孙学青韩景银刘兆军（山东省东营市人民医院检验科山东东营257091）
【摘要】目的分析电化学发光定量检测乙肝五项指标与定性检测结果的差异及定量检测的临床意义。方法对292份血标本分别采用ELISA法定性检测和电化学发光法定量检测乙肝五项指标。结果ELISA法和电化学发光法分别检出9种和12种乙肝五项指标模式，电化学发光法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的阳性检出率均高于ELISA法（P均<0.05）。结论电化学发光定量检测乙肝五项指标敏感性高于定性法并且具有良好的重复性，适合用于HBV感染的早期诊断以及临床抗病毒药物治疗疗效预测和评估。
【关键词】定量检测乙肝五项指标临床意义
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）05-0389-03
ElectrochemiluminescenceanalysisandclinicalsignificanceofthequantitativedetectionofhepatitisBfiveindicators
SunXue-qing,HanJing-yin,LiuZhao-jun
(DongyingCity,ShandongProvince,People'sHospitalLaboratoryshandongDongying257091)
【Abstract】ObjectiveToanalyzethetheelectrochemiluminescencequantitativedetectionofhepatitisBfiveindicatorsandqualitativedifferencesandquantitativedetectionofthetestresultsofclinicalsignificance.Methods292bloodsamplesusingELISAthelegaldetectionandelectrochemiluminescencequantitativedetectionofhepatitisBfiveindicators.ResultsTheELISAandECLIAweredetected9and12hepatitisBfiveindicatorsmode,theECLIAHBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAbpositivewerehigherthantheELISAmethod(P<0.05).ConclusionElectrochemiluminescencequantitativedetectionofhepatitisBfiveindicatorsmoresensitivethanthequalitativemethodwithgoodreproducibility,andsuitableforuseintheearlydiagnosisofHBVinfectionandtheclinicalantiviraltherapypredictionandassessment.
【Keywords】QuantitativedetectionHepatitisBfiveindicatorsClinicalsignificance
乙肝病毒（HBV）在我国以及整个亚洲地区有很高的感染率，根据世界卫生组织（WHO）的统计，全世界1/3的人曾感染过HBV，其中约2%-5%为慢性感染[1]。在我国法定报告的传染病中，多年来乙型肝炎的发病数和发病率一直高居前列[2]。HBV感染人体后在组织细胞与血液中会出现各种类型的感染标志物，通过对这些感染标志物的检测分析，可以对HBV的诊断、鉴别诊断、传染性的评估、疾病的预后与转归、治疗效果的评估能够作出较为合理的分析与判断。其中乙肝五项指标是应用于临床最早的乙肝标志物之一[3]。
1材料和方法
1.1标本来源收集2012年1月—2012年9月在我院门诊和病房就诊患者血清标本292份，均抽取空腹静脉血3ml及时分离血清，分别定性和定量检测乙肝五项指标。
1.2试剂罗氏公司原装进口配套试剂、定标液、质控品用于定量法；北京科卫临床诊断试剂公司生产的ELISA法定性试剂盒及质控品。
1.3仪器罗氏Cobas601全自动电化学发光免疫分析系统，美国Bio-rad680酶标仪及1575型洗板机。
1.4方法乙肝五项指标定量的电化学发光法和定性的ELISA法检测，均严格按照试剂盒各自说明书和《全国临床检验操作规程》中的要求，分别对292份标本检测。
1.5结果判定ELISA定性结果参照试剂说明书中的判定方法，电化学发光定量检测结果以HBsAg≥1coI、HBsAb≥10IU/L、HBeAg≥1coI、HBeAb≤1coI、HBcAb≤1coI判定为阳性，反之为阴性。
1.6统计学分析采用SPSS12.0软件统计分析，率的比较行X2检验，检验水准a=0.05。
2结果
2.1两法乙肝五项指标模式检出情况见表1，定性法和定量法分别检出9种和12种模式。
表1两法乙肝五项指标模式检出情况
注：+示阳性，-示阴性
2.2两法乙肝五项指标阳性检出率见表2，定量法乙肝五项指标阳性检出率均高于定性法（P均<0.05）。
表2两法乙肝五项指标阳性检出率
注：两法阳性检出率比较P均<0.05。
