槲皮素纳米脂质载体制剂及其经皮给药的研究

论文摘要

槲皮素（Quercetin, QT）是一种天然的黄酮类化合物,具有抗肿瘤、抗自由基抗氧化、降血压、降血脂、抗心律失常、抗血小板聚集、抗贫血、抗炎抗过敏等多种生物活性及药理作用。近年来,槲皮素作为一种自由基清除剂局部给药的研究日益引起人们的重视。但由于其水溶性差,对光照及温度敏感,且吸收较差,限制了其在临床上的应用。纳米脂质载体（Nanostructured lipid carriers, NLC）是一种新型脂质纳米粒。采用混合类脂为材料,即将液体脂质混合到固体脂质中制备而得。液相的加入,可扰乱固体脂质规则的晶格结构,增加纳米粒结构中不规则的晶型比例,使承载药物的空间增加,从而提高载体的载药能力。纳米脂质载体制剂用于局部给药时具有如下优点：生物相容性好,对皮肤刺激性小；纳米级颗粒能在皮肤上形成粘附性的薄膜,通过闭塞效应提高角质层的水合程度,从而增加药物的透皮效果；载体材料本身具有经皮吸收促进剂的作用；能够提高药物的稳定性；具有缓控释作用等。本实验采用乳化蒸发-低温固化的方法制备槲皮素纳米脂质载体（Quercetin-loaded nanostructured lipid carriers, QT-NLC）。在单因素考察的基础上,以主药用量、表面活性剂的浓度、助表面活性剂的用量、单硬脂酸甘油酯与硬脂酸的比例,液体脂质占总脂质的比例、乳化温度为考察因素,以纳米粒的包封率和载药量作为质量指标,通过均匀设计对处方和制备工艺进行了优化。优化制备的QT-NLC在透射电镜下分散性良好,颗粒大小均匀,表面圆整,平均粒径为264.5nm,平均包封率为89.95%,平均载药量为3.05%,Zeta电位为-20.10mV,pH值为4.65。通过透析法考察了QT-NLC的体外释药行为,结果表明,其体外药物释放符合双相动力学方程,回归方程为100-Qn=100.786e0·0775t+53.293e0.0227t（rα=0.9939,r-=0.9956）。初步稳定性研究表明QT-NLC应该低温避光储存,在冷藏条件（4℃左右）下放置3个月稳定性良好。利用Franz扩散池对QT-NLC进行了离体经皮渗透实验,结果表明给药12h,槲皮素丙二醇溶液和QT-NLC的单位面积累积渗透量分别为9.00±1.19和31.89±3.15μg·cm-2；其稳态透皮速率Js分别为1.153±0.11μg·cm-2·h-1和3.503±0.27μg·cm-2·h-1,均符合零级动力学方程,表明QT-NLC能够显著提高药物的经皮渗透速率和经皮渗透量。在体经皮给药12h,QT-NLC在表皮和真皮中的药物滞留量分别达到了槲皮素丙二醇溶液的1.52倍和3.03倍,可见QT-NLC能够显著提高药物在表皮和真皮中的滞留量,从而增强药物的抗炎和抗氧化的效果。通过对给药后小鼠皮肤的病理切片观察发现,经过QT-NLC处理的小鼠皮肤,角质层溶胀,疏松,有较为明显的剥落分层现象。同时,整个表皮厚度有所增加,基底层和棘层细胞排列混乱,细胞间隙明显加大。预示着NLC可以削弱角质层的屏障作用,进而增加药物的渗透。

论文目录

• 目录
• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 前言
• 一、槲皮素简介
• 二、纳米脂质载体
• 三、本文的研究目的
• 第一章 处方前研究工作
• Ⅰ 材料与仪器
• Ⅱ 方法与结果
• 1 槲皮素体外分析方法的建立
• 2 NLC中槲皮素的含量测定
• 3 槲皮素的溶解性
• 4 槲皮素的油水分配系数
• Ⅲ 讨论
• Ⅳ 本章小结
• 第二章 槲皮素纳米脂质载体制剂的制备工艺研究
• Ⅰ 材料与仪器
• Ⅱ 方法和结果
• 1 制备方法的选择
• 2. 包封率和载药量测定方法的选择
• 3 QT-NLC工艺条件的单因素考察
• 4 均匀设计优化QT-NLC处方与工艺
• 5 QT-NLC胶体溶液优化处方的验证及质量评价
• Ⅲ 讨论
• Ⅳ 本章小结
• 第三章 槲皮素纳米脂质载体制剂经皮渗透实验
• Ⅰ 材料与仪器
• Ⅱ 方法与结果
• 1 分析方法确证
• 1.1 色谱条件
• 1.2 样品处理
• 1.3 标准曲线的制备
• 2 槲皮素纳米脂质载体制剂的经皮渗透研究
• 2.1 离体经皮渗透实验
• 2.2 在体经皮渗透实验
• Ⅲ 讨论
• Ⅳ 本章小结
• 第四章 皮肤渗透促进作用机理研究
• Ⅰ 材料与仪器
• Ⅱ 方法与结果
• 1 组织病理学切片观察
• 1.1 HE染色
• 1.2 显微观察结果
• Ⅲ 讨论
• Ⅳ 本章小结
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录
• 学位论文评阅及答辩情况表