青藤碱干预肿瘤细胞凋亡的ERK-Bcl-2信号转导机制研究

论文摘要

目的:研究青藤碱干预肿瘤细胞凋亡的信号转导机制。观测不同剂量青藤碱干预肿瘤细胞凋亡的效果。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,分高、中、低3个剂量组,各剂量组加入含不同浓度青藤碱的RPMI1640培养液,空白对照组加入不含青藤碱的RPMI1640培养液。培养72小时后,提取细胞总蛋白,用Western blot方法检测细胞COX-2、p-ERK、Bcl-2蛋白表达情况。初步研究探讨青藤碱通过何种信号转导通路干预肿瘤细胞增殖。给药后观察细胞一般情况,用MTT方法检测细胞生长情况,了解青藤碱对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响。用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果表明:1.中、高剂量实验组细胞生长减缓。与空白组比较,中、高剂量实验组肿瘤细胞MTT的OD值减小（P＜0.05）;2.中高剂量组COX-2蛋白表达下降。与空白组比较,中、高实验组COX-2蛋白表达下降,差别具有统计学意义（P＜0.05）;3.高剂量实验组p-ERK蛋白表达下降。与空白组比较,差别具有统计学意义（P＜0.05）;4.中高剂量实验组Bcl-2蛋白表达下降。与空白组比较,差别具有统计学意义（P＜0.05）。5.与空白组比较,实验组细胞凋亡增加（P＜0.05）,说明青藤碱作用后,细胞凋亡率升高。结论:1.青藤碱可抑制Hela细胞增殖。2.青藤碱可诱导Hela细胞凋亡,可能是通过减少Bcl-2蛋白表达实现这个作用。3.青藤碱可能抑制COX-2、ERK-Bcl-2信号转导通路的功能。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 缩略词表
• 前言
• 实验研究
• 一 青藤碱对HeLa细胞增殖的影响
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 实验细胞
• 1.1.2 实验药物
• 1.1.3 主要试剂
• 1.1.4 主要仪器
• 1.2 实验条件
• 1.3 实验方法
• 1.3.1 细胞培养
• 1.3.2 剂量设计
• 1.3.3 实验观察及检测方法
• 1.4 实验结果
• 二.青藤碱对COX-2的影响的实验研究
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验对象
• 2.1.2 实验药物
• 2.1.3 主要试剂
• 2.1.4 主要仪器
• 2.2 实验条件
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 细胞培养
• 2.3.2 剂量设计
• 2.3.3 给药方法
• 2.4 检测方法
• 2.4.1 样品处理及细胞总蛋白含量测定
• 2.4.2 Western blot
• 2.5 统计分析
• 2.6 实验结果
• 三.青藤碱对p-ERK的影响的实验研究
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 实验对象
• 3.1.2 实验药物
• 3.1.3 主要试剂
• 3.1.4 主要仪器
• 3.2 实验条件
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 细胞培养
• 3.3.2 剂量设计
• 3.3.3 给药方法
• 3.4 检测方法
• 3.5 统计分析
• 3.6 实验结果
• 四.青藤碱对Bcl-2的影响的实验研究
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 实验对象
• 4.1.2 实验药物
• 4.1.3 主要试剂
• 4.1.4 主要仪器
• 4.2 实验条件
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 细胞培养
• 4.3.2 剂量设计
• 4.3.3 给药方法
• 4.4 检测方法
• 4.5 统计分析
• 4.6 实验结果
• 五.青藤碱对HeLa细胞凋亡的影响的实验研究
• 5.1 实验材料
• 5.1.1 实验对象
• 5.1.2 实验药物
• 5.1.3 主要试剂
• 5.1.4 主要仪器
• 5.2 实验条件
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 细胞培养
• 5.3.2 剂量设计
• 5.3.3 给药方法
• 5.4 检测方法
• 5.5 统计分析
• 5.6 实验结果
• 讨论
• 1.青藤碱对COX-2的作用
• 2.COX-2在肿瘤发生发展中的作用
• 3.检测Bcl-2的意义
• 4.COX-2调节Bcl-2表达的信号转导途径
• 结语
• 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 公开发表的学术论文、专著及科研成果
• 附图