论文摘要
背景越来越多的临床和实验室证据表明炎症在动脉粥样硬化的发生发展中起重要的作用。而在炎症过程中,又以单核巨噬细胞在血管壁上的聚集和激活最为关键。它发生在从斑块形成、斑块破裂到血栓形成的各个阶段。血循环中的单核细胞是动脉粥样硬化性损伤中泡沫细胞的前体细胞,趋化因子在单核细胞由血液到血管壁的迁移中起十分重要的调控作用。趋化因子通常为分泌型的小分子量蛋白质（约8～12kD）,其主要作用为趋化和激活白细胞,参与炎症反应。到目前为止,已经鉴定的有50多种趋化因子和20种受体。根据其氨基端保守半胱氨酸残基的数目和间隔的结构特点,可分为4个亚族,即CC,CXC,C和CX3C族。Fraetakine（FKN）是目前为止CX3C家族的唯一成员,,具有膜结合型和游离型两种形式,各自发挥使外周血白细胞游走和粘附的作用,因此兼有趋化因子和细胞间粘附分子两种作用。FKN与其他趋化因子的最大区别在于它是一种跨膜糖蛋白,因而在生物学功能和疾病的发生发展过程中可能发挥着独特的作用。CX3CR1是趋化因子FKN的高亲和力受体,在白细胞如中性粒细胞、单核细胞、T淋巴细胞、自然杀伤细胞均有表达。将CX3CR1-/-插入到apoE-/-位置能减轻粥样硬化病变,减少巨噬细胞积聚。CX3CR1的基因多肽性与CAD的关系也已经引起人们的注意。已观察到在人类一些进展性动脉粥样硬化性损伤中Fractalkine mRNA表达上升,在AS进展过程的不同阶段,也发现损伤的内皮细胞上、巨噬细胞源性泡沫细胞和其它细胞以及动脉粥样斑块中过度表达FKN和CX3CR1。核因子—KappaB是一种具有基因转录多项调控作用的转录因子,已被发现存在于AS病变的主要组成细胞即单核细胞,血管内皮细胞和血管平滑肌细胞中。研究表明NF—KappaB可通过细胞间信号传导通路破坏内皮结构和功能的完整性,参与启动血管壁动脉粥样斑块的形成。他汀类和普罗布考是临床常用的两种调脂药物,但其降脂外的抗AS作用目前更受到重视。临床研究表明他汀有抑制FKN和CX3CR1表达水平的作用;普罗布考能够清除细胞内氧自由基,降低氧化性脂质及胆固醇的含量,并且能减少斑块脂质坏死核心的面积,具有稳定斑块的作用。两种药物均有研究报道具有抑制NF-KappaB活化的作用。但是目前为止关于高脂饮食及Ox-LDL导致的AS过程中,NF-KappaB与FKN及其受体CX3CR1的作用尚未十分明确,而他汀类和普罗布考干预对以上炎症因子表达的影响,文献报道少见。研究它们之间的关系,对于阐明他汀类药物和普罗布考抗AS的新机制有重要意义。目的通过研究氟伐他汀和普罗布考干预小鼠动脉粥样斑块内FKN以及NF-KappaB的表达,以及氟伐他汀/普罗布考干预对氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）诱导的HUVEC表达FKN和THP-1细胞表达CX3CR1的影响,阐明他汀类和普罗布考抗AS的新机制。方法1.高脂饮食喂养ApoE基因敲除雄性小鼠造成动脉粥样硬化模型,分别用氟伐他汀/普罗布考进行药物干预,光镜下观察动脉粥样硬化斑块,测量斑块最大厚度、斑块平均厚度、斑块面积占管腔面积百分数;PV（聚合酶）二步法免疫组化法检测主动脉FKN、NF-KappaBp65蛋白表达;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测主动脉FKNmRNA和NF-KappaB p65 mRNA表达。2.用不同浓度的Ox-LDL刺激HUVEC及用不同浓度普罗布考/氟伐他汀和PDTC预处理HUVEC后再用氧化低密度脂蛋白刺激,半定量RT-PCR方法检测FKN/NF-KappaB p65的mRNA的表达,WesternBlot方法检测FKN/NF-KappaB p65的蛋白表达。3.用不同浓度的Ox-LDL刺激THP-1细胞及用不同浓度普罗布考/氟伐他汀和PDTC预处理细胞后再用氧化低密度脂蛋白刺激,半定量RT-PCR方法检测CX3CR1以及NF-KappaB p65的mRNA的表达;Western Blot方法检测CX3CR1/NF-KappaBp65的蛋白表达。结果1.与普食组比较,高脂组的斑块最大厚度、斑块平均厚度、斑块面积占管腔面积百分数均显著增加（P＜0.01）,其FKN mRNA和NF-KappaB p65 mRNA的表达显著增加（p＜0.01）;而与高脂组比较,氟伐他汀组、普罗布考组、氟伐他汀组+普罗布考组的氟伐他汀组、普罗布考组及联合用药组的斑块最大厚度、斑块平均厚度、斑块面积占管腔面积百分数均显著降低（p＜0.01）:且其FKN mRNA和NF-KappaBp65 mRNA的表达显著下调（p＜0.01）;普罗布考组和氟伐他汀组间差异无显著性。