肿瘤浸润Treg细胞的化疗敏感性及其与乳腺癌预后关系的研究

论文摘要

[目的]肿瘤局部免疫微环境对肿瘤的演进起着不容忽视的重要作用。本研究旨在联合评价浸润性乳腺癌肿瘤微环境中FOXP3+Tregs和CD8+CTLs细胞浸润的预后意义及其与乳腺癌分子分型之间的关系；探讨化疗对肿瘤微环境中浸润的免疫抑制核心细胞Treg的作用,初步评价化疗后肿瘤局部免疫与化疗反应及预后之间的关系。[方法]1270例末接受任何术前抗肿瘤治疗的浸润性乳腺癌患者肿瘤组织中,采用免疫组织化学的方法检测FOXP3+Tregs细胞和CD8+CTLs细胞,分析二者的密度、分布以及比率与乳腺癌患者的预后、临床病理学特征以及分子分型之间的关系。另外选择132例接受新辅助化疗的浸润性乳腺癌患者,将其化疗前穿刺组织及术后切除肿瘤组织行病理字对比分析,参照Miller-Payne（?）组织学分级系统进行病理化疗反应分级；同样采用免疫组织化学的方法检测化疗前后不同组织分布的FOXP3+Tregs细胞,分析其对化疗的敏感性及其与化疗反应、乳腺癌预后之间的关系。[结果]1.乳腺癌肿瘤微环境中浸润淋巴细胞在肿瘤内部和瘤周的分布方式不同：肿瘤内部浸润淋巴细胞多呈弥漫、散在分布；相邻瘤周组织中淋巴细胞丰富、集中分布,多呈淋巴样聚集,可见淋巴滤泡样结构。2.肿瘤内高CD8+和FoXP3+淋巴细胞浸润与多种不良的临床病理学特征相关,包括：高病理组织学分级, ER、PR阴性表达（P<0.0001）。此外,瘤内高Treg细胞浸润还与HER2/neu蛋白的过表达相关（P<0.0001）,与总生存及无进展生存之间均显著负相关（P<0.0001）。3.与瘤内浸润不同,瘤周浸润两种淋巴细胞的比值CD8+/FOXP3+与总生存及无进展生存显著正相关（P<0.001）。4.多因素分析发现：上述与患者生存相关的两个肿瘤浸润淋巴细胞变量即瘤内FOXP3+Treg浸润和瘤周CD8+/FOXP3+,均可作为生存及无进展生存的独立预测指标（P<0.05）。5.瘤内FOXP3+Treg浸润和瘤周CD8+/FOXP3+的比值在5种不同分子亚型之间存在显著的统计学差异（P<0.0001）。且随着5种乳腺癌分子亚型的预后由好至差的顺序（从Luminal A型、Luminal B型、Luminal-HER2、HER2-enriched至Basal-like型）,瘤内FOXP3+Treg的浸润密度依次升高；瘤周CD8+/FOXP3+的比值在三种Luminal分子亚型显著高于两种非Luminal亚型乳腺癌。6.132例浸润性乳腺癌患者在接受新辅助化疗后,瘤周较肿瘤内浸润的FOXP3+ Treg细胞对化疗更敏感；且不同分子分型的乳腺癌瘤周浸润的Treg细胞对化疗药物的敏感性也不同,其中HER2-enriched和Basal-like型乳腺癌瘤周Treg细胞数量下降具有统计学意义（P=0.035；P＝0.004）7.化疗后瘤周而非瘤内浸润的FOXP3+Treg细胞是病理完全缓解（pCR）的独立预测因子,但多因素分析发现瘤内而非瘤周浸润的FOXP3+Treg细胞是乳腺癌总生存及无进展生存的独立预测指标,且当我们将瘤内Treg细胞浸润和化疗反应同时进行预后多因索分析时发现,瘤内Treg细胞浸润甚至较化疗反应对预后具有更高的相对危险度及预后预测价值。[结论]乳腺癌肿瘤微环境中浸润的Tregs和CTLs细胞的预后意义同时取决于二者的分布、密度及比率。瘤内FOXP3+Treg浸润和瘤周CD8+/FOXP3+的比值是乳腺癌总生存及无进展生存的独立预测指标,并且与乳腺癌分子分型及其预后相关,这可能为临床提供分层的、更加个体化的预后预测和治疗方案,尤其是对于并不适用激素治疗和HER2/neu靶向治疗且预后较差的basal-like型乳腺癌的治疗提供潜在的免疫靶标。在接受新辅助化疗后,瘤周较瘤内浸润的FOXP3+ Treg细胞对化疗更敏感,是化疗后pCR的独立预测因子。但无论化疗前后,均为瘤内而非瘤周浸润的FOXP3+Treg细胞是乳腺癌的独立预后因子,提示能够有效降低瘤内Treg细胞密度的免疫调节／免疫治疗或化疗方案,抑或几种治疗的联合应用对于乳腺癌预后的改善可能具有更加显著的作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语/符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、肿瘤微环境中Treg和CTL细胞浸润与乳腺癌分子分型及预后的关系
• 1.1 对象和方法
• 1.1.1 实验试剂
• 1.1.2 实验仪器
• 1.1.3 研究对象
• 1.1.4 研究方法
• 1.1.5 乳腺癌分子分型标准
• 1.1.6 随访
• 1.1.7 统计学分析
• 1.2 结果
• +CTL和FOXP3⁺Treg细胞数目和分布特征'>1.2.1 乳腺癌浸润CD8⁺CTL和FOXP3⁺Treg细胞数目和分布特征
• +CTL和FOXP3⁺Treg细胞浸润与乳腺癌临床病理学特征的关系'>1.2.2 CD8⁺CTL和FOXP3⁺Treg细胞浸润与乳腺癌临床病理学特征的关系
• +CTL和FOXP3⁺Treg细胞浸润与乳腺癌预后'>1.2.3 CD8⁺CTL和FOXP3⁺Treg细胞浸润与乳腺癌预后
• 1.2.4 独立预后淋巴细胞变量与乳腺癌分子分型的关系
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 二、肿瘤浸润Treg细胞的化疗敏感性及其与化疗反应、乳腺癌预后的关系
• 2.1 对象和方法
• 2.1.1 实验试剂
• 2.1.2 实验仪器
• 2.1.3 研究对象
• 2.1.4 研究方法
• 2.1.5 随访
• 2.1.6 统计学分析
• 2.2 结果
• 2.2.1 132例接受新辅助化疗乳腺癌患者的临床病理学特征
• +Treg细胞化疗前后的变化'>2.2.2 肿瘤内及瘤周FOXP3⁺Treg细胞化疗前后的变化
• +Treg细胞数量及化疗前后的变化与化疗反应之间的关系'>2.2.3 肿瘤内及瘤周FOXP3⁺Treg细胞数量及化疗前后的变化与化疗反应之间的关系
• +Treg细胞浸润与乳腺癌预后'>2.2.4 化疗后肿瘤内及瘤周FOXP3⁺Treg细胞浸润与乳腺癌预后
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 全文结论
• 论文创新点
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• +CD25⁺Treg细胞与肿瘤免疫'>综述 CD4⁺CD25⁺Treg细胞与肿瘤免疫
• 综述参考文献
• 致谢