白藜芦醇对小鼠肺泡巨噬细胞释放细胞因子的影响

论文摘要

目的慢性气道炎症是多种呼吸系统疾病共同的病理特征,如慢性阻塞性肺疾病（COPD）,支气管哮喘,特发性肺间质纤维化（IPF）等。近年来研究表明,这种病理特征与肺泡巨噬细胞及其所释放的细胞因子有着重要的联系。本研究以COPD为例,探讨白藜芦醇对肺泡巨噬细胞所释放的细胞因子的影响。慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一组以气道阻塞不完全可逆为特征的疾病,发病率及死亡率近年来呈增加趋势。肺泡巨噬细胞（AM）是广泛地分布于肺泡内及支气管表面的炎性细胞,组成肺组织的第一道防线,在抗菌及调节免疫炎症反应等多方面发挥着重要作用,而肺泡巨噬细胞过度释放细胞因子如IL-6、IL-8、TNF-α等是引起COPD肺组织损伤的关键。对于COPD目前的疗法是直接的对症治疗或治疗慢性气道炎症,但这些方法不能改变肺功能的渐进性下降和气道炎症。随着对细胞因子介导炎症途径认识的逐步深入,目前已经开展抗细胞因子的治疗,取得一些成果,但药物甚少。白藜芦醇（R）是一类主要存在于葡萄等植物中的多酚类化合物,现有的文献已证实白藜芦醇具有抗炎、抗菌、抗氧化以及抑制细胞因子等重要作用,本实验通过观察白藜芦醇对受内毒素刺激后小鼠肺泡巨噬细胞释放细胞因子的影响,为防治这种慢性、进行性发展的呼吸疾病的治疗提供理论依据。方法:从小鼠支气管肺泡灌洗中收集、分离并培养肺泡巨噬细胞。实验分5组进行, A组（单纯LPS刺激组, 10mg/L）,B组（LPS 10mg/L+R 50ug/ml） , C组（LPS 10mg/L+R 100ug/ml）,D组（LPS 10mg/L + R 150ug/ml）,E组（LPS 10mg/L+ R 200ug/ml）各组在培养0,4,6,12,24小时提取上清液,应用ELISA法`测定上清液中IL-8,IL-6,TNF-α的含量。实验结果:5组小鼠肺泡巨噬细胞培养经LPS激发及R干预后所得IL-8,IL-6及TNF-α结果分别如下。（1）在LPS刺激下TNF-α于6小时达释放高峰,TNF-α的含量在B组,C组,D组及E组中随着白黎芦醇浓度的逐步加大,也相应逐渐降低。其中以C组,D组及E组（白黎芦醇浓度分别为100ug/ml,150ug/ml和200ug /ml）效果最好,在6小时明显低于单纯LPS刺激组,（P<0.05）,但C组,D组及E组所得相比无统计学意义（P>0.05）。（2）IL-8于8小时达释放高峰,IL-8的含量在B组,C组,D组及E组中随着白黎芦醇浓度的逐步加大而逐渐降低,以E组最显著（P<0.05）。（3）IL-6于12小时达释放高峰,随着白黎芦醇浓度的逐步加大,IL-6的含量也相应逐渐降低,以E组最显著（P<0.05）。结论:白黎芦醇可以抑制肺泡巨噬细胞过度释放IL-8,IL-6,TNF-α。实验中可以看到,在能明显抑制细胞因子释放的C、D、E组相比较,提高白藜芦醇的浓度后,TNF-α的水平并没有随白藜芦醇的浓度提高而更显著的下降,可以认为给一个有效剂量的白藜芦醇就可以控制这种细胞因子,不必要再加大浓度。抗细胞因子药物在COPD的治疗中将成为必然。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 第一部分 肺泡巨噬细胞的分离、培养及细胞因子的水平
• 1、材料与方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 第二部分 白藜芦醇对小鼠肺泡巨噬细胞释放 TNF-α,IL-6,IL-8 细胞因子的影响
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3、讨论
• 小结
• 参考文献
• 附图
• 个人简历和研究成果
• 致谢