燕丽娜:重组犬α干扰素在昆虫细胞中的高效表达与抗病毒活性鉴定论文

燕丽娜:重组犬α干扰素在昆虫细胞中的高效表达与抗病毒活性鉴定论文

本文主要研究内容

作者燕丽娜,傅倩芸,孙培录,赵忠欣,王威,盖微微,郑学星,郑文文,夏咸柱(2019)在《重组犬α干扰素在昆虫细胞中的高效表达与抗病毒活性鉴定》一文中研究指出:目的利用杆状病毒表达系统制备犬α干扰素(Canine interferon-α,CaIFN-α)。方法根据昆虫细胞密码子偏爱性优化CaIFN-α基因,构建含双拷贝CaIFN-α优化基因的载体pFastBacDual-CaIFNα-CaIFNα,转化DH10Bac感受态后获得重组基因组rBacmid-CaIFNα-CaIFNα,转染Sf9细胞获得重组杆状病毒rBac-CaIFNα-CaIFNα,接种Sf9细胞表达rCaIFN-α。采用PCR和透射电子显微镜鉴定重组杆状病毒的外源基因与病毒形态,采用间接免疫荧光染色法检测rCaIFN-α蛋白的表达,采用细胞病变抑制法测定rCaIFN-α抑制水疱性口炎病毒(VSV-GFP)在MDCK细胞的复制能力。结果重组杆状病毒rBac-CaIFNα-CaIFNα构建成功,rCaIFN-α在rBac-CaIFNα-CaIFNα感染的Sf9细胞中表达,其抗病毒活性为8.73×105 IU/ml。结论构建的杆状病毒表达系统能高效表达rCaIFN-α,该干扰素具有高效抗病毒活性,这为犬干扰素制剂的研究奠定了基础。

Abstract

mu de li yong gan zhuang bing du biao da ji tong zhi bei quan αgan rao su (Canine interferon-α,CaIFN-α)。fang fa gen ju kun chong xi bao mi ma zi pian ai xing you hua CaIFN-αji yin ,gou jian han shuang kao bei CaIFN-αyou hua ji yin de zai ti pFastBacDual-CaIFNα-CaIFNα,zhuai hua DH10Bacgan shou tai hou huo de chong zu ji yin zu rBacmid-CaIFNα-CaIFNα,zhuai ran Sf9xi bao huo de chong zu gan zhuang bing du rBac-CaIFNα-CaIFNα,jie chong Sf9xi bao biao da rCaIFN-α。cai yong PCRhe tou she dian zi xian wei jing jian ding chong zu gan zhuang bing du de wai yuan ji yin yu bing du xing tai ,cai yong jian jie mian yi ying guang ran se fa jian ce rCaIFN-αdan bai de biao da ,cai yong xi bao bing bian yi zhi fa ce ding rCaIFN-αyi zhi shui pao xing kou yan bing du (VSV-GFP)zai MDCKxi bao de fu zhi neng li 。jie guo chong zu gan zhuang bing du rBac-CaIFNα-CaIFNαgou jian cheng gong ,rCaIFN-αzai rBac-CaIFNα-CaIFNαgan ran de Sf9xi bao zhong biao da ,ji kang bing du huo xing wei 8.73×105 IU/ml。jie lun gou jian de gan zhuang bing du biao da ji tong neng gao xiao biao da rCaIFN-α,gai gan rao su ju you gao xiao kang bing du huo xing ,zhe wei quan gan rao su zhi ji de yan jiu dian ding le ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国病原生物学杂志的燕丽娜,傅倩芸,孙培录,赵忠欣,王威,盖微微,郑学星,郑文文,夏咸柱,发表于刊物中国病原生物学杂志2019年01期论文,是一篇关于犬干扰素论文,杆状病毒表达系统论文,昆虫细胞论文,抗病毒活性论文,中国病原生物学杂志2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国病原生物学杂志2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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