半滑舌鳎雌雄性别分化指标的研究

论文摘要

半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Gunther）隶属于鲽形目舌鳎科舌鳎属,它在我国沿海均有分布,它是一种近海温水性大型底层鱼类,雌性个体大,雄性个体小。栖息于渤海的半滑舌鳎终年不出渤海,具有活动范围小、营养等级低、食物层次较低、个体大、生长快等优良性状。在自然条件下,半滑舌鳎雌、雄个体差异非常大,；雄性个体生殖能力弱,完全成熟精巢,不管是体积还是重量,都只是成熟卵巢的1／200-1／900,因而导致繁殖能力差,这些先天特性在其他的鱼类种群中是罕见的。故其在幼鱼期是很难根据外观形态预测其性别的,因此为提高育种效率和优选率应选择性别早期鉴定的指标,即来自对其内部遗传类型（即基因型）或生理生化的鉴定。1雌、雄半滑舌鳎血液的指标以20尾半滑舌鳎的成鱼为材料,测定了红细胞数、白细胞总数、血红蛋白值、白细胞分类计数、红细胞脆性与红细胞及其核大小等正常血液指标,并统计了性别与血液指标的关系,其中红细胞长径：雄鱼（7.00±0.15 pm）；雌鱼（8.05±0.13μm）、红细胞核长径：雄鱼（3.06±0.30 pm）；雌鱼（3.75±0.12 pm）、短径：雄鱼（2.02±0.32μm）；雌鱼（2.60±0.14 pm）有极显著差异,其它的血液指标在雌、雄中则无显著差异。2雌、雄半滑舌鳎染色体的核型分析本文采用秋水仙素直接取材法对半滑舌鳎的核型进行分析。选取发育12-50 d的幼鱼,在不同浓度的秋水仙素溶液中处理5-6 h,分别剪取冠状幼鳍、鳃丝和身体周围的鳍条及肾组织,通过低渗、固定、解离,得到细胞悬液,冷冻滴片,Giemsa染色。显微镜下观察分散比较良好的中期分裂相并统计染色体的数量,选取较好的分裂相进行显微照相,放大和测量,分析半滑舌鳎的核型。通过对500个清晰的中期分裂相的观察和统计,最终确定：半滑舌鳎的染色体众数为42,核型为2n=42t,臂数NF=42,全部为端部着丝粒染色体。通过观察多次实验的结果,可初步断定半滑舌鳎的性染色体类型属于ZW／ZZ型。3雌、雄半滑舌鳎染色体的带型分析选用片龄在30 d左右的半滑舌鳎的染色体标本放在1×SSC溶液中恒温（35-40℃）加热并用紫外灯照射约15 min后用蒸馏水冲洗,Gimsa染色7-9 min后晾干待镜检,可观察到在复制早期到中期这段时间,半滑舌鳎的性染色体均具有各自特有的复制带。半滑舌鳎W染色体的长度在所有的染色体中占据第一的位置,而Z染色体无论在雌鱼还是雄鱼中均排在第四位。根据实验结果,雌鱼、雄鱼1-3号染色体和Z、W染色体的带型为：雌鱼：W染色体：染色体长臂中部到下部的区域有3条相邻的特征性晚复制区。两端的两条较大,中间的一条较小。1号染色体：染色体短臂距着丝粒最远端可观察到1条特征性晚复制区,长臂在靠近着丝粒处有3条相邻的特征性晚复制区,大小基本相同。2号染色体：3条特征性晚复制区,其中两条靠近长臂的着丝粒处,另一条在距离着丝粒的最远端,大小基本相同。3号染色体：两条特征性晚复制区,一条靠近长臂着丝粒处,另一条在长臂的近中部。位于近中部的特征性复制区要比靠近着丝粒处的大。雄鱼：1号染色体：在靠近长臂着丝粒处有两条特征性晚复制区,近着丝粒的特征性晚复制区大于远端的。2号染色体：整个染色体仅观察到一条特征性晚复制区,位于靠近长臂的近中部。3号染色体：两条特征性晚复制区,均位于长臂中部靠下的位置,大小基本相同。Z染色体：两条特征性晚复制区,均位于染色体长臂的近中部,靠近着丝粒的特征性晚复制区比远离的大。4雌、雄半滑舌鳎激素水平的分析半滑舌鳎性腺早期发育一般划分为Ⅰ期（发育早期）、Ⅱ期（发育前期）、Ⅲ期（发育中期）、Ⅳ期（发育后期）和V期（成熟期）5个时期。