草酸氧化酶基因转化甘蓝型油菜的研究

论文摘要

甘蓝油菜是世界重要的经济作物之一，但是由于长期受到菌核病等多种病害的危害，其产量和品质受到严重影响。目前，其近缘种中还没有发现完全抗或免疫的种质资源，油菜对菌核病的抗性表现为数量性状，易受环境的影响，加之缺乏准确可靠的病害鉴定方法，使得常规育种难以选择到真正抗病植株。研究表明，草酸氧化酶（oxalate oxidase，OXO）能够把毒素草酸降解为CO2和H2O2。因此基于草酸在核盘菌属内与致病性明显的关系，我们的目的是获得可以分解草酸的草酸氧化酶转基因植株，并希望借此增强甘蓝型油菜对S.sclerotiorum抗性。本研究以来源于小麦的germin基因为外源基因，以B7质粒为基础，构建OXO基因植物表达载体，以子叶柄和下胚轴为外植体，采用农杆菌介导的遗传转化方法，对甘蓝型油菜进行转化，获得转germin基因的油菜24株，其中98C40 9株，Wersta 15株。我们对其进行简单的草酸赖性检测，推测含有germin基因的转基因油菜对S.sclerotiorum具有抗性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 引言
• 1.2 核盘菌致病的过程
• 1.3 小麦 Germin蛋白的研究现状
• 1.4 抗病育种途径
• 1.5 试验的目的与意义
• 第二章 germin基因的克隆及其表达载体的构建
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果与分析
• 第三章 甘蓝型油菜转化再生体系的建立
• 3.1 已有转化体系
• 3.2 卡那霉素梯度筛选
• 3.3 转化条件的正交试验
• 3.4 结果与分析
• 第四章 germin基因在甘蓝型油菜中的转化
• 4.1 材料
• 4.2 方法
• 4.3 甘蓝型油菜再生过程
• 4.4 转基因油菜的检测
• 4.5 结论与分析
• 第五章 讨论
• 5.1 再生苗的分化
• 5.2 抗性苗的早花现象
• 5.3 甘蓝型油菜基因型与转化率的关系
• 5.4 转化苗中的嵌和体
• 参考文献
• 缩写词
• 致谢
• 作者简历