联合用药较单用药物FKN mRNA和NF-KappaBp65 mRNA的表达差异有显著性（p＜0.01）。2.①与对照组比较,分别用25mg/L、50mg/L及100mg/L浓度的Ox-LDL刺激HUVEC,其FKN表达在mRNA及蛋白水平均上调（P＜0.01）,同时NF-KappaB p65 mRNA水平（P＜0.05）及蛋白水平（P＜0.01）亦上调,且呈浓度依赖性（100mg/L vs 25mg/L Ox-LDL组:P＜0.05）②普罗布考和氟伐他汀可以抑制Ox-LDL对FKN和NF-KappaB p65的上调（40μmol/L和80μmol/L普罗布考干预与对照组比较:P＜0.01;0.1μmol/L和1μmol/L氟伐他汀组与对照组比较:P＜0.01）,且抑制作用均呈药物浓度依赖性,联合用药较单药更明显（P＜0.05）;③PDTC预处理后再用Ox-LDL刺激HUVEC,与未用PDTC组比较,NF-KappaB p65 mRNA表达下调（P＜0.01）,细胞核NF-KappaBp65蛋白表达（P＜0.01）及FKN mRNA（P＜0.01）及FKN蛋白表达（P＜0.01）均明显下调。3.①与对照组比较,Ox-LDL呈浓度依赖性诱导THP-1细胞表达CX3CR1及NF-KappaB p65在mRNA水平（25mg/L、50mg/L、100mg/L组VS对照组分别为:P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01）及蛋白水平（25mg/L、50mg/L、100mg/L组VS对照组:P＜0.01）。②普罗布考和氟伐他汀可以抑制Ox-LDL诱导的上述表达（P＜0.05）,这两种药物的抑制作用均呈药物浓度依赖性趋势;与单药组比较,联合用药组抑制CX3CR1 mRNA及NF-KappaB p65 mRNA表达差异有显著性意义（P＜0.05）;抑制CX3CR1蛋白及细胞核NF-KappaB p65蛋白表达差异有非常显著性意义（P＜0.01）;（3）PDTC干预后,再用Ox-LDL刺激,与未用PDTC干预组（只用Ox-LDL刺激）比较,细胞核NF-KappaB p65蛋白水平明显下调（P＜0.01）,但CX3CR1 mRNA和蛋白的表达均无明显下调（P＞0.05）。结论1.高脂饮食可以导致ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的形成,在动脉粥样硬化斑块中,有FKN和NF-KappaB p65的高表达,氟伐他汀、普罗布考组及联合用药均能抑制FKN和NF-KappaB p65的表达,同时使动脉粥样硬化病变减轻。2.氧化低密度脂蛋白能够诱导HUVEC表达FKN,这种作用是通过NF-KappaB信号途径实现的;普罗布考和氟伐他汀可以通过抑制NF-KappaB的活化来抑制氧化低密度脂蛋白诱导HUVEC表达FKN。3.氧化低密度脂蛋白能够上调人单核细胞THP-1表达CX3CR1,这种作用是通过NF-KappaB以外信号途径实现的PDTC可以抑制NF-KappaB的活化、但是不能抑制氧化低密度脂蛋白上调人单核细胞THP-1表达CX3CR1;普罗布考和氟伐他汀可以抑制NF-KappaB的活化,亦能抑制氧化低密度脂蛋白上调人单核细胞THP-1表达CX3CR1,这种抑制作用与普罗布考和氟伐他汀抑制NF-KappaB的活化无关。
论文目录
相关论文文献
- [1].Fractalkine参与肾脏疾病发病机制研究进展[J]. 中国免疫学杂志 2020(05)
- [2].肿瘤坏死因子对人肾小管上皮细胞Fractalkine的表达及其对单核细胞趋化作用的影响[J]. 武警后勤学院学报(医学版) 2017(07)
- [3].瑞舒伐他汀对慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者循环Fractalkine的影响[J]. 内蒙古医学杂志 2015(12)
- [4].2型糖尿病视网膜病变患者血清Fractalkine与血脂、血糖的相关性研究[J]. 中国现代医学杂志 2017(01)
- [5].阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者循环中fractalkine表达的影响[J]. 中国临床医学 2016(03)
- [6].Fractalkine参与狼疮性肾炎发病机制的研究进展[J]. 医学研究生学报 2013(07)
