论文摘要
目的运用彩色多普勒血流显像（ Color? Doppler? flow?imaging ,CDFI）评价兔肾缺血再灌注（Ischemia / Reperfusion ,I/R）后兔肾动脉血流动力学变化,并探讨其与兔肾组织肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factorα,TNF-α）表达变化的相关性,寻求一种无创、及时的评价肾缺血再灌注损伤的发生的可行方法。方法48只大白兔,不分雌雄,随机分为假手术对照组、缺血再灌注（I/R）组。假手术对照组及缺血再灌注组又按缺血后再灌注时间长短的不同分为2 h、8 h、24 h 3个亚组,每个亚组8只。每组大白兔以2%戊巴比妥钠1.5ml/kg沿耳缘静脉注射进行麻醉。麻醉成功后,左肾区脱毛处理,尽量暴露皮肤。假手术对照组单纯切除右肾,保留左肾,三个亚组保留左肾时间点分别为2h、8h、24h;缺血再灌注组切除右肾,用动脉夹夹闭左肾动静脉,造成左肾缺血1h后恢复灌注,三个亚组恢复灌注的时间点不同,分别为再灌注2h、8h、24h。应用CDFI分别监测各个亚组大白兔左肾门部肾主动脉（master renal artery, MRA）、肾窦部段动脉（segment renal artery, SRA）、肾椎体两侧缘叶间动脉（interlobar arterial renal, IRA）这三级肾动脉的血流动力学变化,测定上述动脉的收缩期峰值流速（Peak systolic velocity ,Vmax）、舒张末期流速（End-diastolic velocity ,Vd）、搏动指数（Pulsatility index, PI）和阻力指数（Resistance index ,RI）。各组完成左肾动脉血流动力学测量后,在低温条件下切除兔左肾,取部分兔左肾组织待测。利用免疫组化方法（SABC法）测定兔肾组织中TNF-α的平均光密度值（Optical density, OD）,统计学方法为组间、组内参数的比较采用方差齐性检验,单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义;将I/R组各个时间点的TNF-α的OD值与各级兔肾动脉的血流动力学作相关性分析,采用直线相关与直线回归分析,计算相关系数r值及回归方程,以P<0.05为差异有统计学意义。结果（1）血流动力学改变:①假手术2h亚组:肾主动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为43.20±5.65 （ cm/s ）、23.85±4.37 （ cm/s ）、0.58±0.08、0.42±0.06 ;段动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为28.98±7.56（cm/s）、16.91±4.32 （cm/s）、0.50±0.05、0.38±0.08;叶间动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为19.43±5.89（cm/s）、12.86±3.14（cm/s）、0.47±0.13、0.35±0.07;②假手术8h亚组:肾主动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为41.74±7.20（ cm/s ）、22.97±5.14（cm/s）、0.57±0.10、0.41±0.10;段动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为27.12±6.81 （ cm/s ）、16.22±5.73 （ cm/s ）、0.49±0.07、0.37±0.10;叶间动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为18.34±5.17（cm/s）、12.62±4.62（cm/s）、0.46±0.11、0.35±0.11;③假手术24h亚组:肾主动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为42.98±5.44（cm/s）、23.58±7.08（cm/s）、0.57±0.11、0.42±0.08;段动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为28.65±7.43（ cm/s ）、17.56±6.13（cm/s）、0.49±0.10、0.38±0.06;叶间动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为19.71±3.57（cm/s）、13.32±4.54（cm/s）、0.47±0.09、0.35±0.08;④缺血再灌注2h亚组:肾主动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为46.23±4.53（cm/s）、24.36±6.19（cm/s）、0.67±0.18、0.47±0.14 ;段动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为30.40±3.15（cm/s）、18.52±2.86（cm/s）、0.61±0.10、0.44±0.09;叶间动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为20.65±3.83（ cm/s ）、11.92±3.27（cm/s）、0.59±0.08、0.40±0.07;⑤缺血再灌注8h亚组:肾主动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为48.17±7.05（cm/s）、24.88±6.79（cm/s）、0.75±0.19、0.49±0.08;段动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为34.25±6.18 （ cm/s ）、18.36±4.16 （ cm/s ）、0.72±0.16、0.48±0.07;叶间动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为23.26±5.25（cm/s）、11.69±3.84（cm/s）、0.70±0.18、0.45±0.10。⑥缺血再灌注24h亚组,肾主动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为55.11±4.34 （cm/s）、20.60±7.87（cm/s）、1.09±0.54、0.63±0.13;段动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为37.71±3.53（ cm/s ）、17.67±2.99（cm/s）、0.97±0.14、0.57±0.11;叶间动脉Vmax、Vd、PI、RI分别为28.66±5.81 （ cm/s ）、9.73±2.97 （ cm/s ）、0.89±0.32、0.54±0.09;与假手术对照组比较,I/R 2 h亚组收缩期峰值流速Vmax、Vd、PI和RI均无明显改变,I/R 8 h亚组兔肾SRA及IRA出现RI增大（P均<0.05）,I/R 24 h亚组兔肾MRA、SRA和IRA均出现Vmax、PI和RI增大（P均<0.05）。与假手术对照组2h亚组TNF-αOD值（0.1302±0.027）比较,I/R 2h亚组TNF-αOD值（0.1607±0.033）无统计学差异;与对照组8h亚组TNF-αOD值（0.1321±0.030）、对照组24h亚组TNF-αOD值（0.1405±0.028）比较,I/R8h亚组TNF-αOD值（0.1879±0.035）、I/R24h亚组TNF-αOD值（0.2658±0.040）均有统计学差异（P均<0.05）;且24 h内有加重趋势（P<0.05）。缺血再灌注组肾主动脉的Vmax,PI,RI与肾组织TNF-αOD变化呈正相关关系（r=0.714、0.764、0.782,P<0.05）;缺血再灌注组肾段动脉的Vmax,PI,RI与肾组织TNF-αOD变化呈正相关关系（r=0.779、0.811、0.821,P<0.05）;缺血再灌注组肾叶间动脉的Vmax,PI,RI与肾组织TNF-αOD变化呈正相关关系（r=0.833、0.788、0.828,P<0.05）。各亚组Vd与肾组织TNF-α的表达变化均无相关性（P均>0.05）。缺血再灌注组以肾主动脉不同时间点测得的RI作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=1.823x+0.151。缺血再灌注组以肾段动脉的不同时间点测得的RI作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=1.487x+0.193。缺血再灌注组以肾叶间动脉的不同时间点测得的RI作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=1.452x+0.166。缺血再灌注组以肾主动脉不同时间点测得的PI作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=5.007x-0.196。缺血再灌注组以肾段动脉的不同时间点测得的PI作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=4.148x-0.084。缺血再灌注组以肾叶间动脉的不同时间点测得的PI作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=3.272x+0.050。缺血再灌注组以肾主动脉不同时间点测得的Vmax作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x ,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=72.86x+33.23。缺血再灌注组以肾段动脉的不同时间点测得的Vmax作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=71.17x+19.44。缺血再灌注组以肾叶间动脉的不同时间点测得的Vmax作为应变量y,将TNF-αOD值作为自变量x,进行直线回归分析,直线回归方程为:y=81.21x+7.821。结论与假手术对照组比较,缺血再灌注8h后兔肾动脉的RI开始增高,并首先发生在末梢血管;缺血再灌注24h各级兔肾动脉均出现Vmax、PI和RI增大。与假手术对照组比较,缺血再灌注8h后TNF-αOD开始出现增高,且在24h内有逐渐加重的趋势。I/R各亚组兔肾动脉Vmax、PI、RI的变化与兔肾组织中TNF—α的表达两者有很好的相关性。利用CDFI检测缺血再灌注的肾动脉的血流动力学变化是一种无创、及时的评价肾缺血再灌注损伤发生的可行方法。