3讨论
3.1电化学发光免疫分析技术是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫以后的新一代标记免疫测定技术。它不使用放射性物质及在灵敏度、快速检测、自动化等方面的综合优势和潜力，已广泛深入应用于生物医学，特别是临床医学的各个领域中，促进和提高了临床医学的诊断水平。本文分析显示乙肝五项指标定量与定性检测阳性率差异均有统计学意义，并且定量法比定性法多检出了3种少见模式。其原因可能是电化学发光使用的固相载体是有磁性的微粒并且表面积大、吸附率高、标记物循环利用，发光时间延长，强度增加，使检测灵敏度显著提高[4]。另外，随着HBV病毒新变异株的不断出现，检验方法的不断改进完善，也可能导致乙肝五项指标模式的多样化。EILSA定性检测乙肝五项标志物作为诊断HBV是否感染的依据，由于钩状效应和敏感度低的原因，常造成HBV感染的漏诊，并且无法定量，不能得知其真正的浓度，无法完成HBV感染的动态观察以及低水平HBV感染指标的检出。HBV血清乙肝五项指标定量检测，能较为准确地反映其血清中的含量，可以间接反映体内HBV复制活跃程度，对临床药物疗效评价具有重要意义。
3.2电化学发光定量检测乙肝五项指标的临床意义
3.2.1HBsAg的定量检测HBsAg是HBV感染最早出现于血循环中的标志物，并可以长时间高浓度存在，因此它是一个最为常用的HBV感染标志物。在急性HBV感染的恢复期，随着病毒的清除，大多数患者体内HBsAg在感染后4-6个月清除。如HBsAg持续6个月均可检出，提示HBV慢性感染[5]。在急性乙肝早期能及早检出HBsAg，确证HBV感染，缩短窗口期，并且可发现低浓度HBsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低；高浓度的HBsAg可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性[6]。目前的研究表明HBsAg定量检测在抗病毒治疗疗效预测中具有一定的作用[7]。治疗前HBsAg定量疗效的预测：部分临床研究认为，治疗前HBsAg定量结果与聚乙二醇干扰素a-2a/或联合拉米夫定治疗的持续病毒学应答相关[8]。治疗过程中HBsAg定量：研究认为治疗过程中，早期快速的HBsAg下降是聚乙二醇干扰素a-2a治疗时病毒学应答的预测指标[9]。另外，治疗过程中HBsAg水平对病毒清除也有预测价值。我国研究小组的研究也显示，应用聚乙二醇干扰素a-2b治疗HBeAg阳性的慢性乙肝患者时，治疗12周和治疗24周HBsAg定量的结果对HBeAg血清学转换具有很强的预测价值[10]。
3.2.2HBsAb的定量检测HBsAb作为保护性抗体，其持续存在意味着HBV的清除和乙肝的恢复。HBsAb是唯一指示乙肝疫苗免疫效果的血清学标志物，其浓度越高免疫力越强，持续时间亦越长，一般认为HBsAb≥10IU/L有免疫保护作用。HBsAb定量分析对乙肝疫苗免疫力的评价和高危人群预防免疫具有重要意义，特别是在少年儿童预防乙肝方面[11]。
3.2.3HBeAg的定量检测HBeAg阳性可作为HBV复制和传染性高的指标。HBeAg转阴而HBeAb转阳，称为HBeAg血清学转换。临床上常将HBeAg血清学转换作为HBeAg阳性患者抗病毒治疗的治疗终点。HBeAg反映HBV的复制状态，较HBVDNA更能反映机体对HBV的免疫状况和治疗效果的稳定性。HBeAg定量检测有助于预测HBeAg的转换，其准确性高于HBVDNA。临床试验结果表明，HBeAg水平低的慢性乙肝患者应用聚乙二醇干扰素a-2a治疗更易发生HBeAg血清学的转换；HBeAg高水平的患者用聚乙二醇干扰素a-2a治疗24周，仅4%发生了HBeAg血清学转换；而产生HBeAg血清学转换的患者，在治疗期间HBeAg水平持续降低，并在治疗结束后24周内保持了最低水平[12]。
3.2.4HBeAb的定量检测定量分析HBeAg和HBeAb的浓度变化，可反映病情变化和治疗效果，能明确检测HBeAg向HBeAb转换的时期，既表现为HBeAg下降和HBeAb浓度升高的过程。高浓度HBeAb可提示病情好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）则可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关[13]。HBeAg消失后出现HBeAb，表明病毒的复制减弱，传染性减低，急性HBV感染趋向恢复。无临床症状的乙肝病毒携带者也会出现HBeAb，但HBeAb依然存在传染性。
3.2.5HBcAb的定量检测HBcAb提示HBV既往感染。HBcAb是HBV感染后最早出现的抗体，在10%-20%的慢性乙肝急性发作患者中浓度也会升高到可检出的水平[14]。HBcAb浓度的高低，可反映病毒感染状态。高浓度HBcAb提示乙肝急性感染，恢复期的浓度降低。慢性乙肝呈HBcAb持续高浓度状态，而低浓度HBcAb一般为恢复期。
乙型肝炎的发生、发展、疗效、预后是一个动态变化的过程，定量检测乙肝五项指标的浓度，能准确地反映乙型肝炎的临床变化，为临床医师早期诊断以及动态观察抗病毒物治疗疗效预测和评估提供了依据。
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