导读:本文包含了菲牛蛭素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:菲牛蛭素,动脉粥样硬化,血管新生,血管内皮生长因子
菲牛蛭素论文文献综述
赖吴芳,周维官,黄栎莹,张晓慧,黎渊弘[1]（2017）在《菲牛蛭素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的干预作用》一文中研究指出目的研究菲牛蛭素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化及斑块的干预作用。方法按照体重将高脂饲料喂养的雄性ApoE~(-/-)小鼠随机分为3组:模型组、对照组(给予辛伐他汀3mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)和实验组(给予菲牛蛭素400 U·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射);另设C57BL/6J小鼠为正常组(不予任何处理)。给药10周后,全自动生化仪检测各组小鼠血清叁酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平,以免疫组化法检测主动脉血管标记物CD34蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体(VEGFR-2)的表达。结果给药后,模型组、对照组和实验组血清TG分别为(1.57±0.12),(1.10±0.21),(0.95±0.20)mmol·L~(-1);这3组的TC分别为(19.93±2.24),(14.47±1.30),(11.90±2.38)mmol·L~(-1);这3组的LDL-C分别为(17.24±1.52),(13.94±1.46),(10.02±2.14)mmol·L~(-1);这3组的HDL-C分别为(4.05±1.81),(4.62±0.50),(3.38±0.24)mmol·L~(-1),与模型组相比,实验组差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组、对照组和实验组的斑块胶原相对含量分别为(21.48±2.44)%,(37.12±3.33)%,(51.60±2.47)%;这3组的CD34蛋白含量分别为(11.02±1.64)%,(6.82±0.66)%,(4.56±0.59)%;这3组的VEGF蛋白分别为(22.13±2.04)%,(16.20±0.65)%,(11.16±0.82)%;这3组的VEGFR-2蛋白表达分别为(17.90±0.73)%,(15.11±0.52)%,(10.56±0.60)%;与模型组相比,实验组差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论菲牛蛭素可改善ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化,稳定粥样斑块,其机制可能与减少VEGF和VEGFR-2表达、抑制斑块微血管新生有关。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2017年24期）
黄栎莹,刘言香,黄秋燕,黎渊弘[2]（2015）在《菲牛蛭素对凝血酶诱导血管内皮细胞活力和vWF、PAI-1、t-PA分泌量的影响》一文中研究指出目的:通过研究菲牛蛭素对凝血酶诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞活力和血管假性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)分泌量的影响,进一步明确菲牛蛭素抑制血栓形成作用机制。方法 :通过体外培养HUVEC,建立凝血酶细胞损伤模型,四甲基噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度凝血酶对细胞活力的影响,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测培养液中LDH含量,根据以上结果选取凝血酶最佳诱导浓度进行试验;肝素为阳性药,菲牛蛭素分终浓度为1U/mL、3U/mL、4U/mL 3个剂量组,MTT法测定菲牛蛭素对模型细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液中vWF、PAI-1、t-PA含量,LDH试剂盒检测培养液中LDH含量。