半滑舌鳎雄性血清中睾酮在精巢发育期内的变化为：自Ⅲ期开始升高,至Ⅳ期后期（排精前）升至高峰139.925±0.112 ng／mL,至第Ⅱ期下降到最低点8.700±0.120 ng／mL。雌性血清中雌二醇在卵母细胞发育周期中的变化为：自Ⅲ期开始升高,至Ⅳ期后期,排卵前升至高峰30.967±0.256 pg／mL,排卵后,雌二醇浓度骤然下降。雌性血清中孕酮在卵母细胞发育周期中的变化为：自Ⅳ期早期升高,Ⅳ期升至高峰16.556±0.135 pg／mL,高水平维持至V期,排卵结束。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 鱼类的胚胎发育
• 1.2 鱼类的性别分化
• 1.3 鱼类机体内环境
• 1.3.1 鱼类机体内环境的特点
• 1.3.2 鱼类血液的机能
• 1.3.3 鱼类血液的组成
• 1.3.4 鱼类的血量
• 1.3.5 鱼类血浆的化学成分及理化特性
• 1.3.6 鱼类血细胞的的化学成分及理化特性
• 1.4 鱼类染色体的研究
• 1.4.1 鱼类染色体核型
• 1.4.2 鱼类染色体带型
• 1.5 鱼类血液中激素水平的研究
• 1.5.1 激素的一般特征
• 1.5.2 激素的种类
• 1.5.3 激素的作用原理
• 1.6 研究的目的意义
• 第2章 半滑舌鳎雌、雄血液指标分析
• 前言
• 2.1 实验材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.1.3 数据处理
• 2.2 结果
• 2.2.1 各项血液指标数值
• 2.2.2 雌雄个体血液生理指标的差异
• 2.3 讨论
• 2.3.1 红细胞
• 2.3.2 白细胞
• 2.3.3 性别的差异
• 2.3.4 其他血液指标
• 第3章 半滑舌鳎雌、雄染色体核型分析
• 前言
• 3.1 实验材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 仪器与试剂
• 3.1.3 方法
• 3.2 结果
• 3.2.1 取材于不同组织的对比观察
• 3.2.2 半滑舌鳎染色体数目的确定
• 3.2.3 染色体相对长度分析结果
• 3.2.4 半滑舌鳎核形模式图
• 3.3 讨论
• 3.3.1 半滑舌鳎取材
• 3.3.2 半滑舌鳎材料的前处理
• 3.3.3 半滑舌鳎中期染色体长度的分析
• 第4章 半滑舌鳎染色体的带型分析
• 前言
• 4.1 实验材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 仪器与试剂
• 4.1.3 方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 4.3.1 关于复制带显带的方法
• 4.3.2 半滑舌鳎复制带与性别分化的关系
• 第5章 半滑舌鳎半滑舌鳎雌、雄激素水平分析
• 前言
• 5.1 实验材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 实验场所
• 5.1.3 仪器与试剂
• 5.1.4 方法
• 5.2 结果
• 5.3 讨论
• 5.3.1 血清中睾酮在不同种别,种类和个体之间的差异性
• 5.3.2 血清中雌二醇和孕酮性激素水平在不同种属、不同个体之间的差异
• 5.3.3 雌二醇在生殖周期中的变化
• 5.3.4 孕酮在发育周期中的变化
• 结语
• 参考文献
• 图版
• 致谢
• 附录 个人简历