AT1R在乙肝病毒感染者肝纤维化形成过程中的表达变化及意义

论文摘要

肝纤维化是肝脏纤维组织过度沉积,细胞外基质（ Extracellulaur matrix,ECM）合成大于降解的结果,是多种慢性肝病病情发展的共同病理基础。进展期肝纤维化可导致肝硬化,最终出现终末期肝病的临床表现。目前仍认为肝星状细胞（hepatic stellate cell, HSC）是肝纤维化的中心环节,在肝纤维化发生发展中起主导作用。国外学者已证实,肝脏局部存在肾素-血管紧张素系统（renin- angiotensin system, RAS）。探讨RAS在肝纤维化形成过程中的作用已成为近年的研究热点。血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）是该系统中最主要的生物活性物质。AngⅡ在心、肾纤维化中的作用机理已经逐步阐明,血管紧张素转化酶抑制剂（ACEIs）和AngⅡ1型受体拮抗剂（ARBs）在临床已广泛应用于治疗心、肾纤维化。目前研究发现,AngⅡ在肝纤维化的发生、发展过程中发挥了多种病理生理作用,而且人类HSC上存在AngⅡ1型受体（angiotensinⅡtype1 receptor, AT1R）,AngⅡ通过作用于该受体发挥其生物学作用。慢性乙肝病毒感染可使肝脏受到长期持续性损伤, RAS系统持续激活,促使HSC活化、收缩和增殖,合成并分泌大量致纤维化生长因子,如转化生长因子-β（TGF-β）、血小板源性生长因子（PDGF）等。这些生长因子又可促进AngⅡ的合成及分泌,最终导致肝纤维化的形成。在我国,慢性乙型病毒性肝炎（简称慢性乙肝）是引起肝纤维化甚至肝硬化的主要原因。本病在我国广泛流行,是危害人民健康最严重的常见传染病之一,其复杂的病理生理过程及临床表现使临床对肝组织病变活动程度判断较难。目前对血清HBV DNA与肝脏病理分级、分期间关系的研究较多,但结果很不一致,血清HBV DNA与AT1RmRNA之间关系的研究还未见报道。目前尚无满意的抗乙肝病毒治疗方案,且单纯抗病毒治疗往往不能满意地改善慢性肝病患者的症状,所以抗肝纤维化治疗愈加重要。但目前抗肝纤维化治疗仍以活血化瘀类中药为主,尚无有效抗肝纤维化西药的研究报道。研究有效抗肝纤维化治疗的西药及方案可以填补抗纤维化治疗的空白,对降低肝硬化发病率和死亡率具有重要意义。动物实验表明ACEIs和ARBs（如Losartan）有减轻或延缓肝纤维化形成的作用。但应用于患者其确切的临床效果如何,以及应用此类药物的理论依据都还需进一步探讨。目的:目前国内对人类肝组织中AT1R的研究还甚少,本研究通过对AT1R在不同阶段慢性肝病患者肝组织表达规律的研究,旨在为临床应用ARBs治疗肝纤维化的可能性提供依据。通过对血清HBV DNA的定量检测,探讨HBV病毒载量与AT1RmRNA及肝纤维化分期的关系。方法:收集2007年1月-2008年1月在我院消化内科因慢性乙肝病毒感染行肝组织穿刺术的活检标本42例,术中所取肝胆外科慢性乙肝肝硬化患者的肝组织标本13例,及同期因肝血管瘤行肝叶切除的正常肝组织12例,共67例。67例患者均在肝穿或手术前后2日内抽取空腹静脉血4ml并分离血清。根据2000年《病毒性肝炎防治方案》中慢性肝炎的纤维化分期标准,将入选病例分为:S0-1组、S2-4组、晚期肝硬化组及正常对照组。采用石蜡切片,对肝组织进行HE染色及Masson染色,在光学显微镜下进行病理分级。用免疫组织化学法（Immunohistochemistry, IHC）及凝胶电泳半定量反转录聚合酶链反应法（Reverse transcription, RT-PCR）法,检测慢性乙肝病毒感染者及正常对照者肝组织中AT1R的表达。用荧光定量PCR法对血清HBV DNA进行定量检测。结果:1肝组织中AT1R免疫阳性细胞表达免疫组化结果显示AT1R阳性染色为胞浆型,呈黄色或棕黄色。阳性细胞主要位于窦周Disse间隙,呈椭圆形或不规则形,可见其突起伸入肝细胞之间,多散在或成团状分布,随纤维化加重其表达明显增多。S0-1组、S2-4组、晚期肝硬化各组均有阳性细胞表达,AT1R在正常肝组织表达微弱或无表达。与正常对照组相比,S0-1组、S2-4组和晚期肝硬化患者肝组织中AT1R的阳性表达增多有显著差异（P<0.01）; S0-1组与正常对照组比较无明显差异（P>0.05）; S0-1组与S2-4组比较有显著差异（P<0.01）; S0-1组与晚期肝硬化组比较有显著差异（P<0.01）; S2-4组与晚期肝硬化组比较有明显差异（P<0.05）。2肝组织中AT1RmRNA的表达与正常对照组相比,S0-1组、S2-4组和晚期肝硬化患者肝组织中AT1RmRNA的表达量增高,差异有统计学意义（P<0.01）;S0-1组与正常对照组比较无明显差异（P>0.05）;S0-1组与S2-4组比较有显著差异（P<0.01）;S0-1组与晚期肝硬化组比较有显著差异（P<0.01）;S2-4组与晚期肝硬化组比较有显著差异（P<0.01）。3对血清HBV DNA含量及肝组织纤维化分期进行相关性分析血清HBV DNA含量与肝组织纤维化分期之间无相关性,相关系数为-0.140,P>0.05。4对血清HBV DNA及肝组织中AT1RmRNA进行相关性分析血清HBV DNA含量与AT1RmRNA之间无相关性,相关系数为-0.014,P>0.05。结论:1 AT1R及AT1RmRNA在正常肝组织中只微弱表达或不表达,在纤维化及硬化肝组织中表达高度上调,且其表达强度与纤维化分期密切相关。从而认为RAS系统的AngⅡ及AT1R在肝纤维化发生发展过程中起了重要作用。2血清HBV DNA含量与肝组织纤维化分期之间无明显关系。3血清HBV DNA与肝组织中AT1RmRNA之间无明显关系。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 AT1R 在乙肝病毒感染者肝纤维化形成过程中的表达变化及意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 血管紧张素Ⅱ与肝纤维化的研究进展
• 致谢
• 个人简历