结果:凝血酶15U/mL浓度组诱导作用明显;与凝血酶模型组比较:菲牛蛭素中剂量和大剂量组保护凝血酶对HUVEC的损伤的效果明显(P<0.01),菲牛蛭素小、中、大剂量组明显减少vWF、PAI-1分泌,增加t-PA含量(P<0.01)。结论:高浓度菲牛蛭素具有保护凝血酶对血管内皮细胞的损伤作用,对内皮细胞抗凝、纤溶和血小板活化具有调节作用,使内皮细胞的抗凝、纤溶功能趋于正常,抑制血小板活化。其作用可能与菲牛蛭素对抗凝血酶诱导内皮细胞的损伤,抑制vWF和PAI-1,增加t-PA的分泌释放,增加t-PA/PAI-1比值有关。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2015年06期）
刘言香[3]（2014）在《菲牛蛭素对凝血酶诱导内皮细胞活性、vWF、PAI-1、t-PA分泌、mRNA表达及对血管新生作用的研究》一文中研究指出目的目前，动脉血管狭窄、梗塞、血栓形成等引起的组织器官缺血性疾病成为危害人类健康的常见疾病之一。本实验拟对菲牛蛭素进行如下研究：通过凝血酶诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，建立凝血酶损伤模型；以肝素（heparin sodium，hep.）为阳性对照药，观察菲牛蛭素对凝血酶诱导HUVEC活性、对vWF、PAI-1、t-PA分泌及其mRNA表达活性的影响，这些研究结果有助于我们探讨菲牛蛭素在溶栓、抗凝及纤溶过程中的作用，为其应用于临床防治血栓性疾病提供新的理论依据。方法1.HUVEC的培养及鉴定用预先配制的RPMI-1640完全培养基体外培养HUVEC，用0.25%胰蛋白酶消化后制备悬液，将细胞悬液按比例移入新的培养瓶内进行传代培养。倒置显微镜下观察HUVEC的细胞形态，用兔抗人Ⅷ因子相关抗原鉴定方法对HUVEC进行内皮细胞鉴定。2.菲牛蛭素对凝血酶诱导HUVEC细胞活性的影响凝血酶损伤模型的建立选取生长状态良好的HUVEC进行实验。选择凝血酶终浓度为0、5U/ml、10U/ml、15U/ml、20U/ml、30U/ml、40U/ml分别作用于HUVEC，采用MTT法测定492nm处光密度值(OD492)，以其反应细胞活力；依照试剂盒操作方法，检测凝血酶作用于HUVEC后培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性，以反映细胞损伤程度。细胞活性的测定(1)菲牛蛭素(0.1U/ml~5U/ml)和肝素(1mg/ml~4mg/ml)分别作用于HUVEC，采用MTT比色法测定细胞活力，确定菲牛蛭素和肝素的实验浓度。(2)实验将分为六组进行，即空白对照组、凝血酶模型组、肝素组和菲牛蛭素小、中、大浓度组，加样培养24h后，收集细胞培养上清液-20℃冻存；MTT比色法测定细胞活力，以其反映细胞增殖活性；依照LDH试剂盒测定方法，检测培养上清液中LDH活性，以其反映细胞受损伤的程度。3.菲牛蛭素对凝血酶诱导HUVEC对vWF、PAI-1、t-PA mRNA表达活性的影响依照RNA提取方法提取RNA，利用琼脂糖凝胶电泳方法检测RNA的质量及其完整性，根据逆转录试剂盒逆转录方法合成cDNA。通过实时荧光定量PCR法，测定HUVEC对vWF、PAI-1、t-PAmRNA的相对表达量,从而反映菲牛蛭素对以上因子mRNA表达活性的影响。4.菲牛蛭素对凝血酶诱导HUVEC培养上清液中vWF、PAI-1、t-PA分泌量的影响解冻HUVEC培养上清液，以1000r/min的速度离心,弃沉淀物，酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定vWF、PAI-1、t-PA的释放量。结果1.HUVEC鉴定结果生长状态良好的HUVEC在显微镜下呈典型的铺路石样镶嵌排列；兔抗人Ⅷ因子相关抗原鉴定结果显示:HUVEC胞浆内可见棕黄色颗粒，核周密集、胞核蓝染，说明细胞内含有内皮细胞所特有的第Ⅷ因子相关抗原的存在，因此证实培养的细胞为内皮细胞。2.菲牛蛭素对凝血酶诱导HUVEC细胞活性的测定结果凝血酶最佳诱导浓度确定与空白组比较，凝血酶各组（5U/ml~40U/ml）细胞活力明显降低，随着凝血酶浓度增加培养上清液中LDH活性显着升高(P<0.01)，当凝血酶≧20U/ml时培养上清液中LDH活性趋于稳定。