论文摘要
目的: 建立一种新型的异基因造血干细胞移植后嵌合体定量检测的方法――SNP联合实时荧光定量PCR技术的检测体系,初步探讨该技术在检测移植后植入状态中的应用。 方法: 筛选了分别来自于6条不同染色体的8个特异性SNP位点,合成引物,随机抽取10例无关健康人模拟供受者,采用实时荧光定量PCR技术进行混合DNA系列稀释实验,用以评价本方案的可行性和准确性。最后分别对3例异基因造血干细胞移植后转归病例的序列血样进行动态监测。 结果: 供受者间至少有2个可以区分彼此的信息位点,扩增产物中供受者嵌合百分比的对数同实时荧光定量PCR检测的Ct值显著直线相关,线性相关系数 r>0.98,敏感性<0.5%,并具有可重复性。同期临床病例采用实时荧光定量SNP- PCR定量分析结果与复合扩增荧光标记STR-PCR检测结果进行对照,分析结果基本一致（P>0.05）。 结论: 实时荧光定量SNP-PCR检测方法从技术上克服了目前所采用的复合荧光标记STR-PCR检测技术的缺点,整体操作简便,经济省时,且具有更灵敏、更准确的优点,是异基因造血干细胞移植后嵌合体检测的更为有效的新方法。
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