论文摘要
[目的]建立在位子宫内膜细胞体外分离培养模型,分析血管内皮生长因子（VEGF）在人类子宫内膜的表达及对其影响的调控因素,探讨VEGF在子宫内膜异位症发生发展中的作用。[方法]选择因子宫腺肌症行（次）全子宫切除手术的病例8名,手术中取其子宫内膜,经酶解、过滤、贴壁纯化等技术体外分离培养子宫内膜间质细胞,并对传代后的细胞施加刺激物,分成常氧（O2分压19-21Kp）和缺氧（O2分压8-11Kp）组,每组用3种条件:雌二醇(E2,浓度10-8mol/L)、黄体酮(P,浓度5×10-7mol/L)、E2+P(E2浓度为10-8mol/L,P浓度为5×10-7mol/L)干预并用单纯培养基作为对照,作用24小时,撤离刺激条件后同一时间点分别收集各种因素作用后的细胞及相应上清液,应用实时荧光定量RT-PCR（Real-Time RT-PCR）方法检测细胞VEGF mRNA含量。[结果] 8例标本培养间质细胞,6例成功,在位子宫内膜中VEGF的表达在缺氧及类固醇激素的影响下上调明显。实时荧光定量RT-PCR方法细胞中VEGF mRNA相对表达量:缺氧组在E2、P、E2+P干预下及单纯培养基空白对照分别为7.22±1.09、7.92±1.10、7.87±1.13及8.23±1.18;常氧组依次分别为6.07±1.04、6.75±1.02、6.19±1.06及9.94±1.34。两组间干预前后对比,缺氧后细胞VEGF mRNA明显升高（P<0.05）,组内比较,雌、孕激素单独及联合干预下VEGF mRNA含量较空白对照升高（P<0.05）。并且发现,缺氧联合类固醇激素刺激与单一缺氧或激素作用相比,不增加细胞VEGF mRNA的表达（P>0.05）。[结论]我们实验采用的方法获得在位子宫内膜间质细胞作为体外细胞模型简便高效;在位子宫内膜表达一定水平VEGF,类固醇激素、缺氧可影响其表达强度,缺氧是子宫内膜VEGF表达上调的重要影响因素,且不受同时应用的雌、孕激素的影响;雌、孕激素作用亦可上调VEGF的表达。有望通过调节子宫内膜VEGF表达的强度,降低其表达量,从而从预防的角度诠释子宫内膜异位症的治疗。
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标签：血管内皮生长因子论文; 子宫内膜间质细胞论文; 缺氧论文; 孕激素论文;