根据凝血酶对HUVEC的细胞活力和培养上清液中LDH活性的测试结果，选择凝血酶终浓度15U/ml作为最佳诱导浓度。细胞活性的测定结果(1)在一定浓度范围内，随着菲牛蛭素浓度增加，细胞增殖活性升高，0.25U/ml时细胞增殖活性最高，细胞增殖率达28.4%；继续增加菲牛蛭素浓度(≧0.3U/ml)细胞增殖活性降低，菲牛蛭素≧0.4U/ml时，与空白对照组比较细胞增殖活性差异无统计学意义(P>0.05)；当菲牛蛭素≧2U/ml时，与空白对照组比较，菲牛蛭素对HUVEC细胞活力呈现明显的抑制作用(P<0.01)，当菲牛蛭素终浓度为5U/ml时，细胞毒活性达到24.61%。(2)与凝血酶组比较，Hep.组和菲牛蛭素小、中、大浓度组细胞活力均升高,差异有显着的统计学意义(P<0.01)；Hep.组与菲牛蛭素小、中、大剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组（393.3±5.8）U/ml比较，凝血酶组和Hep.组培养上清液中LDH活性升高明显(P<0.01)，凝血酶组达(575.4±5.1) U/ml；与凝血酶组比较，菲牛蛭素中、大剂量组培养上清液中LDH活性显着降低(P<0.01)，大剂量组LDH活性最低，为(375.0±5.2)U/ml。3.RT-PCR检测菲牛蛭素对凝血酶诱导HUVEC对vWF、PAI-1、t-PAmRNA表达活性测定结果与空白对照组比较：凝血酶组vWF、PAI-1mRNA表达活性显着增加(P<0.01)、t-PA mRNA表达活性明显降低(P<0.01)，vWF mRNA相对表达量为空白对照组的1.67倍、PAI-1mRNA相对表达量为空白对照组9.28倍、t-PA mRNA相对表达量为空白对照组0.31倍；菲牛蛭素中、大浓度组t-PAmRNA表达活性明显增加(P<0.01)，最高可为空白对照组的2.58倍；与凝血酶组比较：Hep.组、菲牛蛭素小、中、大剂量组vWF、PAI-1mRNA表达活性显着降低(P<0.01)而t-PAmRNA表达活性明显增加(P<0.01)。4.HUVEC培养上清液中vWF、PAI-1、t-PA含量测定结果与空白对照组比较：凝血酶模型组和菲牛蛭素小剂量组vWF、PAI-1含量明显增加(P<0.01)、t-PA含量明显减少(P<0.01)，其中模型组vWF活性为(2122.4±231.3)U/ml、PAI-1含量为(59.90±7.80ng、t-PA含量为(6.68±0.66)ng；菲牛蛭素小、中、大剂量组t-PA含量明显增加(P<0.01)，在（16.20±4.37~17.27±4.73）ng范围之间。与凝血酶组比较：Hep.组、菲牛蛭素中、大剂量组vWF、PAI-1含量明显减少(P<0.01)，其中菲牛蛭素大剂量组vWF活性为（1361.2±198.1）U/ml，PAI-1含量为（42.30±6.58）ng；菲牛蛭素小、中、大剂量组t-PA含量明显增加(P<0.01),最高可达(17.27±4.73）ng，为模型组的2.6倍。结论1.凝血酶对HUVEC具有损害作用，能够破坏内皮细胞的完整性，诱导内皮细胞在抗血栓性能方面发生改变。2.菲牛蛭素对HUVEC细胞活力具有双向作用：低浓度菲牛蛭素对细胞增殖活力具有促进作用；高浓度菲牛蛭素对细胞增殖具有抑制作用，随着菲牛蛭素浓度增加，细胞毒活性增加。3.高浓度菲牛蛭素具有保护VEC免受凝血酶损伤作用，调节内皮细胞在抗凝、纤溶和血小板活化方面的作用，使内皮细胞的生理功能恢复正常。其作用可能主要与菲牛蛭素对抗凝血酶诱导内皮细胞的损伤，抑制vWF和PAI-1、增加t-PA的分泌及其mRNA的表达，增加t-PA/PAI-1比值相关。目的通过体外培养HUVEC，以人血管内皮细胞生长因子(VEGF)为阳性对照药，观察低浓度菲牛蛭素对HUVEC细胞活力及其分泌释放VEGF量的影响；以鸡受精卵为研究对象，制备鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型，观察菲牛蛭素对CAM血管新生作用的影响，为菲牛蛭素在治疗冠心病、心肌梗死、脑梗死等缺血性疾病方面提供新的观点。方法1.ELISA法测定菲牛蛭素对HUVEC培养上清液中VEGF分泌量的影响体外培养HUVEC,选择生长状态良好的细胞进行实验。实验分为空白对照组、阳性对照组(VEGF)及菲牛蛭素组。空白对照组不加任何处理因素，阳性对照组含20ng/ml的VEGF，根据实验1.