隐孢子虫感染对奶牛免疫机能及抗氧化体系影响的研究

论文摘要

隐孢子虫病（Cryptosporidisis）是一种由隐孢子虫引起的呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。隐孢子虫（Cryptosporidium）可引起人和动物的急性腹泻,对反刍动物及免疫缺陷或免疫力降低的人和动物危害更为严重,也是人类艾滋病患者的主要致死因素之一。2003年该病被列为我国重点防范的两种重要寄生虫病之一。近20年来,隐孢子虫病研究在病原生物学、流行病学、免疫学、分子生物学、诊断及综合防治技术等方面取得许多重要成果,但是在治疗方面,尚未发现公认有效的药物,其主要原因是迄今没有揭示其完整的致病机理。本研究旨在通过对合肥市某奶牛场奶牛隐孢子虫感染情况进行检测,筛选出隐孢子虫感染强阳性奶牛,并通过对隐孢子虫感染强阳性奶牛的免疫机能、抗氧化体系及自由基、酶和无机离子等血液指标的检测及分析,进一步阐明隐孢子虫的致病机理,为人畜共患隐孢子虫病的防治提供理论依据。用金胺酚-改良抗酸染色法及饱和蔗糖漂浮法对安徽省某奶牛场325份奶牛粪样进行检测,其中金胺酚-改良抗酸染色法检出阳性奶牛88头,感染率为27.08%,饱和蔗糖漂浮法检出阳性奶牛103头,感染率为31.69%;根据所获卵囊的形态、大小和卵形指数等,初步鉴定为鼠隐孢子虫（Cryptosporidium muris）;对不同年龄段奶牛隐孢子虫感染情况进行统计和分析后发现:各年龄段奶牛均可感染隐孢子虫,但不同年龄段感染情况不同,青年牛和成年牛的感染率显著低于犊牛感染率（P＜0.05）,而青年牛和成年牛间差异不显著（P＞0.05）:各年龄段奶牛隐孢子虫感染强度不同,犊牛多为低强度感染,而成年牛多为高强度感染。以本次检测出的7头强阳性感染奶牛为试验组,并随机抽取同场7头阴性、健康奶牛作为对照组。静脉采集血液制备血清后进行下列指标的检测:免疫机能检测总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）、白细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率、白细胞介素-2（IL-2）等指标;抗氧化体系检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）等指标;其他酶类及生化指标的检测包括谷丙转氨酶（ALT/GPT）、谷草转氨酶（AST/GOT）、碱性磷酸酶（ALP）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、血清氯离子（Cl-）和钙离子(Ca2+)等。结果显示:与对照组相比,试验组的TP、ALB、IgM、ALT、AST、ALP、TG、Cl-和Ca2+的含量或活性均没有发生显著变化,而IgG、IgA、白细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率、IL-2、SOD、和GLU的含量或活性均显著降低（P＜0.05）,MDA的含量显著升高（P＜0.05）,NO的含量极显著升高（P＜0.01）。由此可见,当奶牛免疫机能缺陷或降低时,容易感染隐孢子虫,从而减弱了机体的抗氧化酶的活性及清除自由基的能力而导致体内自由基水平升高,ALT、AST、ALP、TG、CL、GSH-Px的含量变化不显著。变化均不显著（P＞0.05）,而GLU、和Ca2+血糖显著降低（P＜0.05）。综上所述,本课题所获的奶牛隐孢子虫检测结果为今后该场奶牛隐孢子虫病的防控提供了理论依据;通过对隐孢子虫感染奶牛免疫机能、抗氧化体系及其他酶类等指标的检测,进一步阐明了隐孢子虫的致病机理,对今后人畜共患隐孢子虫病防治药物的研究具有一定意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 主要图表
• 主要符号
• 文献综述
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 试剂
• 1.1.2 主要仪器及设备
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 奶牛粪便中隐孢子虫的检测
• 1.2.2 隐孢子虫感染奶牛免疫机能的检测
• 1.2.3 隐孢子虫感染奶牛血清抗氧化酶活性及自由基水平的检测
• 1.2.4 隐孢子虫感染奶牛其他生化指标的检测
• 1.2.5 统计学处理
• 2 结果与分析
• 2.1 奶牛隐孢子虫检测及鉴定结果
• 2.1.1 奶牛隐孢子虫虫种鉴定
• 2.1.2 不同年龄段奶牛隐孢子虫感染率
• 2.1.3 不同年龄段奶牛隐孢子虫感染强度
• 2.2 隐孢子虫感染奶牛免疫机能的检测结果
• 2.2.1 隐孢子虫感染奶牛体液免疫
• 2.2.2 隐孢子虫感染奶牛细胞免疫
• 2.3 隐孢子虫感染奶牛血清抗氧化酶活性和自由基水平检测结果
• 2.4 隐孢子虫感染奶牛其他生化指标检测结果
• 3 讨论
• 3.1 合肥市某奶牛场奶牛隐孢子虫感染情况
• 3.2 血液采集、血清分离及检测项目的稳定性对检测结果的影响
• 3.3 隐孢子虫感染奶牛免疫机能的变化
• 3.4 隐孢子虫感染奶牛血清抗氧化酶的变化
• 3.5 隐孢子虫感染奶牛血清生化指标的变化
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介