竹叶活性组分的含量筛选及高效制备工艺研究

论文摘要

竹子是禾本科,竹亚科多年生常绿植物,在我国有悠久的食用和药用历史。竹叶含有丰富的黄酮和多糖等生物活性组分,由于其具有优良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、及保护心血管等方面的生物学功效,目前已受到国内外市场的广泛关注。为了提高竹叶活性组分的高效利用,本论文通过建立竹叶黄酮和多糖活性组分的含量检测方法,筛选高含量的品种;重点研究竹叶黄酮和多糖活性组分的高效提取、分离纯化及其高效制备技术,取得了如下结果:选用了分光光度法和高效液相色谱法,对比研究竹叶中黄酮含量的差异性,确立了定量测定方法。NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法较为常用,但是测定结果偏高,以荭草苷、牡荆苷为标准品,HPLC法测定结果更为可靠、准确。对27个不同品种竹叶黄酮的含量进行了测定,得干竹叶黄酮的含量为0.50%～1.72%,即5.0～17.2mg/g,与文献[1]报道的范围基本相符。对不同品种竹叶多糖的含量进行了测定,得多糖含量在1.94%～5.69%之间,即19.4～56.9mg/g。淡竹,绿竹,毛竹分布广、黄酮和多糖含量较高,成为工业上提取竹叶黄酮和多糖活性组分的最佳原料;水竹黄酮含量高,鹅毛竹多糖含量特别高,但是分布较少,不适宜为工业原料。对于不同年龄的竹叶,老叶片中多糖含量明显大于新生嫩叶片;而黄酮的含量则因竹种不同存在明显差异。经单因素优选试验和正交试验,确定了竹叶黄酮的最佳提取工艺。水浴提取最佳条件为:温度50℃,提取时间2.0h,乙醇浓度60%（体积分数,下同）,固液比1∶20（g∶mL）,各因素对提取率的影响程度依次为:固液比>乙醇浓度>温度>时间;超声波提取最佳条件为:超声波作用时间30min,乙醇浓度60%,固液比1∶15（g∶mL）,各因素对提取率的影响程度依次为:提取时间>乙醇浓度>固液比。通过对几种树脂的比较,AB-8树脂的分离纯化效果最好;通过静态解吸试验,70%的乙醇效果好于90%的乙醇,乙醇的解吸效果要好于甲醇;树脂柱吸附过程中,吸附和解吸附都是渐变的曲线过程,用10%～90%乙醇解吸附剂梯度洗脱时,40%乙醇洗脱出最多的黄酮,解吸附量为47.0mg（47.1cm3的装柱体积）。竹叶提取物经过组合膜处理后变得澄清透明,色泽鲜亮;在试验所用提取液体积为90L左右,提取液浓度为9.32g/L过陶瓷膜、7.08g/L过超滤膜时,膜使用状况良好,流速稳定,没有发生浓差极化现象;膜处理后的黄酮提取物,再用树脂和聚酰胺树脂处理,聚酰胺纯化效果明显好于AB-8,80%乙醇洗脱,黄酮含量能够达到40.35%;竹叶中试水提取后,经无机和有机膜处理得到多糖提取物,再经85%以上乙醇沉淀,多糖含量提高到40.20%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.1.1 研究背景
• 1.1.2 研究目的和意义
• 1.1.3 项目来源与经费支持
• 1.2 研究现状与评述
• 1.2.1 国内外研究现状
• 1.2.2 国内竹叶活性组分加工现状
• 1.3 研究目标和主要研究内容
• 1.3.1 研究目标
• 1.3.2 主要研究内容
• 1.4 研究技术路线
• 第二章 竹叶黄酮定量分析方法比较研究
• 2.1 试验部分
• 2.1.1 试验仪器、试剂、标准溶液及显色剂
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 比色法标准曲线的绘制
• 2.2.2 HPLC 法标准曲线绘制
• 2.2.3 不同方法测定样品黄酮含量的比较
• 2.3 小结
• 第三章 不同品种竹叶活性组分的筛选
• 3.1 试验部分
• 3.1.1 主要原料、试剂和仪器
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 葡萄糖标准曲线
• 3.2.2 不同品种竹叶中高通量黄酮的筛选
• 3.2.3 不同品种竹叶中高通量多糖的筛选
• 3.3 小结
• 第四章 竹叶黄酮提取工艺研究
• 4.1 试验部分
• 4.1.1 试验原料、仪器及试剂
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 水浴提取工艺条件筛选
• 4.2.2 超声波提取工艺条件筛选
• 4.3 小结
• 第五章 竹叶黄酮的树脂选择性吸附
• 5.1 试验部分
• 5.1.1 试验原料、仪器及试剂
• 5.1.2 试验方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 不同树脂的特征参数比较
• 5.2.2 树脂静态吸附、解吸附
• 5.2.3 树脂吸附柱纯化黄酮试验结果
• 5.3 小结
• 第六章 膜组合分离制备高含量竹叶黄酮和多糖的研究
• 6.1 试验部分
• 6.1.1 试验原料、仪器及试剂
• 6.1.2 试验方法
• 6.2 结果与讨论
• 6.2.1 截留率回收率流通量
• 6.2.2 黄酮和多糖的精制
• 6.3 小结
• 第七章 主要结论
• 参考文献
• 在读期间的学术研究
• 致谢