补脾益气方药对脾虚哮喘大鼠肺组织中TLR4、IKKβ表达的影响

论文摘要

目的:本课题通过研究脾虚哮喘大鼠气道炎症与肺支气管组织中TLR4,IKK-β表达的改变,探讨TLR4,IKK-β的表达对哮喘气道炎症的影响,探讨补脾益气方药对TLR4,IKK-β的调控作用及对IL-8含量的影响,进一步揭示哮喘发生的分子机制、脾虚对哮喘的影响和补脾益气方药治疗哮喘的作用机制。材料与方法:健康雄性Wistar大鼠84只,随机分成7组:正常对照组、哮喘模型组、脾虚哮喘模型组、中药治疗哮喘组、中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组。脾虚组（脾虚哮喘模型组、中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组）首先采用疲劳过度、苦寒泻下和饮食不节等综合因素作用建立脾虚模型,共需10天。然后将脾虚组同哮喘组（哮喘模型组、中药治疗哮喘组、西药治疗哮喘组）采用卵蛋白致敏与激发的方法建立哮喘模型。在实验的第11天脾虚模型建立成功后,中药治疗组（中药治疗哮喘组和中药治疗脾虚哮喘组）给予补脾益气方药灌胃治疗;西医治疗组（西药治疗哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组）给予地塞米松灌胃治疗,共21天。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测大鼠肺组织TLR4和IKKβ的mRNA表达水平;采用免疫组化检测大鼠肺组织TLR4和IKKβ的蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8的含量。结果:1.肺组织中IKKβ的mRNA表达水平显示:与对照组相比,脾虚哮喘模型组与哮喘模型组大鼠肺组织中IKKβmRNA的表达均显著升高（P<0.01）,而脾虚哮喘模型组明显高于哮喘模型组（P<0.01）;与脾虚哮喘模型组相比,中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组大鼠肺组织中IKKβmRNA的表达均显著降低（P<0.01）,两治疗组相比无差异;与哮喘模型组相比,中药治疗哮喘组、西药治疗哮喘组大鼠肺组织中IKKβmRNA的表达均显著降低（P<0.01）,两治疗组相比无差异;2.肺组织中IKKβ蛋白表达水平显示:与对照组相比,脾虚哮喘模型组与哮喘模型组大鼠肺组织中IKKβ蛋白的表达均显著升高（P<0.01）,而脾虚哮喘模型组明显高于哮喘模型组（P<0.05）;与脾虚哮喘模型组相比,中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组大鼠肺组织中IKKβ蛋白的表达均显著降低（P<0.01）,而中药治疗组明显低于西药治疗组（P<0.01）;与哮喘模型组相比,中药治疗哮喘组大鼠肺组织中IKKβ蛋白的表达均显著降低（P<0.01）,西药治疗哮喘组也降低（P<0.05）,而中药治疗明显低于西药治疗组（P<0.01）;3.肺组织中TLR4的mRNA表达水平显示:与对照组相比,脾虚哮喘模型组与哮喘模型组大鼠肺组织中TLR4mRNA的表达均显著升高（P<0.01）,而脾虚哮喘模型组明显高于哮喘模型组（P<0.05）;与脾虚哮喘模型组相比,中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组大鼠肺组织中TLR4mRNA的表达均显著降低（P<0.01）,两治疗组间相比无差异;与哮喘模型组相比,中药治疗哮喘组、西药治疗哮喘组大鼠肺组织中TLR4mRNA的表达均显著降低（P<0.05）,两治疗组间相比无差异;4.肺组织中TLR4的蛋白表达水平显示:与对照组相比,脾虚哮喘模型组与哮喘模型组大鼠肺组织中TLR4蛋白的表达均显著升高（P<0.01）,而脾虚哮喘模型组明显高于哮喘模型组（P<0.01）;与脾虚哮喘模型组相比,中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组大鼠肺组织中TLR4蛋白的表达均显著降低（P<0.01）,而中药治疗组明显低于西药治疗组（P<0.01）;与哮喘模型组相比,中药治疗哮喘组、西药治疗哮喘组大鼠肺组织中TLR4mRNA的表达均显著降低（P<0.01）,两治疗组间相比无差异;5.肺泡灌洗液中IL-8含量的显示:与对照组相比,脾虚哮喘模型组与哮喘模型组大鼠肺泡灌洗液中IL-8的含量均显著升高（P<0.01）,而脾虚哮喘模型组明显高于哮喘模型组（P<0.05）;与脾虚哮喘模型组相比,中药治疗脾虚哮喘组、西药治疗脾虚哮喘组大鼠肺泡灌洗液中IL-8的含量均显著降低（P<0.01）,两治疗组间相比无差异;与哮喘模型组相比,中药治疗哮喘组、西药治疗哮喘组大鼠肺泡灌洗液中IL-8的含量均显著降低（P<0.01）,而中药治疗明显低于西药治疗组（P<0.05）。结论:1.脾虚使哮喘模型大鼠肺组织中TLR4、IKKβ的mRNA和蛋白表达水平升高,使哮喘模型大鼠肺泡灌洗液中IL-8的含量升高。2.脾虚哮喘和哮喘时,大鼠肺组织中TLR4和IKKβ的表达呈正相关,TLR4和IKKβ的表达与BALF中IL-8的含量呈正相关,补脾益气方药和地塞米松可以通过降低TLR4、IKKβ的表达进而减少IL-8的含量。3.中药补脾益气方药和西药地塞米松均可以不同程度的降低脾虚哮喘模型组和哮喘模型组大鼠肺组织中TLR4、IKKβ的mRNA和蛋白表达水平,降低大鼠肺泡灌洗液中IL-8的含量。

论文目录

• 中英文名词术语对照
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 文献综述
• 1 TLRs
• 2 TLRs 的分类及其配体
• 3 TLRs 的信号转导途径
• 4 TLRs 与哮喘的病因
• 5 TLRs 与哮喘的病机
• 6 TLRs 与哮喘气道炎症
• 7 TLRs 与哮喘气道的重塑
• 材料
• 方法
• 结果
• 分析讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历