的体外培养
• 2.2 动物实验
• 3 统计学处理
• 结果
• 1. 细胞复合支架结构的体外培养
• 1.1 骨髓间充质干细胞培养结果
• 1.2 体外培养的细胞—支架复合物分析
• 2. BMSCs复合PLGA植入兔体内修复月骨
• 2.1 放射学分析
• 2.2 大体观察及组织学分析
• 3 统计学处理结果
• 讨论
• 1、KIENBOCK病的研究进展
• 2、腕掌指数
• 3、软骨组织工程
• 3.1 骨髓间充质干细胞（BMSCs）
• 3.2. 细胞因子
• 3.3. 组织工程支架
• 3.4. 组织构建与软骨内成骨
• 4、存在问题及展望
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 中文详细摘要