本文主要研究内容
作者赵遵岭,王雪庆,杨璞（2019）在《白蜡虫far3基因cDNA全长克隆、原核表达和酶活分析》一文中研究指出：脂酰辅酶A还原酶（FAR）可将脂酰辅酶A还原为相应的脂肪醇,在白蜡生物合成中起至关重要的作用。本研究通过cDNA末端快速扩增技术获得白蜡虫Ericerus pela far3基因cDNA全长,其开放阅读框（ORF）1 566 bp。对白蜡虫FAR3编码蛋白进行系统发育分析,发现FAR3与人类Homo sapiens、小鼠Mus musculus、黑腹果蝇Drosophila melanogaster等物种的FAR聚为一支;成功构建pET-30a eGFP/EpelFAR3原核表达质粒,转入大肠杆菌Escherichia coli BL21感受态细胞,在浓度为0.05 mmol·L-1的异丙基硫代半乳糖苷诱导6 h后有较高的蛋白表达量;经Western blot验证,表达蛋白分子量与预估蛋白分子量符合;质谱分析蛋白质分值为3 900,肽段覆盖度74%,所得肽段与理论序列相符;利用底物C24脂酰辅酶A、C26脂酰辅酶A、C28脂酰辅酶A和C30脂酰辅酶A对原核表达蛋白进行活性分析,利用气相色谱进行蛋白活性验证,没有理论产物相应脂肪醇的生成。本研究中白蜡虫far3 cDNA ORF的获得及原核表达的实现,为进一步的功能和组织表达定位研究奠定了基础。
Abstract
zhi xian fu mei Ahai yuan mei （FAR）ke jiang zhi xian fu mei Ahai yuan wei xiang ying de zhi fang chun ,zai bai la sheng wu ge cheng zhong qi zhi guan chong yao de zuo yong 。ben yan jiu tong guo cDNAmo duan kuai su kuo zeng ji shu huo de bai la chong Ericerus pela far3ji yin cDNAquan chang ,ji kai fang yue dou kuang （ORF）1 566 bp。dui bai la chong FAR3bian ma dan bai jin hang ji tong fa yo fen xi ,fa xian FAR3yu ren lei Homo sapiens、xiao shu Mus musculus、hei fu guo ying Drosophila melanogasterdeng wu chong de FARju wei yi zhi ;cheng gong gou jian pET-30a eGFP/EpelFAR3yuan he biao da zhi li ,zhuai ru da chang gan jun Escherichia coli BL21gan shou tai xi bao ,zai nong du wei 0.05 mmol·L-1de yi bing ji liu dai ban ru tang gan you dao 6 hhou you jiao gao de dan bai biao da liang ;jing Western blotyan zheng ,biao da dan bai fen zi liang yu yu gu dan bai fen zi liang fu ge ;zhi pu fen xi dan bai zhi fen zhi wei 3 900,tai duan fu gai du 74%,suo de tai duan yu li lun xu lie xiang fu ;li yong de wu C24zhi xian fu mei A、C26zhi xian fu mei A、C28zhi xian fu mei Ahe C30zhi xian fu mei Adui yuan he biao da dan bai jin hang huo xing fen xi ,li yong qi xiang se pu jin hang dan bai huo xing yan zheng ,mei you li lun chan wu xiang ying zhi fang chun de sheng cheng 。ben yan jiu zhong bai la chong far3 cDNA ORFde huo de ji yuan he biao da de shi xian ,wei jin yi bu de gong neng he zu zhi biao da ding wei yan jiu dian ding le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自四川动物的赵遵岭,王雪庆,杨璞，发表于刊物四川动物2019年02期论文，是一篇关于白蜡虫论文,脂酰辅酶还原酶论文,末端快速扩增技术论文,原核表达论文,酶活分析论文,四川动物2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自四川动物2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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