论文摘要
目的：本研究利用“中药血清药理学”方法，观察中药平瘤康体外对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用，并进一步从细胞动力学方面探讨中药平瘤康抗肿瘤的作用机制。方法：实验一、根据血清药理学方法，将清洁级wistar大鼠随机分为两组，灌服平瘤康汤剂或生理盐水，制备血清。根据血清添加量的不同，将上述方法获取的血清分为2.5％，5％，10％和20％四组。各组分别干预C6胶质瘤细胞24h、48和72h。用倒置显微镜观察不同时期的肿瘤细胞生长情况。采用MTT法，观察不同血清添加量不同时间对C6胶质瘤细胞增殖的影响。实验二、根据实验一的结果，选取抑制作用最强的两个血清添加量组，即10％和20％组和抑制作用最明显的两个时间段，即48h和72h。继续培养C6胶质瘤细胞，收集足够量的细胞，上流式细胞仪检测，分析细胞周期的分布。结果：1．光镜下，中药组可见有细胞凋亡的典型形态学变化出现，如细胞体积缩小、变圆等，空白对照组和对正常血清照组则少见有凋亡形态的细胞出现。随着血清添加量的增加，平瘤康对C6胶质瘤细胞抑制效应逐步增加。2．当用10％的血清添加量干预48h后，与正常血清对照组相比，中药干预组的G0／G1期细胞构成比变化不明显(P＞0.05)，S期细胞构成比则减少(P＜0.05)。当用20％的血清添加量干预48h后，与正常血清对照组相比，中药干预组的G0／G1期细胞构成比增加(P＜0.05)，S期细胞构成比则减少(P＜0.01)。当用10％的血清添加量干预72h后，正常血清对照组的细胞周期分布呈典型的恶性肿瘤特征，与之相比，中药干预组的G0／G1期细胞构成比增高(P＜0.05)，而S期细胞构成比明显减少(P＜0.01)。当血清添加量增加到20％时，细胞周期分布变化更为明显，G0／G1期细胞构成比明显增加(P＜0.01)，S期细胞构成比明显减少(P＜0.01)。结论：1．实验一研究表明中药平瘤康体外能抑制C6胶质瘤细胞增殖，平瘤康对胶质瘤的抑制效应呈现量效关系。2．实验二研究表明中药平瘤康组C6胶质瘤细胞合成前期(G1期)细胞的构成比较正常血清对照组高，合成期(S期)细胞的构成比较正常血清对照组低。研究结果表明中药平瘤康能阻滞C6胶质瘤细胞从G1期到S期的进程，降低瘤细胞的增殖能力。