- [7].氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达的影响及机制[J]. 中国动脉硬化杂志 2009(07)
- [8].氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达的影响及机制分析[J]. 中国动脉硬化杂志 2009(10)
- [9].普罗布考抑制氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞Fractalkine的表达[J]. 临床心血管病杂志 2008(03)
- [10].Fractalkine与尿酸、血脂的相关性研究[J]. 中国当代医药 2016(32)
- [11].急性冠状动脉综合征患者Fractalkine水平的研究[J]. 中国介入心脏病学杂志 2012(04)
- [12].子宫内膜腺癌趋化因子Fractalkine的阳性表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健 2012(06)
- [13].氯化锂调节趋化因子Fractalkine表达抑制缺氧复氧诱导的血管内皮细胞损伤[J]. 重庆医科大学学报 2011(07)
- [14].糖基化终产物对人肾小管上皮细胞Fractalkine表达的影响[J]. 医学研究生学报 2010(10)
- [15].可溶性fractalkine与神经精神性狼疮的相关性[J]. 上海医学 2008(11)
- [16].急性冠状动脉综合征患者外周血β2整合素和Fractalkine的表达水平及机制研究[J]. 中国现代医学杂志 2019(10)
- [17].Fractalkine在狼疮性肾炎患者血液和肾组织中的表达及其意义[J]. 南方医科大学学报 2013(04)
- [18].Fractalkine对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响[J]. 解剖学研究 2010(05)
- [19].趋化因子Fractalkine与缺血性脑卒中[J]. 华夏医学 2015(05)
- [20].尿液Fractalkine水平与轻度认知功能障碍相关性研究[J]. 阿尔茨海默病及相关病 2019(02)
- [21].六味地黄丸对狼疮肾炎患者糖基化终末产物受体、单核细胞趋化蛋白1及趋化因子Fractalkine的影响[J]. 临床肾脏病杂志 2017(08)
- [22].辛伐他汀抑制白细胞介素-18诱导的人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达和黏附作用[J]. 中国药理学通报 2009(11)
- [23].氨氯地平联合阿托伐他汀钙对原发性高血压患者血清Fractalkine与内皮功能的影响[J]. 现代生物医学进展 2019(24)
- [24].川芎嗪对慢性肺源性心脏病患者趋化因子Fractalkine及肿瘤坏死因子-α表达的影响[J]. 中国中西医结合杂志 2010(04)
- [25].低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞和肺微血管内皮细胞表达及分泌fractalkine的影响[J]. 四川大学学报(医学版) 2012(05)
- [26].fractalkine影响动脉粥样硬化信号的转导机制及卡托普利的干预作用[J]. 吉林大学学报(医学版) 2008(06)
- [27].血清Fractalkine、高敏C反应蛋白、血管内皮生长因子及白介素8与2型糖尿病视网膜病变的相关性分析[J]. 中国地方病防治杂志 2016(07)
- [28].伊贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾皮质fractalkine表达的影响[J]. 中国糖尿病杂志 2011(02)
- [29].Fractalkine对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响[J]. 中国应用生理学杂志 2009(04)
- [30].参芪扶正注射液对急性脑梗恢复期患者血清hs-CRP、趋化因子Fractalkine及血液指标的影响研究[J]. 中西医结合心血管病电子杂志 2016(26)
标签：基因敲除小鼠论文; 核因子论文; 动脉粥样硬化论文; 氟伐他汀论文; 普罗布考论文; 人脐静脉内皮细胞论文; 氧化低密度脂蛋白论文; 人单核细胞论文;