人参皂苷Rh2提高肿瘤细胞对桦木酸敏感性的研究

论文摘要

恶性肿瘤现已经成为威胁人类健康和生命,导致死亡的主要原因之一。目前,化学疗法,放射性治疗,免疫疗法是肿瘤术后治疗的方法,其中化学治疗是辅助术后治疗的主要手段。治疗肿瘤的方法都是利用药物诱导肿瘤细胞发生凋亡起作用的。化疗药物的疗效在一定范围内与药物剂量成正比。随着用药剂量的增加,机体产生毒副作用的风险也相应增加。发现有协同作用的抗肿瘤药物可以使药物在治疗安全窗内产生更好的疗效。本研究中,我们使用天然成分人参皂苷Rh2（G-Rh2）和桦木酸（Bet A）同时作用于人肝癌细胞HepG2和人肺癌细胞A549,并且广泛的测定与分析人参皂苷Rh2（G-Rh2）和桦木酸（Bet A）对肿瘤细胞的杀伤效果。我们采用细胞形态学测定、流式细胞仪检测分析、caspase-3酶活性测定分析、免疫印记法分析等实验技术,证明了人参皂苷Rh2（G-Rh2）和桦木酸（Bet A）两者可诱导癌症细胞发生凋亡并且二者同时作用于癌症细胞时对癌症细胞的促凋亡作用更加明显。随着药物联合作用时间的延长,细胞内发生明显的caspase-9前体活化,PARP断裂、caspase-3激活及凋亡。研究结果表明人参皂苷Rh2（G-Rh2）能有效提高肿瘤细胞对桦木酸（Bet A）的敏感性。

论文目录

• 内容提要
• 第1章 前言
• 1.1 背景知识
• 1.1.1 抗肿瘤药物的协同作用相关研究理论
• 1.1.2 肿瘤的治疗与细胞凋亡
• 1.1.3 细胞凋亡的基本理论
• 1.1.4 G-Rh2 研究进展
• 1.1.5 桦木酸的研究进展
• 1.2 论文研究目的及设计思路
• 1.2.1 论文研究目的
• 1.2.2 论文设计思路
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料与试剂
• 2.1.1 细胞株
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 抗体
• 2.1.4 主要使用仪器
• 2.1.5 主要溶液配置方法
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 细胞培养
• 2.2.2 DAPI 核染色分析
• 2.2.3 流式细胞检测分析
• 2.2.4 体外caspase-3 活力测定
• 2.2.5 全细胞裂解液的制备
• 2.2.6 BCA 法测定蛋白质浓度方法
• 2.2.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
• 2.2.8 免疫印迹分析方法步骤
• 2.2.9 MTT 比色法
• 第3章 结果与讨论
• 3.1 G-Rh2 提高肿瘤细胞对Bet A 敏感性是药物协同的结果
• 3.1.1 G-Rh2 和Bet A 联合应用对A549 细胞和HepG2 细胞的杀伤效果
• 3.1.2 G-Rh2 提高肿瘤细胞对Bet A 敏感性是药物协同的结果
• 小结
• 3.2 G-Rh2 提高肿瘤细胞对Bet A 的敏感性是通过细胞凋亡实现的
• 3.2.1 细胞核DAPI 染色并观察凋亡细胞形态学变化
• 3.2.2 流式细胞仪检测分析凋亡细胞中Sub-G1 期的细胞百分比..
• 3.2.3 Caspase-3 活力检测
• 3.2.4 PARP 的断裂情况
• 小结
• 3.3 Caspase-9 的活性在G-Rh2 增强Bet A 促肿瘤细胞凋亡时的变化
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表论文
• 作者简介
• 致谢
• 中文摘要
• Abstract