论文摘要
目的:研究胆固醇流出对ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡的影响。 方法:用50mg/Lox-LDL与RAW264.7细胞共同孵育0,12,24,48,96小时。用50mg/Lox-LDL处理RAW264.7细胞48小时后加入不同浓度的HDL3（50,100,200mg/L）和胆固醇流出抑制剂Brefeldin（BFA）或胆固醇流出促进剂β-cyclodextrin（β-CD）孵育24小时。油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况;高效液相分析法检测细胞内胆固醇含量;液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出;Hoechst33258观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测细胞凋亡。 结果:用50mg/Lox-LDL与RAW264.7细胞共同孵育0,12,24,48,96小时,结果显示:RAW264.7细胞的凋亡率随着处理时间的延长而显著提高。在50mg/Lox-LDL与RAW264.7细胞共同孵育48小时出现明显的凋亡形态学改变（胞质体积缩小,胞核凝集、边缘化）,油红O染色显示,细胞内的大量脂滴形成,细胞胆固醇酯含量显著增加,细胞呈典型泡沫化形态。用50mg/Lox-LDL处理RAW264.7细胞48小时后,加入不同浓度的HDL3（50,100,200mg/L）和胆固醇流出抑制剂BFA（4μmol）或β-CD（10mmol/L）孵育24小时。结果显示:HDL3呈浓度依赖性的促进细胞内胆固醇流出和降低细胞内的胆固醇含量,油红O染色显示,细胞内的脂滴明显减少。细胞的凋亡率也随着HDL3浓度的升高而逐渐降
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