论文摘要
目的:通过构建慢性疲劳综合征(CFS)小鼠模型,研究运动量对CFS小鼠免疫功能的影响,为临床上CFS运动处方的研究提供免疫学实验依据。方法:取40只雄性昆明小鼠,随机分为4组,每组10只。Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ组为CFS对照组,Ⅲ组为CFS运动1组,Ⅳ组为CFS运动2组。让Ⅱ组、Ⅲ组与Ⅳ组小鼠在每天同一时间进行6min的力竭性游泳,持续3周,观察小鼠一般情况,构建CFS小鼠模型。然后,分别让Ⅲ组与Ⅳ组小鼠每天进行1次或2次恢复运动,持续2周后,比较体重、力竭游泳时间以及悬挂静止时间。小鼠摘眼球放血,分离血清, -70℃保存备用。颈椎脱臼处死小鼠,无菌操作取脾脏称重,计算脾脏指数;利用噻唑蓝(MTT)法检测小鼠脾NK细胞活性和淋巴细胞刺激指数(SI);通过形态学检测法计算淋巴细胞转化率;利用微量聚乙二醇(PEG)半定量法检测血清循环免疫复合物(CIC); ELISA检测脾细胞经诱生后分泌的IL-2和IFN-γ量;RT-PCR检测脾细胞中TNF-α水平。利用统计软件SPSS13.0对数据进行分析处理,P<0.05代表差异有统计学意义。结果:(1)小鼠体重分别比较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的造模前、造模后、治疗后体重,差异无显著性(P>0.05)。(2)小鼠行为学指标计算治疗后各组力竭时间与悬挂静止时间,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的力竭时间与悬挂静止时间明显长于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组、Ⅳ组力竭时间短于Ⅱ组(P<0.05),且Ⅳ组悬挂静止时间短于Ⅱ组(P<0.05)。(3)小鼠脾脏指数Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组脾脏指数明显高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组、Ⅳ组脾脏指数明显低于Ⅱ组(P<0.05)。(4)小鼠血清CIC值Ⅱ组和Ⅲ组小鼠血清CIC值明显高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组与Ⅱ组比较差异无显著性(P>0.05);Ⅳ组血清CIC值明显低于Ⅱ组(P<0.05)。(5)小鼠脾脏NK细胞活性Ⅱ组和Ⅲ组小鼠NK细胞活性明显低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组小鼠虽高于Ⅱ组,但与Ⅱ组比较差异无显著性(P>0.05);Ⅳ组NK细胞活性明显高于Ⅱ组(P<0.05)。(6)小鼠淋巴细胞增殖Ⅱ组小鼠淋巴细胞的SI明显低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组、Ⅳ组与Ⅱ组比较,有显著性差异(P<0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组淋巴细胞转化率明显低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的淋巴细胞转化率与Ⅱ组比较,Ⅳ组明显高于Ⅱ组(P<0.05),但Ⅲ组与Ⅱ组比较差异无显著性(P>0.05)。(7)小鼠脾细胞IL-2与IFN-γ水平Ⅱ组小鼠IL- 2和IFN-γ含量明显低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组IL- 2含量与Ⅱ组比较差异无显著性(P>0.05),Ⅲ组IFN-γ含量明显高于Ⅱ组(P<0.05);Ⅳ组IL- 2和IFN-γ含量明显高于Ⅱ组(P<0.05)。(8)小鼠TNF-α检测Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的TNF-α与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组条带亮度明显比Ⅰ组亮;Ⅲ组、Ⅳ组与Ⅱ组比较,Ⅳ组条带亮度明显比Ⅱ组暗,Ⅲ组与Ⅱ组条带亮度差不多。结论:(1)成功地建立了CFS小鼠模型。(2)适度的运动能改善CFS小鼠的行为学指标与脾脏指数,降低小鼠血清CIC量,增加小鼠脾脏NK细胞活性、淋巴细胞SI、转化率,增加小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ含量,降低TNF含量。(3)适量且有规律运动有助于CFS小鼠恢复健康。(4)本实验结果可为临床上研究CFS的运动处方作参考。
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