论文摘要
红霉素对肺气肿大鼠α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子-β1表达的影响前言慢性阻塞性肺疾病是以不完全可逆气流受限为特征并呈进行性发展的肺部非特异性炎症性疾病。气道重构是COPD主要病理特点之一，在气道炎症与肺功能之间扮演着“桥接”作用，在气流受限中有重要的角色。气道平滑肌细胞作为结构细胞，以往一直被认为是炎症过程的被动靶细胞，近年的研究证实，ASMC也是主动参与炎症过程的效应细胞。α-平滑肌肌动蛋白是平滑肌细胞和肌成纤维细胞的主要标志物，可反映平滑肌增殖及其表型改变。转化生长因子β1是刺激成纤维细胞增生和分泌胶原的主要生长因子，主要来源于气道上皮细胞、抗原激活的T细胞、脂多糖激活的单核细胞、B细胞、血小板等。大环内酯类药物红霉素除抗生素作用外，还具有抗炎、免疫调节，抗纤维化等作用，且对气道慢性炎症弥漫性泛细支气管炎具有肯定的疗效。本实验通过应用吸烟加脂多糖气道内滴入复制大鼠慢性阻塞性肺疾病模型，观察红霉素对小气道α-平滑肌肌动蛋白和TGF-β1表达的影响，了解其治疗作用和可能的机制。材料与方法1、动物模型Wistar大鼠，雄性36只，12周龄，体重220±20g，随机分为三组。正常对照组（A组）6只：标准饲养4周，不做任何干预；模型组（B组）15只：每天在0.25L有机玻璃舱内熏蓝翎牌香烟1h（10支），共熏烟4周，并在第1、14天气管内注入脂多糖0.2ml（浓度200μg／200μl）；红霉素干预组（C组）15只：大鼠于气管内注入LPS前3天开始用红霉素灌胃治疗（50mg／kg·d），直至实验结束，余同B组。2、实验方法造模完成后处死各组动物，肺组织病理标本行HE染色观察，Verhoeff弹性纤维染色和Masson染色，形态学计量测定，α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1的免疫组织化学染色检测，指标以SPSS13.0行统计学分析。结果1、病理观察A组大鼠小气道和肺组织结构正常，B组大鼠镜下可见小气道炎症及肺气肿，C组炎症和肺气肿减轻。2、形态计量指标B组大鼠平均内衬间隔（44.93±4.7）μm，平均肺泡数（154.5±43.7）个／mm2与A组（28.52±3.78）μm、（361.8±72.2）个／mm2相比均有明显差异（P＜0.05），C组平均肺泡数（239.6±63.9）个／mm2与A组也有显著性差异（P＜0.05）；B组细支气管中膜肌层增厚，中膜肌层面积占管壁总面积（9.67±1.63）％与A组（6.42±1.43）％比较有显著差异（P＜0.05）；C组管壁增厚不明显，MT％、MA％分别为（7.75±1.31）％、（14.7±4.1）％，与B组（9.67±1.63）％、（19.6±3.9）％比较均有明显差异（P＜0.05）。3、免疫组化各组大鼠小气道上皮细胞胞浆内均可见TGF-β1表达，此外B组、C组气道平滑肌细胞、肺泡巨嗜细胞都有强度偏低表达。A组大鼠表达TGF-β1较弱，B组（0.369±0.071）和C组（0.314±0.058）小气道上皮细胞阳性表达增强，与A组（0.174±0.023）比较差异有显著意义（P＜0.05）；B组、C组大鼠气道α-SMA表达相对含量（0.434±0.043）、（0.353±0.035）较A组（0.261±0.024）有明显增强，C组与B组比较α-SMA表达有明显下降（P＜0.05）。4、相关分析α-SMA在气道平滑肌中的表达与气道上皮细胞中TGF-β1表达成正相关，相关系数r=0.631；气道管壁厚度与气管外径比值（MT％）与上皮细胞TGF-β1表达成正相关，相关系数r=0.477；气道管壁厚度与气管外径比值（MT％）与平滑肌细胞α-SMA表达成正相关，相关系数r=0.781，P均＜0.01。结论COPD大鼠气道上皮细胞TGF-β1和平滑肌细胞α-SMA表达水平增加并呈正相关，提示TGF-β1参与气道平滑肌细胞增殖。红霉素能使气道炎症减轻，下调上皮细胞TGF-β1和平滑肌细胞α-SMA的表达，改善气道重构。