第二部分低浓度菲牛蛭素对HUVEC细胞活力测定结果，选择菲牛蛭素终浓度为0.15U/ml、0.20U/ml、0.25U/ml、0.30U/ml、0.40U/ml五个浓度进行实验。将培养上清液稀释5倍后，ELISA法检测低浓度菲牛蛭素对HUVEC培养上清液中VGEF含量的影响。2.菲牛蛭素对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生作用的影响选择新鲜鸡受精卵置于全自动孵化箱内孵育至第8天，用手术刀片磨切标记面中上1/3画定开窗位置处，暴漏CAM制成假气室，制备CAM模型；孵化箱内稳定12小时后选择存活健康鸡胚随机分为无菌生理盐水组，菲牛蛭素终浓度5U/ml、11U/ml、22U/ml3个剂量组；每胚0.02ml加样于载体上，每天一次，共叁天；鸡胚孵育第12天，假气室内加入甲醇和甲醛的等量混合液2.5ml，室温静置30min，去掉蛋壳及卵壳膜，最大面积暴露CAM，用数码相机拍照；将CAM置于10×解剖显微镜下观察并计数血管数目。结果1.HUVEC培养上清液中VEGF含量检测结果与空白对照组比较：菲牛蛭素0.15U/ml、0.2U/ml、0.25U/ml、0.3U/ml剂量组培养上清液中VEGF含量明显增加(P<0.01)，其中0.25U/ml时含量最高，达（1.808±0.046）ng/ml,比空白对照组高80.7%。2.菲牛蛭素对CAM血管生成作用结果与生理盐水(NS)对照组比较：菲牛蛭素各组血管总数均明显增加(P<0.01)，其中大血管数、中血管数增加明显(P<0.01)，终浓度22U/ml组大血管数是生理盐水对照组的12倍，中血管数为对照组3.2倍；小血管的数目增加则不显着(P>0.05)。结论1.低浓度菲牛蛭素具有促进血管内皮细胞分泌释放VEGF的功能；2.菲牛蛭素对CAM血管新生具有促进作用。(本文来源于《广西医科大学》期刊2014-05-01）
刘言香,黎渊弘,钟小斌[4]（2014）在《菲牛蛭素对血管新生作用的研究》一文中研究指出目的:通过菲牛蛭素刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管,研究其对血管新生的影响。方法:体外培养HUVEC,以血管内皮生长因子(VEGF)作阳性对照药,采用四甲基噻唑蓝(MTT)比色法测定菲牛蛭素对HUVEC细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测菲牛蛭素对HUVEC培养液中VEGF释放含量的影响;制备CAM模型,生理盐水作对照,观察不同浓度菲牛蛭素对血管生成的影响。结果:菲牛蛭素终浓度0.25U/mL时细胞活力最强,与空白对照组比较增殖率为28.4%,且在此浓度培养液中VEGF含量最高,比空白对照组高出80.7%;与生理盐水对照组比较,CAM血管总数明显增加,大、中血管数增加显着(P<0.01),小血管数变化不明显(P>0.05),其中以22U/mL剂量组增生作用最明显。结论:菲牛蛭素对血管新生具有促进作用,这可能为缺血性疾病治疗提供依据。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2014年01期）
黄爱民,黎肇炎,廖共山,黄红坤,班建东[5]（2006）在《菲牛蛭素体内外抗凝实验研究》一文中研究指出目的:研究广西菲牛蛭中提取的两种菲牛蛭素———菲牛蛭素A(BufrudinA,BA)和菲牛蛭素B(BufrudinB,BB)在人体外及动物体内的抗凝作用。方法:观察菲牛蛭素在人体外及动物体内对部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响。结果:在体内外实验中,BA、BB均能明显延长活化部分APTT、PT及TT,但两者的叁个指标有明显差异性,其中BA对TT的作用最显着,BB则对PT的作用更强。结论:广西菲牛蛭中的抗凝物质BA、BB在体内外均有较强的抗凝活性。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2006年01期）
