论文摘要
目的：本研究旨在探讨CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）及其转录因子FoxP3在儿童传染性单核细胞增多症（Infectious mononucleosis IM）发病中的作用；观察TLR2（Toll-like receptors， TLRs）和TLR9在传染性单核细胞增多症患儿外周血单个核细胞上的表达以及血浆IL-2、IL-10、TGF-β1、IFN-γ水平，分析其与IM发病的关系，为从细胞因子角度认识IM发病机制提供实验依据。方法：研究对象为2010年4月至2011年1月我院（四川省人民医院）儿科诊治的初次发病的急性期传染性单核细胞增多症患儿35例（IM急性期组），IM恢复期组35例（经治疗临床症状体征完全消失，病程一月时）以及健康对照儿童35例（对照组），三组儿童在年龄、性别上比较无统计学意义。1、采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2mRNA、TLR9mRNA、FoxP3mRNA的表达。2、采用液相芯片技术检测血浆IL-2、IL-10及IFN-γ的水平;双抗体夹心ABC-ELISA法检测血浆TGF-β1的水平。3、运用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+调节性T细胞的表达率。4、统计学处理采用SPSS16.0统计软件进行分析，首先对数据进行正态性及方差齐性检验，运用one-way ANOVA比较三组儿童所测指标的差异，数据以均数加减标准差（±s）表示。结果：1、IM急性期组儿童外周血单个核细胞TLR2mRNA相对表达水平（4.03±0.56）显著高于对照组（2.22±0.57）及恢复期组（2.76±0.83）儿童TLR2mRNA相对表达水平（2.22±0.57）（P＜0.01）；2、IM急性期组儿童外周血单个核细胞TLR9mRNA相对表达水平（8.88±1.56）显著高于对照组（3.63±1.30）及恢复期组（5.34±1.60）儿童TLR9mRNA相对表达水平（P＜0.01），3、IM急性期组儿童外周血单个核细胞FoxP3mRNA相对表达水平（2.82±0.90）显著低于对照组儿童FoxP3mRNA相对表达水平（4.65±1.23）（P＜0.01），IM恢复期组儿童外周血单个核细胞FoxP3mRNA相对表达水平（4.11±1.37）与对照组儿童相对表达水平（4.65±1.23）比较无统计学意义（P＞0.05）。4、IM急性期组儿童血浆细胞因子IL-2、IL-10的表达水平分别为：（42.97±16.36pg/ml）、（39.84±3.95pg/ml），对照组儿童血浆细胞因子IL-2、IL-10的表达水平分别为：（84.02±28.67pg/ml）、（69.86±3.95pg/ml），IM恢复期组儿童血浆细胞因子IL-2、IL-10的表达水平分别为：（58.85±19.42pg/ml）、（53.34±5.21pg/ml），IM急性期组较对照组及恢复期组降低（P＜0.01）。IM急性期组儿童血浆细胞因子IFN-γ（108.82±14.34pg/ml）、TGF-β1（488.15±117.5pg/ml）的表达水平较对照组IFN-γ（22.00±9.74pg/ml）、TGF-β1（253.75±72.6pg/ml）及恢复期组IFN-γ（49.82±11.55pg/ml）、TGF-β1（318.62±90.1pg/ml）增高（P＜0.01）。5、IM急性期组儿童CD3+、CD3+CD4+、 CD3+CD8+、 CD4+/CD8+、 CD4+CD25+测定结果分别为（80.66±4.88%）、（16.53±5.55%）、（62.71±8.76%）、（0.26±0.12）、（2.38±1.32%），对照组儿童CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+测定结果分别为（63.04±5.51%）、（37.98±4.20%）、（27.71±6.52%）、（1.37±0.45）、（7.85±1.97%），IM急性期组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），IM恢复期组儿童CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、 CD4+/CD8+、测定结果分别为（74.25±7.33%）、（29.89±6.03%）、（42.25±7.33%）、（0.71±0.19），与急性期组比较差异有统计学意义（P＜0.01）， IM恢复期组儿童CD4+CD25+测定结果为（6.81±1.84%），与对照组儿童（7.85±1.97%）比较无统计学意义（P＞0.05）。6、CD4+CD25+Treg与FoxP3mRNA的表达呈正相关，其相关系数为0.823（P＜0.05）。结论：1、IM急性期存在明显的免疫失衡，即CD3+CD8+明显增高，CD3+CD4+及CD4+/CD8+明显降低；IM免疫失衡的原因之一可能是由于CD4+CD25+Treg数量降低及其转录因子FoxP3表达下调导致的免疫抑制功能不足所致。本研究从调节性T细胞角度为进一步阐明IM的发病机制提供了实验依据；2、 IL-2、 TLR2和TLR9通过对CD4+CD25+Treg的调节参与了IM发病，并对CD4+CD25+Treg可能存在调控作用；3、细胞因子IFN-γ、IL-2、TGF-β1及IL-10参与了IM发病，本研究从细胞因子角度为认识IM发病机制提供了实验依据。
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