黄爱民[6]（2005）在《广西菲牛蛭中菲牛蛭素的分离纯化及体内外抗凝血实验》一文中研究指出目的:从广西菲牛蛭中分离纯化菲牛蛭素(Bufrudin),并对其物理、生化性质及体内外抗凝作用进行研究。方法:用30%硫酸铵分步沉淀、离子交换、凝胶过滤和高效液相色谱法分离纯化广西菲牛蛭消化液中的菲牛蛭素,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其蛋白分子量,等电聚焦法测定等电点,并测定活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)以及对凝血因子的影响。结果:从广西菲牛蛭中分离出两种特异凝血酶抑制剂—菲牛蛭素A(Bufrudin A ,BDA)、菲牛蛭素B(Bufrudin B ,BDB)。BDA 分子量约为15.2KD,等电点为3.97;BDB 分子量为14.6KD,等电点为4.61。紫外扫描发现,BDA在230nm处有最大吸收,而BDB的最大吸收则在200-210nm之间。在体内外凝血实验中,BDA、BDB 均能明显延长活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血时间(PT)及凝血酶原时间(TT),但二者的叁个指标有明显差异性。二者相比较,BDA 的凝血酶时间(TT)的作用较BDB 更为显着,而BDB 凝血酶原时间(PT)的作用强于BDA。对于凝血因子,BDA 对Ⅱ、Ⅷ、Ⅻ因子产生抑制作用,对Ⅴ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ因子无影响;BDB 则对Ⅱ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅻ因子产生抑制作用,对Ⅴ、Ⅸ、Ⅺ因子无影响。结果:广西菲牛蛭中的抗凝物质BDA、BDB 均有很强的抗凝活性。(本文来源于《广西医科大学》期刊2005-05-01）
菲牛蛭素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:通过研究菲牛蛭素对凝血酶诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞活力和血管假性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)分泌量的影响,进一步明确菲牛蛭素抑制血栓形成作用机制。方法 :通过体外培养HUVEC,建立凝血酶细胞损伤模型,四甲基噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度凝血酶对细胞活力的影响,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测培养液中LDH含量,根据以上结果选取凝血酶最佳诱导浓度进行试验;肝素为阳性药,菲牛蛭素分终浓度为1U/mL、3U/mL、4U/mL 3个剂量组,MTT法测定菲牛蛭素对模型细胞活力的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液中vWF、PAI-1、t-PA含量,LDH试剂盒检测培养液中LDH含量。结果:凝血酶15U/mL浓度组诱导作用明显;与凝血酶模型组比较:菲牛蛭素中剂量和大剂量组保护凝血酶对HUVEC的损伤的效果明显(P<0.01),菲牛蛭素小、中、大剂量组明显减少vWF、PAI-1分泌,增加t-PA含量(P<0.01)。结论:高浓度菲牛蛭素具有保护凝血酶对血管内皮细胞的损伤作用,对内皮细胞抗凝、纤溶和血小板活化具有调节作用,使内皮细胞的抗凝、纤溶功能趋于正常,抑制血小板活化。其作用可能与菲牛蛭素对抗凝血酶诱导内皮细胞的损伤,抑制vWF和PAI-1,增加t-PA的分泌释放,增加t-PA/PAI-1比值有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
菲牛蛭素论文参考文献
[1].赖吴芳,周维官,黄栎莹,张晓慧,黎渊弘.菲牛蛭素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的干预作用[J].中国临床药理学杂志.2017
[2].黄栎莹,刘言香,黄秋燕,黎渊弘.菲牛蛭素对凝血酶诱导血管内皮细胞活力和vWF、PAI-1、t-PA分泌量的影响[J].广西医科大学学报.2015
[3].刘言香.菲牛蛭素对凝血酶诱导内皮细胞活性、vWF、PAI-1、t-PA分泌、mRNA表达及对血管新生作用的研究[D].广西医科大学.2014
[4].刘言香,黎渊弘,钟小斌.菲牛蛭素对血管新生作用的研究[J].广西医科大学学报.2014
[5].黄爱民,黎肇炎,廖共山,黄红坤,班建东.菲牛蛭素体内外抗凝实验研究[J].广西医科大学学报.2006
[6].黄爱民.广西菲牛蛭中菲牛蛭素的分离纯化及体内外抗凝血实验[D].广西医科大学.2005